摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-9页 |
1. 前言 | 第9-19页 |
·研究背景,国内外进展,发展趋势 | 第9-15页 |
·研究背景 | 第9-10页 |
·国内外研究历史、现状 | 第10-14页 |
·发展趋势 | 第14-15页 |
·代谢工程的基因表达调控策略 | 第15-16页 |
·研究目的及意义,研究基础,研究内容 | 第16-19页 |
·研究目的及意义 | 第16页 |
·研究基础 | 第16-17页 |
·研究内容 | 第17-19页 |
2 材料与方法 | 第19-43页 |
·材料 | 第19-21页 |
·主要试剂 | 第19-20页 |
·仪器与设备 | 第20页 |
·菌株和质粒 | 第20-21页 |
·培养基 | 第21页 |
·分析方法 | 第21-23页 |
·菌种培养方法 | 第21-22页 |
·β-胡萝卜素产量的检测方法 | 第22页 |
·化学转化感受态细胞的制备及转化 | 第22页 |
·两步同源重组法制备重组菌株 | 第22-23页 |
·表达外源胡萝卜素基因的质粒构建 | 第23-27页 |
·用不同的调控元件在大肠杆菌MG1655中对类异戊二烯基因的表达进行调控 | 第27-31页 |
·整合β-胡萝卜素合成基因到大肠杆菌ATCC8739染色体上,并对类异戊二烯基因的表达进行调控 | 第31-35页 |
·两步同源重组法将β-胡萝卜素合成基因整合到大肠杆菌ATCC 8739染色体上 | 第31-32页 |
·使用不同的调控元件在染色体水平上对QL002菌株进行调控 | 第32-35页 |
·用不同的调控元件,对CAR001的中央代谢途径进行调控 | 第35-42页 |
·用不同的调控元件调控TCA循环和PPP途径,以提高NADPH的供给 | 第36页 |
·用不同的调控元件调控ATP合成途径,以提高ATP的供给 | 第36-37页 |
·用不同的调控元件调控中央代谢途径,以提高前体丙酮酸的供给 | 第37页 |
·组合调控CAR001菌株,提高β-胡萝卜素的含量 | 第37-42页 |
·高密度发酵重组菌株CAR005 | 第42-43页 |
3 结果与讨论 | 第43-58页 |
·表达载体的构建 | 第43页 |
·外源胡萝卜素基因表达质粒的构建 | 第43-44页 |
·不同质粒对β-胡萝卜素产量的影响 | 第44-45页 |
·调控萜类合成途径基因的表达来提高β-胡萝卜素产量 | 第45-46页 |
·染色体水平上,调控萜类合成途径基因的表达来提高β-胡萝卜素产量 | 第46-49页 |
·重组大肠杆菌QL002中β-胡萝卜素含量测定结果 | 第47页 |
·组合调控QL002中的类异戊二烯合成途径及β-胡萝卜素合成途径 | 第47-48页 |
·重组大肠杆菌CAR001中β-胡萝卜素含量测定结果 | 第48-49页 |
·调控中央代谢途径基因的表达来提高β-胡萝卜素产量 | 第49-56页 |
·一步法调控中央代谢的结果 | 第49-52页 |
·组合调控中央代谢的结果 | 第52-56页 |
·高密度发酵重组大肠杆菌CAR005 | 第56-58页 |
4 结论 | 第58-59页 |
5 展望 | 第59-60页 |
6 参考文献 | 第60-67页 |
7 论文发表情况 | 第67-68页 |
8 致谢 | 第68-69页 |
附录 | 第69-71页 |