摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
第1章 绪论 | 第9-16页 |
·Syk分子的结构特点 | 第9-10页 |
·TyrKc结构域和SH2结构域 | 第9页 |
·功能域A和功能域B | 第9-10页 |
·激酶结构域的自动抑制作用 | 第10页 |
·Syk的激活调节模式 | 第10-13页 |
·Syk与磷酸化的ITAM的相互作用 | 第10-11页 |
·Syk的翻译后修饰 | 第11页 |
·Syk的酪氨酸残基磷酸化作用 | 第11-13页 |
·在病原体识别中Syk的作用 | 第13-14页 |
·真菌的识别 | 第13-14页 |
·炎症激活的作用 | 第14页 |
·Syk其他的免疫功能 | 第14-15页 |
·Syk的非免疫功能 | 第15页 |
·结语 | 第15-16页 |
第2章 七鳃鳗Syk的分子克隆及生物信息学分析 | 第16-46页 |
·七鳃鳗Syk的分子克隆 | 第16-31页 |
·材料 | 第16页 |
·方法 | 第16-25页 |
·结果 | 第25-31页 |
·Syk编码氨基酸序列的生物信息学分析 | 第31-44页 |
·分析所用的在线网站和软件 | 第31页 |
·结果 | 第31-44页 |
·讨论 | 第44-45页 |
·小结 | 第45-46页 |
第3章 七鳃鳗Syk基因表达与纯化 | 第46-64页 |
·实时荧光定量PCR法检测七鳃鳗Syk在各组织中相对表达量 | 第46-50页 |
·材料 | 第46页 |
·方法 | 第46-48页 |
·结果 | 第48-50页 |
·重组Syk载体的构建和原核表达 | 第50-62页 |
·材料 | 第50-51页 |
·方法 | 第51-57页 |
·结果 | 第57-62页 |
·讨论 | 第62-63页 |
·小结 | 第63-64页 |
第4章 七鳃鳗Syk重组蛋白抗体制备及其鉴定 | 第64-67页 |
·多克隆抗体制备: | 第64页 |
·Western Blot鉴定多克隆抗体的特异性 | 第64页 |
·材料 | 第64页 |
·方法 | 第64页 |
·结果 | 第64-65页 |
·制备多克隆抗体 | 第64-65页 |
·Syk多克隆抗体的特异性检测 | 第65页 |
·讨论 | 第65-66页 |
·小结 | 第66-67页 |
第5章 七鳃鳗Syk蛋白的鉴定 | 第67-74页 |
·材料 | 第67页 |
·方法 | 第67-69页 |
·混合菌刺激七鳃鳗 | 第67页 |
·白细胞的分离及组织提取 | 第67页 |
·白细胞及组织总蛋白的提取 | 第67-68页 |
·Western blot分析Syk蛋白的表达情况 | 第68页 |
·免疫沉淀分析可能与Syk相互作用的蛋白 | 第68页 |
·免疫荧光分析Syk在白细胞中的定位 | 第68-69页 |
·结果 | 第69-72页 |
·白细胞以及组织总蛋白的浓度 | 第69页 |
·Syk在七鳃鳗不同组织蛋白中的相对表达量 | 第69-70页 |
·Syk蛋白的免疫沉淀及其质谱鉴定 | 第70-72页 |
·免疫荧光分析Syk蛋白在白细胞中的定位 | 第72页 |
·讨论 | 第72-73页 |
·小结 | 第73-74页 |
结论 | 第74-75页 |
本论文创新点 | 第75-76页 |
参考文献 | 第76-81页 |
附录A 七鳃鳗Syk mRNA全序列 | 第81-83页 |
附录B 不同物种的Syk的FASTA格式氨基酸序列 | 第83-92页 |
附录C pET-32a质粒图谱 | 第92-93页 |
附录D 蛋白质浓度测定标准曲线 | 第93-94页 |
附录E 免疫沉淀质谱图 | 第94-95页 |
攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第95-96页 |
致谢 | 第96页 |