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高产β-胡萝卜素大肠杆菌细胞工厂的构建与优化

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-9页
1. 前言第9-19页
   ·研究背景,国内外进展,发展趋势第9-15页
     ·研究背景第9-10页
     ·国内外研究历史、现状第10-14页
     ·发展趋势第14-15页
   ·代谢工程的基因表达调控策略第15-16页
   ·研究目的及意义,研究基础,研究内容第16-19页
     ·研究目的及意义第16页
     ·研究基础第16-17页
     ·研究内容第17-19页
2 材料与方法第19-43页
   ·材料第19-21页
     ·主要试剂第19-20页
     ·仪器与设备第20页
     ·菌株和质粒第20-21页
     ·培养基第21页
   ·分析方法第21-23页
     ·菌种培养方法第21-22页
     ·β-胡萝卜素产量的检测方法第22页
     ·化学转化感受态细胞的制备及转化第22页
     ·两步同源重组法制备重组菌株第22-23页
   ·表达外源胡萝卜素基因的质粒构建第23-27页
   ·用不同的调控元件在大肠杆菌MG1655中对类异戊二烯基因的表达进行调控第27-31页
   ·整合β-胡萝卜素合成基因到大肠杆菌ATCC8739染色体上,并对类异戊二烯基因的表达进行调控第31-35页
     ·两步同源重组法将β-胡萝卜素合成基因整合到大肠杆菌ATCC 8739染色体上第31-32页
     ·使用不同的调控元件在染色体水平上对QL002菌株进行调控第32-35页
   ·用不同的调控元件,对CAR001的中央代谢途径进行调控第35-42页
     ·用不同的调控元件调控TCA循环和PPP途径,以提高NADPH的供给第36页
     ·用不同的调控元件调控ATP合成途径,以提高ATP的供给第36-37页
     ·用不同的调控元件调控中央代谢途径,以提高前体丙酮酸的供给第37页
     ·组合调控CAR001菌株,提高β-胡萝卜素的含量第37-42页
   ·高密度发酵重组菌株CAR005第42-43页
3 结果与讨论第43-58页
   ·表达载体的构建第43页
   ·外源胡萝卜素基因表达质粒的构建第43-44页
   ·不同质粒对β-胡萝卜素产量的影响第44-45页
   ·调控萜类合成途径基因的表达来提高β-胡萝卜素产量第45-46页
   ·染色体水平上,调控萜类合成途径基因的表达来提高β-胡萝卜素产量第46-49页
     ·重组大肠杆菌QL002中β-胡萝卜素含量测定结果第47页
     ·组合调控QL002中的类异戊二烯合成途径及β-胡萝卜素合成途径第47-48页
     ·重组大肠杆菌CAR001中β-胡萝卜素含量测定结果第48-49页
   ·调控中央代谢途径基因的表达来提高β-胡萝卜素产量第49-56页
     ·一步法调控中央代谢的结果第49-52页
     ·组合调控中央代谢的结果第52-56页
   ·高密度发酵重组大肠杆菌CAR005第56-58页
4 结论第58-59页
5 展望第59-60页
6 参考文献第60-67页
7 论文发表情况第67-68页
8 致谢第68-69页
附录第69-71页

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