| 中文摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-32页 |
| ·蛋白质的折叠复性 | 第10-13页 |
| ·蛋白质的结构与活性 | 第10页 |
| ·蛋白质的折叠机理 | 第10-11页 |
| ·影响蛋白质折叠复性的关键因素 | 第11-13页 |
| ·促进蛋白质二硫键形成的方法 | 第13-18页 |
| ·体内促进蛋白质二硫键形成的氧化还原酶 | 第13-17页 |
| ·体外促进蛋白质二硫键形成的小分子氧化还原剂 | 第17-18页 |
| ·抑制蛋白质聚集的方法 | 第18-25页 |
| ·体内抑制蛋白质聚集的分子伴侣 | 第18-19页 |
| ·体外抑制蛋白质聚集的小分子抑制剂 | 第19-21页 |
| ·色谱复性 | 第21-24页 |
| ·其他抑制聚集的复性方法 | 第24-25页 |
| ·蛋白质的亲和纯化技术 | 第25-29页 |
| ·亲和纯化的原理 | 第26页 |
| ·亲和纯化的种类 | 第26-27页 |
| ·金属螯合亲和纯化 | 第27-29页 |
| ·本研究的内容及意义 | 第29-32页 |
| 第二章 二硫键异构酶模拟寡肽的设计及其促进蛋白质氧化复性 | 第32-45页 |
| ·引言 | 第32-33页 |
| ·材料和方法 | 第33-36页 |
| ·实验材料 | 第33页 |
| ·蛋白质的还原变性 | 第33页 |
| ·蛋白质的氧化复性动力学 | 第33-34页 |
| ·蛋白质的酶活测定 | 第34页 |
| ·二硫键氧化还原势的测定 | 第34-35页 |
| ·巯醇pKa值的测定 | 第35-36页 |
| ·实验结果与讨论 | 第36-44页 |
| ·二硫键异构酶模拟寡肽的设计 | 第36-38页 |
| ·不同氧化剂的比较 | 第38-41页 |
| ·较高浓度溶菌酶的复性 | 第41-44页 |
| ·小结 | 第44-45页 |
| 第三章 高电荷密度的纳米粒子在蛋白质吸附和同电荷蛋白质复性中的应用 | 第45-58页 |
| ·引言 | 第45-46页 |
| ·材料和方法 | 第46-50页 |
| ·实验材料 | 第46页 |
| ·二氧化硅纳米粒子表面的电荷修饰 | 第46-47页 |
| ·电荷修饰的纳米粒子的表征 | 第47-49页 |
| ·溶菌酶的变性和复性 | 第49页 |
| ·溶菌酶的酶活测定 | 第49-50页 |
| ·实验结果与讨论 | 第50-57页 |
| ·电荷修饰的纳米粒子的性质表征 | 第50-52页 |
| ·电荷修饰的纳米粒子对BSA的吸附 | 第52-53页 |
| ·电荷修饰的纳米粒子辅助溶菌酶复性 | 第53-54页 |
| ·电荷修饰的纳米粒子与微米球辅助溶菌酶复性效果的比较 | 第54-57页 |
| ·小结 | 第57-58页 |
| 第四章 同电荷金属螯合介质辅助 6×his-EGFP包含体的复性与集成纯化过程 | 第58-79页 |
| ·引言 | 第58-59页 |
| ·材料和方法 | 第59-67页 |
| ·实验材料 | 第59页 |
| ·亚氨基二乙酸修饰的Sepharose FF介质的制备 | 第59页 |
| ·IDA-Sepharose FF介质的性质表征 | 第59-61页 |
| ·重组绿色荧光蛋白包含体的制备 | 第61-62页 |
| ·包含体中目标蛋白 6×his-EGFP纯度的测定 | 第62-63页 |
| ·总蛋白质含量的测定 | 第63-64页 |
| ·天然 6×his-EGFP的纯化 | 第64-65页 |
| ·活性 6×his-EGFP的荧光标准曲线测定 | 第65-66页 |
| ·6×his-EGFP的变性和复性 | 第66页 |
| ·IDA-Sepharose FF介质的临界金属离子浓度测定 | 第66-67页 |
| ·复性后 6×his-EGFP的金属螯合亲和吸附 | 第67页 |
| ·结果与讨论 | 第67-78页 |
| ·介质的性质表征 | 第67页 |
| ·纯化 6×his-EGFP的复性 | 第67-69页 |
| ·6×his-EGFP的金属螯合亲和吸附 | 第69-73页 |
| ·6×his-EGFP包含体的复性与集成纯化 | 第73-78页 |
| ·小结 | 第78-79页 |
| 第五章 高电荷密度的金属螯合纳米介质强化 6×his-EGFP包含体的复性与集成纯化 | 第79-93页 |
| ·引言 | 第79-80页 |
| ·材料和方法 | 第80-83页 |
| ·实验材料 | 第80页 |
| ·ATRP方法制备接枝型纳米粒子SNPs-PGI | 第80-81页 |
| ·纳米介质SNPs-PGI的性质表征 | 第81-82页 |
| ·天然 6×his-EGFP的纯化和包含体的制备 | 第82页 |
| ·6×his-EGFP包含体的变性和复性 | 第82页 |
| ·镍离子对复性后 6×his-EGFP包含体的分离纯化 | 第82-83页 |
| ·实验结果与讨论 | 第83-92页 |
| ·SNPs-PGI的制备和性质表征 | 第83-85页 |
| ·SNPs-PGI的电荷性质和 6×his-EGFP吸附容量 | 第85页 |
| ·SNPs-PGI辅助 6×his-EGFP包含体复性 | 第85-89页 |
| ·SNPs-PGI对复性后 6×his-EGFP包含体的纯化 | 第89-92页 |
| ·小结 | 第92-93页 |
| 第六章 结论与展望 | 第93-96页 |
| ·结论 | 第93-95页 |
| ·主要创新点 | 第95页 |
| ·展望 | 第95-96页 |
| 参考文献 | 第96-110页 |
| 附录 | 第110-112页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第112-114页 |
| 致谢 | 第114-115页 |
