| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-14页 |
| 1.1 蜱及蜱传病的危害和防治 | 第9-10页 |
| 1.2 抗蜱疫苗的研究进展 | 第10-11页 |
| 1.3 serpins的研究进展 | 第11-14页 |
| 第二章 褐黄血蜱中肠转录组分析 | 第14-33页 |
| 2.1 材料和方法 | 第14-15页 |
| 2.1.1 褐黄血蜱 | 第14页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第14页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第14页 |
| 2.1.4 蜱中肠的收集 | 第14-15页 |
| 2.1.5 蜱中肠的总RNA提取 | 第15页 |
| 2.1.6 蜱中肠的总RNA纯化 | 第15页 |
| 2.1.7 蜱中肠的高通量测序 | 第15页 |
| 2.2 结果与分析 | 第15-31页 |
| 2.2.1 转录组测序和中肠转录组的短序列组装 | 第15-16页 |
| 2.2.2 功能注释 | 第16-17页 |
| 2.2.3 功能分类 | 第17-19页 |
| 2.2.4 中肠转录组分析 | 第19-25页 |
| 2.2.5 差异表达基因(DEGs) | 第25页 |
| 2.2.6 DEGs的功能富集分析 | 第25-26页 |
| 2.2.7 简单重复序列(SSRs)和开放型阅读框(ORF) | 第26-31页 |
| 2.3 讨论 | 第31-33页 |
| 第三章 褐黄血蜱serpin 2基因的全长克隆 | 第33-48页 |
| 3.1 材料 | 第33-34页 |
| 3.1.1 褐黄血蜱 | 第33页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第33页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第33页 |
| 3.1.4 引物设计 | 第33-34页 |
| 3.2 方法 | 第34-40页 |
| 3.2.1 褐黄血蜱总RNA提取 | 第34页 |
| 3.2.2 cDNA第一链的合成 | 第34-35页 |
| 3.2.3 Contig7475的未知序列的扩增 | 第35-36页 |
| 3.2.4 serpin 2基因3'-RACE | 第36-38页 |
| 3.2.5 serpin 2基因5'-RACE | 第38-40页 |
| 3.2.6 褐黄血蜱serpin 2基因的全长 | 第40页 |
| 3.3 结果与分析 | 第40-44页 |
| 3.3.1 总RNA检测结果 | 第40-41页 |
| 3.3.2 Contig7475中未知部分的扩增 | 第41页 |
| 3.3.3 Contig7475中未知部分的序列 | 第41页 |
| 3.3.4 serpin 2基因3’-RACE结果 | 第41-42页 |
| 3.3.5 serpin 2基因5’-RACE结果 | 第42-43页 |
| 3.3.6 褐黄血蜱的serpin 2基因全长 | 第43-44页 |
| 3.4 讨论 | 第44-48页 |
| 3.4.1 Contig7475的序列分析 | 第44页 |
| 3.4.2 褐黄血蜱的serpin 2的信号肽 | 第44-45页 |
| 3.4.3 褐黄血蜱的serpin 2的3D结构 | 第45-46页 |
| 3.4.4 褐黄血蜱的serpin 2同源性比较 | 第46-47页 |
| 3.4.5 RACE的注意事项 | 第47-48页 |
| 第四章 褐黄血蜱serpin 2的表达、鉴定 | 第48-58页 |
| 4.1 材料 | 第48-49页 |
| 4.1.1 褐黄血蜱 | 第48页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第48页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第48页 |
| 4.1.4 引物设计 | 第48-49页 |
| 4.2 方法 | 第49-53页 |
| 4.2.3 表达片段的克隆 | 第49-50页 |
| 4.2.4 表达质粒的构建 | 第50页 |
| 4.2.5 Serpin 2的表达 | 第50页 |
| 4.2.6 重组蛋白的鉴定 | 第50-51页 |
| 4.2.7 serpin 2融合蛋白的纯化 | 第51-52页 |
| 4.2.8 serpin 2融合蛋白的功能鉴定 | 第52-53页 |
| 4.3 结果与分析 | 第53-56页 |
| 4.3.1 总RNA检测结果 | 第53页 |
| 4.3.2 目的片段和表达载体的双酶切结果 | 第53页 |
| 4.3.3 重组质粒的鉴定结果 | 第53-54页 |
| 4.3.4 重组蛋白的原核表达 | 第54-55页 |
| 4.3.5 Western Blotting分析 | 第55页 |
| 4.3.6 serpin 2融合蛋白的纯化 | 第55页 |
| 4.3.7 serpin 2融合蛋白的功能鉴定 | 第55-56页 |
| 4.4 讨论 | 第56-58页 |
| 第五章 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 作者简介 | 第68页 |
