摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-10页 |
文献综述 | 第10-17页 |
·梅山与杜洛克母猪繁殖力的差异 | 第10页 |
·猪的卵巢发育和排卵数 | 第10-12页 |
·发情周期卵泡的发育 | 第10-11页 |
·排卵率的机理 | 第11-12页 |
·猪排卵的数量与其卵巢的关系 | 第12页 |
·差异显示技术的研究进展 | 第12-15页 |
·DDRT-PCR技术的主要原理 | 第12-13页 |
·DDRT-PCR技术的优点 | 第13-14页 |
·差异显示PCR技术的不足 | 第14页 |
·差异显示PCR技术上的改进与完善 | 第14页 |
·DDRT-PCR技术的应用 | 第14-15页 |
·差异显示技术在卵巢组织差异表达基因的研究进展 | 第15页 |
·研究的目的和意义 | 第15-17页 |
2 材料和方法 | 第17-24页 |
·组织样 | 第17页 |
·实验材料和设备 | 第17页 |
·主要试剂和试剂盒 | 第17-18页 |
·缓冲液和常用试剂的配制 | 第18-19页 |
·引物 | 第19-20页 |
·实验方法 | 第20-23页 |
·总RNA的提取及鉴定 | 第20-21页 |
·RNA池的制备 | 第21页 |
·cDNA的合成 | 第21页 |
·DDRT-PCR反应 | 第21页 |
·12%聚丙烯酰胺凝胶的制作及电泳 | 第21页 |
·银染法显色 | 第21-22页 |
·差异片段的切取 | 第22页 |
·EST重扩增 | 第22页 |
·EST重扩增产物回收与纯化 | 第22页 |
·EST重扩增产物的克隆 | 第22-23页 |
·连接产物的转化 | 第23页 |
·差异显示EST的半定量RT-PCR鉴定 | 第23页 |
·差异显示EST的半定量RT-PCR组织表达分析 | 第23页 |
·基因序列分析 | 第23-24页 |
3 结果和分析 | 第24-41页 |
·组织总RNA的提取 | 第24页 |
·CDNA质量检测 | 第24页 |
·DD-PCR和产物检测 | 第24-26页 |
·梅山与杜洛克母猪发情前期卵巢组织差异表达EST的分离、鉴定及组织表达谱分析 | 第26-35页 |
·EST511的分离、鉴定及组织表达谱分析 | 第26-27页 |
·EST141的分离、鉴定及组织表达谱分析 | 第27-29页 |
·EST64的分离、鉴定及组织表达谱分析 | 第29-31页 |
·EST142的分离、鉴定及组织表达谱分析 | 第31-33页 |
·EST33的分离、鉴定及组织表达谱分析 | 第33-35页 |
·序列分析 | 第35-41页 |
·EST511 | 第35-36页 |
·EST141 | 第36-37页 |
·EST142 | 第37-38页 |
·EST64 | 第38-39页 |
·EST33 | 第39-41页 |
4 讨论 | 第41-46页 |
·DDRT-PCR反应的优化 | 第41页 |
·保证总RNA的质量 | 第41页 |
·降低dNTP浓度 | 第41页 |
·选择最适PCR退火温度 | 第41页 |
·关于差异表达基因的重扩增 | 第41页 |
·关于差异基因的鉴定 | 第41-42页 |
·关于引物设计的原则 | 第42页 |
·差异序列的生物信息学分析及与繁殖性状的关系 | 第42-46页 |
·EST141 | 第42-44页 |
·EST511 | 第44页 |
·EST64 | 第44-45页 |
·EST33 | 第45-46页 |
5 小结 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
自我简介 | 第53-54页 |
导师评阅表 | 第54页 |