| 基金项目 | 第1-4页 |
| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 缩略语表 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-16页 |
| 1 同源异型框基因 | 第12页 |
| 2 Prrx 家族 | 第12-15页 |
| 3 选题目的、主要内容和意义 | 第15-16页 |
| 第二章 Prrx基因家族的克隆及生物信息学分析 | 第16-39页 |
| 1 材料 | 第16-17页 |
| ·实验材料 | 第16页 |
| ·主要试剂 | 第16页 |
| ·主要仪器 | 第16-17页 |
| 2 方法 | 第17-20页 |
| ·引物设计 | 第17页 |
| ·总RNA的提取和CDNA的合成 | 第17页 |
| ·目的基因的克隆测序 | 第17-19页 |
| ·Prrx1a、Prrx1b、Prrx2、Prrx3蛋白的的生物信息学分析 | 第19-20页 |
| 3 结果 | 第20-37页 |
| ·家兔Prrx1a、Prrx1b、Prrx2、Prrx3基因的克隆及同源性比对 | 第20-24页 |
| ·Prrx1a、Prrx1b、Prrx2、Prrx3蛋白的生物信息学分析 | 第24-37页 |
| 4 讨论 | 第37-38页 |
| 5 小结 | 第38-39页 |
| 第三章 Prrx基因家族融合蛋白表达及Western blot分析 | 第39-54页 |
| 1 材料 | 第39-41页 |
| ·主要试剂 | 第39页 |
| ·相关溶液配制 | 第39-41页 |
| 2 方法 | 第41-43页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第41页 |
| ·融合蛋白的诱导表达 | 第41-42页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE检查 | 第42页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第42页 |
| ·重组蛋白的Western blot检测 | 第42-43页 |
| 3 结果 | 第43-53页 |
| ·p ET32a(+)-Prrx1a/Prrx1b/Prrx2/Prrx3重组质粒的双酶切鉴定结果 | 第43-44页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE检测 | 第44-49页 |
| ·纯化重组蛋白 | 第49-50页 |
| ·Western blot 检测结果 | 第50-51页 |
| ·p ET32a(+)-Prrx1a/Prrx1b/Prrx2/Prrx3的质粒图谱 | 第51-53页 |
| 4 讨论 | 第53页 |
| 5 小结 | 第53-54页 |
| 第四章 家兔不同发育阶段和组织中内参基因的稳定性分析 | 第54-64页 |
| 1 材料 | 第55页 |
| 2 方法 | 第55-56页 |
| ·总RNA提取和CDNA合成 | 第55页 |
| ·引物的特异性鉴定及阳性标准品的制备 | 第55-56页 |
| ·RT-PCR扩增 | 第56页 |
| ·表达数据分析 | 第56页 |
| 3 结果 | 第56-62页 |
| ·内参基因引物的特异性 | 第56-57页 |
| ·各基因的扩增曲线和溶解曲线 | 第57-59页 |
| ·阳性标准品的制备及标准曲线的构建 | 第59页 |
| ·内参基因在各组织不同时期的表达稳定性 | 第59-60页 |
| ·内参基因在各时期不同组织的表达稳定性 | 第60-61页 |
| ·内参基因在不同时期不同组织的表达稳定 | 第61-62页 |
| 4 讨论 | 第62-63页 |
| 5 小结 | 第63-64页 |
| 第五章 Prrx1、Prrx2和Prrx3的表达图谱 | 第64-74页 |
| 1 材料 | 第64页 |
| ·实验动物 | 第64页 |
| ·实验器材 | 第64页 |
| 2 方法 | 第64-66页 |
| ·总RNA的提取和c DNA的合成 | 第64页 |
| ·目的基因引物的特异性鉴定及阳性标准品的制备 | 第64-65页 |
| ·目的基因RT-PCR的扩增 | 第65-66页 |
| ·数据处理 | 第66页 |
| 3 结果 | 第66-72页 |
| ·Prrx1、Prrx1a、Prrx1b、Prrx2、Prrx3和GAPDH基因引物的特异 | 第66页 |
| ·Prrx1、Prrx1a、Prrx1b、Prrx2、Prrx3和GAPDH基因的扩增曲线和溶解曲线 | 第66-68页 |
| ·Prrx1、Prrx1a、Prrx1b、Prrx2、Prrx3和GAPDH基因阳性标准品的制备和标准曲线的制作 | 第68-69页 |
| ·Prrx1、Prrx1a和Prrx1b基因的表达图谱 | 第69-71页 |
| ·Prrx2基因的表达图谱 | 第71-72页 |
| ·Prrx3基因的表达图谱 | 第72页 |
| 4 讨论 | 第72-73页 |
| 5 小结 | 第73-74页 |
| 第六章 Prrx家族蛋白的免疫组化分析 | 第74-86页 |
| 1 材料 | 第74页 |
| ·实验仪器 | 第74页 |
| ·主要试剂 | 第74页 |
| ·溶液配制 | 第74页 |
| 2 方法 | 第74-76页 |
| ·标本的取材及处理 | 第74-75页 |
| ·石蜡切片的制作 | 第75页 |
| ·HE染色 | 第75页 |
| ·免疫组织化学检测 | 第75-76页 |
| ·结果观察 | 第76页 |
| 3 结果 | 第76-84页 |
| ·新西兰白兔肝组织中Prrxs的表达 | 第76-78页 |
| ·新西兰白兔肾组织中Prrxs的表达 | 第78-79页 |
| ·新西兰白兔心组织中Prrxs的表达 | 第79-81页 |
| ·新西兰白兔肺组织中Prrxs的表达 | 第81-82页 |
| ·新西兰白兔脑组织中Prrxs的表达 | 第82-83页 |
| ·新西兰白兔脾组织中Prrxs的表达 | 第83-84页 |
| 4 讨论 | 第84-85页 |
| 5 小结 | 第85-86页 |
| 全文结论 | 第86-90页 |
| 全文创新点 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-98页 |
| 攻读硕士期间发表的论文 | 第98-99页 |
| 致谢 | 第99-100页 |
