| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 1 绪论 | 第9-17页 |
| ·甘露聚糖 | 第9页 |
| ·甘露聚糖酶概述 | 第9-12页 |
| ·β-甘露聚糖酶的来源 | 第9页 |
| ·β-甘露聚糖酶的分类 | 第9页 |
| ·β-甘露聚糖酶的结构特点 | 第9-10页 |
| ·β-甘露聚糖酶活性的测定方法 | 第10页 |
| ·β-甘露聚糖酶的应用 | 第10-12页 |
| ·毕赤酵母工程菌的发酵条件优化 | 第12-13页 |
| ·毕赤酵母表达系统 | 第12-13页 |
| ·微生物的发酵 | 第13页 |
| ·分离纯化 | 第13-16页 |
| ·粗分离方法 | 第14-15页 |
| ·层析法 | 第15-16页 |
| ·SDS-PAGE(十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺)电泳 | 第16页 |
| ·实验的目的和意义 | 第16-17页 |
| 2 β-甘露聚糖酶工程菌Man12-17发酵条件的优化 | 第17-28页 |
| ·实验仪器与材料 | 第17-18页 |
| ·仪器 | 第17页 |
| ·菌种 | 第17页 |
| ·药品 | 第17-18页 |
| ·培养基 | 第18页 |
| ·相关溶液的配制 | 第18页 |
| ·实验方法 | 第18-20页 |
| ·菌种活化 | 第18页 |
| ·种子培养 | 第18-19页 |
| ·酶活力测定方法 | 第19页 |
| ·Man12-17工程菌的诱导表达 | 第19-20页 |
| ·单因素实验设计研究发酵条件 | 第20页 |
| ·正交试验设计研究发酵条件 | 第20页 |
| ·测定最佳发酵条件下的酶活力 | 第20页 |
| ·结果与分析 | 第20-26页 |
| ·甘露糖标准曲线 | 第20-21页 |
| ·Man12-17工程菌的诱导表达 | 第21页 |
| ·单因素实验设计研究发酵条件 | 第21-25页 |
| ·交试验设计研究发酵条件 | 第25-26页 |
| ·测定最佳发酵条件下的酶活力 | 第26页 |
| ·讨论 | 第26页 |
| ·本章小结 | 第26-28页 |
| 3 β-甘露聚糖酶的纯化 | 第28-38页 |
| ·实验仪器与材料 | 第28-30页 |
| ·仪器 | 第28页 |
| ·菌种 | 第28页 |
| ·药品 | 第28页 |
| ·相关溶液的配制 | 第28-30页 |
| ·实验方法 | 第30-33页 |
| ·粗酶液的制备 | 第30页 |
| ·蛋白质含量的测定 | 第30页 |
| ·硫酸铵分级沉淀 | 第30页 |
| ·透析脱盐 | 第30-31页 |
| ·丙酮沉淀法浓缩蛋白质 | 第31页 |
| ·DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换层析 | 第31-32页 |
| ·Sephadexg-75凝胶过滤 | 第32页 |
| ·蛋白质含量测定 | 第32页 |
| ·SDS-PAGE电泳检测蛋白质纯度 | 第32-33页 |
| ·实验结果与讨论 | 第33-36页 |
| ·蛋白质标准曲线 | 第33页 |
| ·硫酸铵分级沉淀 | 第33-34页 |
| ·阴离子交换层析的最佳缓冲液pH的确定 | 第34-35页 |
| ·β-甘露聚糖酶的纯化结果 | 第35-36页 |
| ·SDS-PAGE电泳检测蛋白质纯度 | 第36页 |
| ·讨论 | 第36-37页 |
| ·本章小结 | 第37-38页 |
| 4 β-甘露聚糖酶的酶学性质研究 | 第38-49页 |
| ·实验仪器与材料 | 第38-39页 |
| ·仪器 | 第38页 |
| ·材料 | 第38页 |
| ·药品 | 第38页 |
| ·相关溶液的配制 | 第38-39页 |
| ·实验方法 | 第39-40页 |
| ·β-甘露聚糖酶的最适反应温度测定 | 第39页 |
| ·β-甘露聚糖酶的温度稳定性测定 | 第39页 |
| ·β-甘露聚糖酶的最适pH测定 | 第39页 |
| ·β-甘露聚糖酶的pH稳定性测定 | 第39-40页 |
| ·不同盐浓度对β-甘露聚糖酶的影响 | 第40页 |
| ·金属离子、EDTA和SDS对β-甘露聚糖酶的影响 | 第40页 |
| ·有机试剂对β-甘露聚糖酶的影响 | 第40页 |
| ·β-甘露聚糖酶的底物特异性和动力学参数的测定 | 第40页 |
| ·实验结果与讨论 | 第40-47页 |
| ·β-甘露聚糖酶的最适反应温度测定 | 第40-41页 |
| ·β-甘露聚糖酶的温度稳定性测定 | 第41页 |
| ·β-甘露聚糖酶的最适pH测定 | 第41-43页 |
| ·β-甘露聚糖酶的pH稳定性测定 | 第43-44页 |
| ·不同盐浓度对β-甘露聚糖酶的影响 | 第44页 |
| ·金属离子、EDTA和SDS对β-甘露聚糖酶的影响 | 第44-46页 |
| ·有机试剂对β-甘露聚糖酶的影响 | 第46页 |
| ·β-甘露聚糖酶的底物特异性和动力学参数的测定 | 第46-47页 |
| ·讨论 | 第47-48页 |
| ·本章小结 | 第48-49页 |
| 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
