| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 缩略词对照表 | 第7-8页 |
| 目录 | 第8-10页 |
| 第一章 引言 | 第10-18页 |
| ·整合素背景知识 | 第10-11页 |
| ·整合素构象改变与亲和力变化之间的关系 | 第11-13页 |
| ·整合素分子 ALPHA4BETA7的生理和病理作用 | 第13页 |
| ·以整合素为靶点的抗体药物 | 第13页 |
| ·本课题的研究目的及意义 | 第13-14页 |
| ·噬菌体展示的概况及应用 | 第14-16页 |
| ·噬菌体展示技术的原理和筛选方法 | 第14-15页 |
| ·噬菌体展示技术的实际应用 | 第15-16页 |
| ·本课题的研究思路 | 第16-18页 |
| 第二章 试验材料、试验仪器与试验方法 | 第18-32页 |
| ·主要试验试剂 | 第18-20页 |
| ·主要仪器 | 第20-21页 |
| ·实验方法 | 第21-32页 |
| ·抗体库 Tomlinson I+J 的扩增及 phage 提取 | 第21-22页 |
| ·免疫管方法筛选噬菌体文库 | 第22-23页 |
| ·多轮筛选 | 第23页 |
| ·Elisa 试验检测筛选结果 | 第23-24页 |
| ·高浓度 phage-scFv 的制备 | 第24-25页 |
| ·流式细胞术检测 phage-scFv 的亲和性 | 第25-26页 |
| ·scFv 片段的表达纯化 | 第26页 |
| ·FACS 检测 scFv 亲和性 | 第26-27页 |
| ·细胞培养（以 293T 细胞为例） | 第27-28页 |
| ·磷酸钙法转染 293T 细胞 | 第28-29页 |
| ·protein-A 柱纯化 LJF9 抗体 | 第29页 |
| ·FACS 检测 LJF9IgG 对整合素α_4β_7的亲和性 | 第29-30页 |
| ·利用 Flow chamber 系统检测 LJF9IgG 对整合素α_4β_7和其配体MAdCAM-1 结合的影响 | 第30-32页 |
| 第三章 实验结果 | 第32-38页 |
| ·噬菌体展示抗体库的筛选 | 第32-33页 |
| ·PHAGE- SCFV 的扩增纯沉及识别亲和性鉴定 | 第33页 |
| ·SCFV 的表达纯化和识别高亲和性鉴定 | 第33-34页 |
| ·LJJF9 高亲和和力识别别整合素α_4β_7 | 第34-35页 |
| ·LJFF9 对整合合素α_4β_7识别的构构象特异性检测 | 第35-36页 |
| ·人人源单克隆隆抗体LJJF9IgG 对对整合素α_4β_7与其其主要配体体MAdCCAM-1相互作作用的影响 | 第36-38页 |
| 第四章 分析讨论 | 第38-44页 |
| ·单克隆抗体的发展及噬菌体抗体的优越性 | 第38页 |
| ·噬菌体展示库的筛选方法 | 第38-39页 |
| ·蛋白表达系统的选择 | 第39页 |
| ·转染方式的选择 | 第39-40页 |
| ·抗体蛋白纯化注意事项 | 第40-41页 |
| ·单链抗体 SCFV 片段之于全长抗体的应用的优越性 | 第41-44页 |
| 第五章 展望 | 第44-46页 |
| ·抑制型抗体的筛选 | 第44-45页 |
| ·SCFV 抗体片段的应用性研究的探索 | 第45-46页 |
| 第六章 结论 | 第46-48页 |
| 参考文献 | 第48-54页 |
| 致谢 | 第54-56页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文目录 | 第56-57页 |
