| 中文摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 本论文主要创新点 | 第12-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-36页 |
| 1.1 蛋白组学概述及研究细胞内新生成蛋白的重要性 | 第13-14页 |
| 1.2 细胞内新生成蛋白的研究现状 | 第14-28页 |
| 1.2.1 基于生物正交标记的荧光成像法和质谱法 | 第15-21页 |
| 1.2.2 生物正交标记的受激拉曼散射成像法 | 第21-23页 |
| 1.2.3 放射自显影术法 | 第23页 |
| 1.2.4 二次离子质谱法 | 第23-28页 |
| 1.3 本论文的主要研究内容 | 第28-29页 |
| 参考文献 | 第29-36页 |
| 第二章 细胞内新生成蛋白和特定磷脂的同时质谱成像研究 | 第36-57页 |
| 2.1 前言 | 第36-38页 |
| 2.2 实验部分 | 第38-40页 |
| 2.2.1 试剂与仪器 | 第38页 |
| 2.2.2 细胞培养 | 第38-39页 |
| 2.2.3 掺入~(15)N氨基酸和样品制备 | 第39页 |
| 2.2.4 共聚焦实验 | 第39页 |
| 2.2.5 Burst Mode分析 | 第39-40页 |
| 2.2.6 TOF-SIMS成像 | 第40页 |
| 2.2.7 3D重构 | 第40页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第40-54页 |
| 2.3.1 Burst Mode的选择 | 第40-41页 |
| 2.3.2 蛋白和磷脂特征峰的表征 | 第41-43页 |
| 2.3.3 细胞内新生成蛋白和磷脂的同时成像 | 第43-44页 |
| 2.3.4 新生成蛋白随时间变化实验 | 第44-46页 |
| 2.3.5 蛋白抑制剂的对照实验 | 第46-47页 |
| 2.3.6 细胞分裂过程中新生成蛋白和磷脂的同时检测 | 第47-51页 |
| 2.3.7 溅射速率的测量 | 第51-52页 |
| 2.3.8 新生成蛋白和磷脂的3D成像 | 第52-54页 |
| 2.4 结论 | 第54页 |
| 参考文献 | 第54-57页 |
| 第三章 细胞内新生成蛋白和特定脂肪酸同时质谱成像研究 | 第57-67页 |
| 3.1 前言 | 第57-59页 |
| 3.2 实验部分 | 第59-60页 |
| 3.2.1 实验试剂 | 第59页 |
| 3.2.2 细胞培养 | 第59页 |
| 3.2.3 AHA的掺入和click反应 | 第59-60页 |
| 3.2.4 TOF-SIMS检测 | 第60页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第60-65页 |
| 3.3.1 新生成蛋白特征峰的表征 | 第60-61页 |
| 3.3.2 新生成蛋白的成像 | 第61-62页 |
| 3.3.3 不同时间的新生成蛋白成像 | 第62-63页 |
| 3.3.4 脂肪酸或核酸的同时成像 | 第63-65页 |
| 3.4 结论 | 第65页 |
| 参考文献 | 第65-67页 |
| 第四章 细胞内新生成特定蛋白的荧光成像研究 | 第67-87页 |
| 4.1 前言 | 第67-69页 |
| 4.2 实验部分 | 第69-72页 |
| 4.2.1 试剂与仪器 | 第69-70页 |
| 4.2.2 细胞培养 | 第70页 |
| 4.2.3 AHA培养和click反应 | 第70-71页 |
| 4.2.4 免疫实验 | 第71页 |
| 4.2.5 FRET成像 | 第71页 |
| 4.2.6 FLIM成像 | 第71页 |
| 4.2.7 转染实验 | 第71-72页 |
| 4.2.8 免疫沉淀实验 | 第72页 |
| 4.3 结果和讨论 | 第72-85页 |
| 4.3.1 FRET染料对的选择 | 第72-73页 |
| 4.3.2 细胞内新生成TDP-43的成像 | 第73-77页 |
| 4.3.3 细胞内新生成tubulin和CaMKⅡα的成像 | 第77-81页 |
| 4.3.4 FLIM成像新生成蛋白 | 第81-82页 |
| 4.3.5 分子内FRET信号 | 第82-85页 |
| 4.4 结论 | 第85-86页 |
| 参考文献 | 第86-87页 |
| 附录 | 第87-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
