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莱芜猪和大白猪背最长肌miRNA与mRNA转录组测序及特征分析

中文摘要第1-11页
Abstract第11-13页
1 前言第13-29页
   ·猪基因组研究现状第13-14页
   ·猪骨骼肌转录组研究进展第14-19页
     ·骨骼肌 miRNA 转录组研究第14-18页
     ·猪骨骼肌 mRNA 转录组研究第18页
     ·猪骨骼肌差异表达基因第18-19页
   ·转录组中差异表达基因的研究方法第19-21页
   ·高通量测序技术在基因组研究中的应用第21-27页
     ·高通量测序技术的应用范围第22-24页
     ·RNA-seq 技术的应用第24-26页
     ·畜禽参考基因组的现状第26页
     ·高通量测序研究的挑战第26-27页
   ·基因组学技术在动物遗传育种中的应用第27-28页
   ·本研究的目的及意义第28-29页
2 材料与方法第29-46页
   ·试验材料第29-32页
     ·试验动物与样品采集第29页
     ·主要仪器第29-30页
     ·酶和试剂第30-32页
     ·主要数据库及生物软件第32页
   ·总 RNA 提取第32-33页
   ·RNA 质量检测第33-34页
   ·Small RNA 高通量测序第34-37页
     ·Small RNA 文库制备与测序第34-35页
     ·测序数据的质量控制第35页
     ·参考序列比对及新 miRNA 的预测第35页
     ·sRNA 分类注释统计第35-36页
     ·miRNA 碱基编辑分析及家族分析第36页
     ·miRNA 表达水平及 miRNA 差异分析第36页
     ·miRNA 靶基因预测第36页
     ·GO 和 KEGG 富集分析第36-37页
   ·转录组高通量测序第37-40页
     ·cDNA 文库制备与测序第37-38页
     ·转录组测序原始数据质控第38-39页
     ·测序 reads 比对与拼接第39页
     ·转录本表达水平确定第39页
     ·差异表达转录本、新转录本及可变剪切事件鉴定第39-40页
     ·GO 及 KEGG 富集分析第40页
     ·蛋白质相互作用分析第40页
   ·差异表达 miRNA 与 mRNA 的整合分析第40-41页
   ·差异表达 miRNA 与 mRNA 的定量验证第41-45页
     ·差异表达 miRNA 定量验证第41-43页
     ·差异表达 mRNA 定量验证第43-44页
     ·定量验证 miRNA 与 mRNA 的关联分析第44-45页
   ·统计分析第45-46页
3 结果与分析第46-100页
   ·总 RNA 质量检测第46-47页
   ·Small RNA 测序分析第47-68页
     ·测序数据质量及长度分布第47-49页
     ·小 RNA 基因组定位及分类注释第49-50页
     ·已知 miRNA 鉴定第50-51页
     ·新 miRNA 预测第51-54页
     ·非编码 RNA 分析第54页
     ·miRNA 家族分析第54-55页
     ·miRNA 差异表达分析第55-61页
     ·miRNA 靶基因预测及富集分析第61-65页
     ·差异表达 miRNA 的 qRT-PCR 验证第65-68页
   ·转录组测序分析第68-88页
     ·原始序列数据质量控制第68-69页
     ·测序数据比对分析第69-73页
     ·可变剪切分析第73-74页
     ·转录组 SNP 分析第74页
     ·转录本表达水平分析第74-77页
     ·差异表达基因分析第77-80页
     ·差异基因 GO 分析第80-82页
     ·差异基因 KEGG 分析第82-85页
     ·差异表达基因的蛋白互作网络分析第85页
     ·差异表达基因的 qRT-PCR 验证第85-88页
   ·新基因鉴定第88-90页
     ·新基因鉴定及定位第88-89页
     ·新基因 qRT-PCR 验证第89-90页
   ·miRNA 与 mRNA 整合分析第90-100页
     ·差异表达 miRNA 与基因比较分析第91-92页
     ·靶基因 GO 富集分析第92-93页
     ·靶基因 KEGG 富集分析第93-95页
     ·miRNA-mRNA 调控网络分析第95-98页
     ·qRT-PCR 验证 miRNA-mRNA 的相关性第98-100页
4 讨论第100-112页
   ·转录组与 RNA-seq 技术第100-102页
   ·测序质量的控制与 RNA-seq 整体评估第102-103页
   ·测序 reads 分析第103-105页
   ·猪差异基因的表达模式分析第105-107页
   ·可变剪切事件分析第107-108页
   ·靶基因预测分析第108-109页
   ·差异表达 miRNA 与靶基因的调控网络分析第109-110页
   ·差异表达基因的蛋白互作网络分析第110页
   ·新基因的预测第110-112页
5 结论第112-113页
参考文献第113-129页
附录第129-132页
致谢第132-133页
攻读学位期间发表论文情况第133页

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