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七鳃鳗Syk的克隆表达、生物信息学分析及相关免疫学研究

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
第1章 绪论第9-16页
   ·Syk分子的结构特点第9-10页
     ·TyrKc结构域和SH2结构域第9页
     ·功能域A和功能域B第9-10页
     ·激酶结构域的自动抑制作用第10页
   ·Syk的激活调节模式第10-13页
     ·Syk与磷酸化的ITAM的相互作用第10-11页
     ·Syk的翻译后修饰第11页
     ·Syk的酪氨酸残基磷酸化作用第11-13页
   ·在病原体识别中Syk的作用第13-14页
     ·真菌的识别第13-14页
     ·炎症激活的作用第14页
   ·Syk其他的免疫功能第14-15页
   ·Syk的非免疫功能第15页
   ·结语第15-16页
第2章 七鳃鳗Syk的分子克隆及生物信息学分析第16-46页
   ·七鳃鳗Syk的分子克隆第16-31页
     ·材料第16页
     ·方法第16-25页
     ·结果第25-31页
   ·Syk编码氨基酸序列的生物信息学分析第31-44页
     ·分析所用的在线网站和软件第31页
     ·结果第31-44页
   ·讨论第44-45页
   ·小结第45-46页
第3章 七鳃鳗Syk基因表达与纯化第46-64页
   ·实时荧光定量PCR法检测七鳃鳗Syk在各组织中相对表达量第46-50页
     ·材料第46页
     ·方法第46-48页
     ·结果第48-50页
   ·重组Syk载体的构建和原核表达第50-62页
     ·材料第50-51页
     ·方法第51-57页
     ·结果第57-62页
   ·讨论第62-63页
   ·小结第63-64页
第4章 七鳃鳗Syk重组蛋白抗体制备及其鉴定第64-67页
   ·多克隆抗体制备:第64页
   ·Western Blot鉴定多克隆抗体的特异性第64页
     ·材料第64页
     ·方法第64页
   ·结果第64-65页
     ·制备多克隆抗体第64-65页
     ·Syk多克隆抗体的特异性检测第65页
   ·讨论第65-66页
   ·小结第66-67页
第5章 七鳃鳗Syk蛋白的鉴定第67-74页
   ·材料第67页
   ·方法第67-69页
     ·混合菌刺激七鳃鳗第67页
     ·白细胞的分离及组织提取第67页
     ·白细胞及组织总蛋白的提取第67-68页
     ·Western blot分析Syk蛋白的表达情况第68页
     ·免疫沉淀分析可能与Syk相互作用的蛋白第68页
     ·免疫荧光分析Syk在白细胞中的定位第68-69页
   ·结果第69-72页
     ·白细胞以及组织总蛋白的浓度第69页
     ·Syk在七鳃鳗不同组织蛋白中的相对表达量第69-70页
     ·Syk蛋白的免疫沉淀及其质谱鉴定第70-72页
     ·免疫荧光分析Syk蛋白在白细胞中的定位第72页
   ·讨论第72-73页
   ·小结第73-74页
结论第74-75页
本论文创新点第75-76页
参考文献第76-81页
附录A 七鳃鳗Syk mRNA全序列第81-83页
附录B 不同物种的Syk的FASTA格式氨基酸序列第83-92页
附录C pET-32a质粒图谱第92-93页
附录D 蛋白质浓度测定标准曲线第93-94页
附录E 免疫沉淀质谱图第94-95页
攻读硕士学位期间发表学术论文情况第95-96页
致谢第96页

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