摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-9页 |
1 前言 | 第9-22页 |
·农药残留概述 | 第9-11页 |
·我国农药残留现状 | 第9页 |
·农药残留的危害 | 第9-11页 |
·拟除虫菊酯类农药 | 第11-12页 |
·拟除虫菊酯类农药简介 | 第11页 |
·拟除虫菊酯类农药的危害 | 第11-12页 |
·拟除虫菊酯类农药的检测方法 | 第12-15页 |
·分光光度法 | 第12页 |
·色谱法 | 第12-14页 |
·免疫分析法 | 第14-15页 |
·基因工程抗体 | 第15-18页 |
·基因工程抗体简介 | 第15-16页 |
·常见的几种基因工程抗体 | 第16-18页 |
·噬菌体抗体库技术 | 第18-20页 |
·噬菌体展示技术原理 | 第18-19页 |
·噬菌体抗体库的种类 | 第19-20页 |
·噬菌体抗体库应用现状 | 第20页 |
·研究目的及意义 | 第20-21页 |
·研究内容 | 第21-22页 |
2 材料和方法 | 第22-44页 |
·材料 | 第22-28页 |
·实验用菌种及细胞 | 第22页 |
·实验用工具酶及抗生素 | 第22页 |
·实验用试剂及试剂盒 | 第22-24页 |
·实验仪器 | 第24-25页 |
·PCR所用的引物 | 第25-26页 |
·主要溶液和培养基的配置方法 | 第26-28页 |
·实验方法 | 第28-44页 |
·拟除虫菊酯单克隆细胞总RNA的提取 | 第28-29页 |
·拟除虫菊酯单链抗体基因的扩增 | 第29-33页 |
·噬菌体展示初级库的构建 | 第33-36页 |
·淘选 | 第36-38页 |
·噬菌体ELISA | 第38页 |
·菌落PCR验证 | 第38-39页 |
·测序 | 第39页 |
·利用pCANTAB5E-PBAscFv-HB2151菌株表达单链抗体 | 第39-40页 |
·pET26b-PBAscFv-JM109菌株的制备 | 第40-42页 |
·利用pET26b-PBAscFv-BL21菌株表达单链抗体 | 第42-43页 |
·利用间接竞争ELISA初步鉴定单链抗体活性 | 第43页 |
·单链抗体一级结构和空间结构分析 | 第43-44页 |
3 结果与讨论 | 第44-61页 |
·实验结果 | 第44-60页 |
·拟除虫菊酯单克隆细胞总RNA的提取 | 第44页 |
·拟除虫菊酯单链抗体基因的扩增 | 第44-46页 |
·噬菌体展示初级库的构建 | 第46-47页 |
·淘选 | 第47-48页 |
·噬菌体ELISA | 第48页 |
·菌落PCR验证 | 第48页 |
·序列分析 | 第48-50页 |
·利用pCANTAB5E-PBAscFv-HB2151菌株表达单链抗体 | 第50-51页 |
·pET26b-PBAscFv-JM109菌株的制备 | 第51-54页 |
·利用pET26b-PBAscFv-BL21菌株表达单链抗体 | 第54-56页 |
·利用间接竞争ELISA初步鉴定单链抗体活性 | 第56-57页 |
·单链抗体一级结构和空间结构分析 | 第57-60页 |
·讨论 | 第60-61页 |
4 结论 | 第61-62页 |
5 展望 | 第62-63页 |
6 参考文献 | 第63-70页 |
7 致谢 | 第70页 |