导师评阅表 | 第1-6页 |
中英文缩略词对照表 | 第6-11页 |
摘要 | 第11-13页 |
ABSTRACT | 第13-16页 |
前言 | 第16-20页 |
第一部分 E2F1 在食管癌细胞株中与 IKKα/IKKβ/NFκB/SURVIVIN 是否存在调控关系 | 第20-58页 |
引言 | 第20-21页 |
1 研究内容与方法 | 第21-35页 |
·研究对象 | 第21页 |
·主要试剂 | 第21-22页 |
·主要仪器 | 第22-23页 |
·细胞复苏 | 第23-24页 |
·细胞培养 | 第24页 |
·细胞传代 | 第24-26页 |
·细胞冻存 | 第26页 |
·总 RNA 的提取 | 第26-27页 |
·RNA 的检测 | 第27-28页 |
·逆转录 | 第28页 |
·引物设计 | 第28-29页 |
·半定量 PCR 体系 | 第29-30页 |
·荧光定量 PCR | 第30页 |
·PCR 产物定量的校正和判定分析 | 第30页 |
·Western blot 分析 | 第30-35页 |
·台盼蓝染色 | 第35页 |
·统计方法 | 第35页 |
2 结果 | 第35-51页 |
3 讨论 | 第51-56页 |
4 小结 | 第56-58页 |
第二部分 E2F1 过表达载体及 shRNA 载体对食管癌细胞株生物学功能的影响 | 第58-101页 |
1 研究内容与方法 | 第58-70页 |
·研究对象 | 第58页 |
·主要试剂 | 第58-60页 |
·各种抗体 | 第60页 |
·主要仪器 | 第60页 |
·研究方法 | 第60-69页 |
·质量控制 | 第69-70页 |
·统计学分析 | 第70页 |
2 结果 | 第70-95页 |
3 讨论 | 第95-100页 |
4 小结 | 第100-101页 |
第三部分 E2F1 是否与 IKKα、IKKβ、NFκB 基因启动子区有结合位点 | 第101-120页 |
1 研究内容与方法 | 第101-112页 |
·研究对象 | 第101页 |
·主要试剂 | 第101-102页 |
·主要仪器 | 第102页 |
·染色质免疫沉淀实验 | 第102-107页 |
·双萤光素酶报告基因实验 | 第107-109页 |
·报告基因质粒与 pGV142-E2F1 重组质粒载体共转染细胞 | 第109页 |
·萤光素酶活性检测 | 第109-111页 |
·质量控制 | 第111-112页 |
·统计方法 | 第112页 |
2 结果 | 第112-116页 |
3 讨论 | 第116-119页 |
4 小结 | 第119-120页 |
结论 | 第120-122页 |
全文总结 | 第120页 |
创新之处 | 第120页 |
展望 | 第120页 |
不足之处 | 第120-122页 |
致谢 | 第122-123页 |
参考文献 | 第123-133页 |
综述 | 第133-142页 |
参考文献 | 第138-142页 |
攻读博士学位期间获得的学术成果 | 第142-143页 |
个人简历 | 第143页 |