| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 引言 | 第7-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 符号与缩略语 | 第11-13页 |
| 第一部分 前言 | 第13-25页 |
| ·丙型肝炎病毒的分子生物学 | 第14-16页 |
| ·HCV 基因组结构 | 第14页 |
| ·HCV 基因型分型 | 第14-16页 |
| ·HCV 感染后的免疫学反应 | 第16页 |
| ·丙型肝炎病毒感染和传播 | 第16-18页 |
| ·HCV 感染原因 | 第16-17页 |
| ·HCV 流行病学 | 第17页 |
| ·丙肝的临床症状 | 第17-18页 |
| ·丙型肝炎的诊断 | 第18-21页 |
| ·HCV RNA 分子诊断 | 第18-19页 |
| ·免疫学诊断 | 第19-21页 |
| ·丙型肝炎的治疗 | 第21-22页 |
| ·生物素-亲合素系统 | 第22-23页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第23-25页 |
| 第二部分 材料与方法 | 第25-45页 |
| ·材料 | 第25-34页 |
| ·受体菌及质粒 | 第25页 |
| ·主要仪器与设备 | 第25-26页 |
| ·主要试剂 | 第26-27页 |
| ·主要溶液的配制 | 第27-34页 |
| ·方法 | 第34-45页 |
| ·丙肝重组抗原的基因表达、纯化与鉴定 | 第34-39页 |
| ·长臂生物素化的 HCV Ag 的制备以及鉴定 | 第39-40页 |
| ·间接法测定各抗原的活性 | 第40-41页 |
| ·双抗原夹心法的建立 | 第41-43页 |
| ·双抗原夹心 ELISA 法检测效果的评价 | 第43-45页 |
| 第三部分 结果 | 第45-55页 |
| ·HCV Ag 的原核表达、纯化和鉴定 | 第45-47页 |
| ·目的蛋白的诱导表达 | 第45页 |
| ·竞争法鉴定表达产物的活性 | 第45页 |
| ·诱导条件的优化 | 第45-46页 |
| ·表达蛋白的纯化 | 第46页 |
| ·HCV Ag 蛋白浓度的测定 | 第46-47页 |
| ·长臂生物素化的 HCV Ag 的制备以及鉴定 | 第47页 |
| ·标记抗原的标记效果的检测 | 第47页 |
| ·抗原活性鉴定 | 第47页 |
| ·双抗原夹心法的建立 | 第47-52页 |
| ·初步确定包被抗原、夹心抗原以及酶结合物的工作浓度 | 第47-49页 |
| ·包被液以及包被条件的选择 | 第49页 |
| ·封闭液的选择 | 第49-50页 |
| ·最佳血清稀释度的选择 | 第50页 |
| ·检测步骤的优化 | 第50-51页 |
| ·最佳温育时间的确定 | 第51页 |
| ·不同包被浓度的检测结果 | 第51-52页 |
| ·夹心抗原以及酶结合物的最优工作浓度确定 | 第52页 |
| ·双抗原夹心法检测效果评价 | 第52-55页 |
| ·500 份临床血清样品的检测结果 | 第52-53页 |
| ·HCV RNA 定量检测确证实验结果 | 第53-55页 |
| 第四部分 讨论 | 第55-57页 |
| ·表达蛋白的活性鉴定以及诱导条件的优化 | 第55页 |
| ·长臂生物素与抗原偶联比例的研究 | 第55页 |
| ·双抗原夹心法的建立 | 第55-56页 |
| ·建立的夹心检测方法的评价 | 第56-57页 |
| 第五部分 结论 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-63页 |
| 致谢 | 第63-65页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第65-66页 |