中文摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
前言 | 第9-12页 |
第一部分 构建B型流感病毒反向遗传技术平台 | 第12-32页 |
1 材料与耗材 | 第12-15页 |
·细胞 | 第12页 |
·鸡胚 | 第12页 |
·病毒 | 第12页 |
·主要试剂与配制方法 | 第12-13页 |
·主要耗材 | 第13-14页 |
·主要仪器 | 第14-15页 |
2 方法 | 第15-27页 |
·病毒核酸提取 | 第15页 |
·目的片段扩增实验 | 第15-17页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第17页 |
·产物回收实验 | 第17-19页 |
·BsmBI限制性内切酶酶切体系 | 第19页 |
·载体连接实验 | 第19-20页 |
·细菌转化实验 | 第20-22页 |
·质粒提取 | 第22-23页 |
·转染实验 | 第23-27页 |
3 结果 | 第27-29页 |
·目的片段获得及基因序列分析 | 第27-28页 |
·质粒构建 | 第28-29页 |
·拯救病毒及重配病毒鉴定 | 第29页 |
4 讨论 | 第29-32页 |
第二部分 利用反向遗传平台构建重配病毒并对重配病毒进行生长特性研究 | 第32-51页 |
1 材料与耗材 | 第32-33页 |
·细胞 | 第32页 |
·鸡胚 | 第32页 |
·病毒 | 第32页 |
·主要试剂与配制方法 | 第32-33页 |
·主要耗材 | 第33页 |
·主要仪器 | 第33页 |
2 方法 | 第33-39页 |
·细胞复苏与传代 | 第33页 |
·病毒细胞传代 | 第33页 |
·病毒鸡胚传代方法 | 第33-34页 |
·神经氨酸酶活性检测实验 | 第34-36页 |
·半数组织培养感染剂量(TCID_(50))实验 | 第36-38页 |
·病毒生长曲线实验 | 第38-39页 |
·拯救重配病毒 | 第39页 |
3 结果 | 第39-48页 |
·病毒进化分析 | 第39-40页 |
·病毒生长曲线测定 | 第40-43页 |
·神经氨酸酶活性检测结果 | 第43-44页 |
·系间重配病毒的片段替换 | 第44-48页 |
4 讨论 | 第48-51页 |
第三部分 结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-54页 |
综述 | 第54-60页 |
参考文献 | 第58-60页 |
致谢 | 第60-62页 |
附录 已发表文章全文 | 第62-66页 |