摘要 | 第1-8页 |
第一章 文献综述 | 第8-23页 |
1. 生菜的研究概况 | 第8-15页 |
·生菜的植物学特性 | 第8页 |
·生菜的栽培 | 第8-9页 |
·生菜的病害 | 第9-10页 |
·侵染生菜的主要病毒 | 第10-15页 |
·马铃薯 S 病毒 | 第10-11页 |
·马铃薯Y病毒属 | 第11-13页 |
·黄瓜花叶病毒 | 第13-15页 |
2. 常用的植物病毒的检测方法 | 第15-21页 |
·生物学检测法 | 第15页 |
·电子显微镜检测技术 | 第15-16页 |
·血清学检测法 | 第16-17页 |
·酶联免疫吸附测定法 | 第16页 |
·免疫胶体金技术 | 第16-17页 |
·快速免疫滤纸测定法 | 第17页 |
·斑点免疫法 | 第17页 |
·免疫荧光技术 | 第17页 |
·分子生物学检测法 | 第17-21页 |
·核酸分子杂交技术 | 第17-18页 |
·聚合酶链式反应技术 | 第18-19页 |
·基因芯片技术 | 第19-20页 |
·高通量测序技术 | 第20页 |
·非序列依赖性 PCR 扩增 | 第20页 |
·双链RNA电泳技术 | 第20-21页 |
3. 本实验的研究意义 | 第21-23页 |
·研究目的及意义 | 第21-22页 |
·技术路线与内容 | 第22-23页 |
·技术路线 | 第22页 |
·研究内容 | 第22-23页 |
第二章 材料与方法 | 第23-29页 |
1. 材料 | 第23页 |
·材料收集与保存 | 第23页 |
·所用菌株与载体 | 第23页 |
·试验试剂及仪器 | 第23页 |
·缓冲液的配制 | 第23页 |
2. 方法 | 第23-29页 |
·生物学检测 | 第23页 |
·病毒基因克隆 | 第23-27页 |
·dsRNA模板制备 | 第23-24页 |
·引物设计 | 第24-25页 |
·RT-PCR 与 SIA 检测 | 第25-27页 |
·连接 | 第27页 |
·重组质粒的转化 | 第27页 |
·重组质粒PCR鉴定 | 第27-28页 |
·测序及序列分析 | 第28-29页 |
第三章 CMV病原全基因组序列克隆与分析 | 第29-52页 |
1. 材料与方法 | 第29-30页 |
·毒源 | 第29页 |
·方法 | 第29-30页 |
·生物学检测 | 第29页 |
·植物病原双链 RNA(dsRNA)的提取及引物选用 | 第29页 |
·SIA 及 RT-PCR 检测 | 第29-30页 |
·PCR 产物琼脂糖凝胶电泳和割胶回收 | 第30页 |
·连接、重组质粒的转化 | 第30页 |
·重组质粒的鉴定 | 第30页 |
·测序及序列分析 | 第30页 |
2. 结果与分析 | 第30-48页 |
·生物学检测 | 第30-31页 |
·RT-PCR 检测 | 第31-48页 |
·SIA检测片段克隆及序列分析 | 第31-32页 |
·CMV-SC RNA3全基因组序列的克隆及分析 | 第32-38页 |
·CMV-SC RNA2全基因组序列的克隆及分析 | 第38-43页 |
·CMV-SC RNA1全基因组序列的克隆及分析 | 第43-48页 |
3. 讨论 | 第48-50页 |
小结 | 第50-52页 |
第四章 PVS病原全基因组序列克隆与分析 | 第52-66页 |
1. 材料与方法 | 第52-53页 |
·毒源 | 第52页 |
·方法 | 第52-53页 |
·生物学检测 | 第52页 |
·植物病原双链RNA(dsRNA)的提取及引物选用 | 第52页 |
·SIA及RT-PCR检测 | 第52-53页 |
·PCR 产物琼脂糖凝胶电泳和割胶回收 | 第53页 |
·连接、重组质粒的转化 | 第53页 |
·重组质粒的鉴定 | 第53页 |
·测序及序列分析 | 第53页 |
2. 结果与分析 | 第53-63页 |
·生物学检测 | 第53-54页 |
·RT-PCR 检测 | 第54-63页 |
·SIA检测片段克隆及序列分析 | 第54-55页 |
·PVS-SC全基因组序列的克隆及分析 | 第55-63页 |
3. 讨论 | 第63-64页 |
小结 | 第64-66页 |
第五章 全文讨论与结论 | 第66-71页 |
1. 全文讨论 | 第66-70页 |
2. 全文结论 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-77页 |
Abstract | 第77-79页 |
附录A:本文所用的重要缩写词及中文对照 | 第79-80页 |
附录B:本文所用的化学试剂和分子生物学试剂 | 第80-81页 |
附录C:本文所用的缓冲液及培养基配方 | 第81-83页 |
附录D:常用的抗生素及使用浓度 | 第83-84页 |
附录E:主要实验仪器 | 第84-85页 |
致谢 | 第85页 |