| 致谢 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 第一章 文献综述 线粒体基因组的稳定性及其调控机制 | 第12-27页 |
| 1 引言 | 第12页 |
| 2 线粒体基因组及其拟核结构 | 第12-17页 |
| ·线粒体基因组的特征 | 第12-14页 |
| ·线粒体拟核及拟核相关蛋白 | 第14-17页 |
| ·线粒体拟核 | 第14-15页 |
| ·拟核相关蛋白 | 第15-17页 |
| 3 线粒体基因组的稳定性及调控 | 第17-20页 |
| ·造成线粒体基因组稳定性破坏的因素 | 第17-18页 |
| ·维持线粒体DNA稳定性的机制 | 第18-19页 |
| ·线粒体基因组稳定性的破坏与疾病 | 第19-20页 |
| 4 线粒体DNA的拷贝数及其调控 | 第20-26页 |
| ·线粒体DNA拷贝数的调控机制 | 第20-25页 |
| ·线粒体DNA拷贝数调控的基本原理 | 第20-21页 |
| ·线粒体拷贝数的调控 | 第21-22页 |
| ·酵母细胞线粒体DNA拷贝数的调控机制 | 第22-24页 |
| ·动物线粒体DNA拷贝数的调控机制 | 第24-25页 |
| ·线粒体DNA的拷贝数与疾病 | 第25-26页 |
| 5 总结 | 第26-27页 |
| 第二章 实验研究 | 第27-65页 |
| 1 引言 | 第27-28页 |
| 2 实验材料 | 第28-35页 |
| ·实验菌株 | 第28-29页 |
| ·实验试剂 | 第29页 |
| ·酶类相关试剂 | 第29页 |
| ·培养基原料 | 第29页 |
| ·其它试剂 | 第29页 |
| ·实验试剂的配制 | 第29-34页 |
| ·试剂盒 | 第34页 |
| ·实验仪器 | 第34-35页 |
| 3 实验方法 | 第35-50页 |
| ·相关质粒的构建 | 第35-42页 |
| ·蜗牛酶法提取野生型酵母基因组 | 第35页 |
| ·相关引物的设计 | 第35-36页 |
| ·SLS1基因的PCR扩增 | 第36-37页 |
| ·将SLS1基因克隆至TA载体 | 第37页 |
| ·连接产物转化大肠杆菌感受态细胞 | 第37-38页 |
| ·质粒的提取与鉴定 | 第38-39页 |
| ·各种质粒的构建与鉴定 | 第39-42页 |
| ·酵母菌株的构建 | 第42-44页 |
| ·SLS1基因敲除型菌株(W1021-7CASLS1)的构建 | 第42-43页 |
| ·将pGFP-C-FUS-SLS1和pGFP-C-FUS质粒导入野生酵母细胞 | 第43-44页 |
| ·SLS1基因恢复表达与过表达菌株的构建 | 第44页 |
| ·Sls1p的亚细胞定位及菌株线粒体活性分析 | 第44-45页 |
| ·酵母菌株的生长状态分析 | 第45-46页 |
| ·酵母菌株基因组的Southern杂交 | 第46-50页 |
| ·探针的制备 | 第46-47页 |
| ·DNA的转移与固定 | 第47-49页 |
| ·杂交 | 第49页 |
| ·免疫检测 | 第49-50页 |
| ·DNA印记的洗脱与再杂交 | 第50页 |
| 4 实验结果与分析 | 第50-62页 |
| ·Sls1p的亚细胞定位 | 第50-51页 |
| ·SLS1基因的敲除对线粒体功能的影响 | 第51-53页 |
| ·W1021-7C△SLS1酵母菌株的生长状态分析 | 第51-52页 |
| ·W1021-7C△SLS1酵母菌株的线粒体活性分析 | 第52-53页 |
| ·SLS1基因的敲除对酵母mtDNA的影响 | 第53-55页 |
| ·SLS1基因的恢复表达对酵母mtDNA的影响 | 第55-59页 |
| ·恢复表达菌株的生长状态分析 | 第55-56页 |
| ·恢复表达菌株的Southern杂交分析 | 第56-59页 |
| ·SLS1基因的过表达对酵母mtDNA的影响 | 第59-62页 |
| ·过表达菌株的生长状态分析 | 第59页 |
| ·过表达菌株的Southern杂交分析 | 第59-62页 |
| 5 讨论 | 第62-65页 |
| ·酵母基因组稳定性与拷贝数的调控机制 | 第62-63页 |
| ·酵母基因组稳定性的维持机制 | 第62页 |
| ·酵母基因组拷贝数的调控机制 | 第62-63页 |
| ·Sls1p与mtDNA的稳定性密切相关 | 第63页 |
| ·Sls1p可能是一种新的拟核相关蛋白 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-75页 |
| 简历 | 第75页 |
