| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-13页 |
| 文献综述 | 第13-22页 |
| 第一章 肥胖和胰岛素抵抗发生机制研究 | 第13-22页 |
| ·AMPK和MARKs功能概述 | 第13-16页 |
| ·AMPK的代谢调节功能 | 第13-15页 |
| ·MARKs功能概述 | 第15-16页 |
| ·PI3K/Akt信号通路与胰岛素抵抗 | 第16-19页 |
| ·PI3K/Akt信号通路功能概述 | 第16-18页 |
| ·PI3K/Akt与胰岛素抵抗的发生 | 第18-19页 |
| ·JNK信号通路与炎症反应 | 第19-22页 |
| ·JNK信号通路概述 | 第19页 |
| ·JNK信号通路与细胞凋亡 | 第19-21页 |
| ·JNK信号通路与胰岛素抵抗、炎症反应的关系 | 第21-22页 |
| 试验研究 | 第22-76页 |
| 前言 | 第22-24页 |
| 第二章 Mark4基因敲除鼠模型的构建 | 第24-31页 |
| ·前言 | 第24页 |
| ·材料和方法 | 第24-27页 |
| ·F_0亲本Mark4+/-嵌合体(杂合型)基因敲除鼠的获得 | 第24页 |
| ·Mark4-/-纯合型基因敲除鼠模型的获得 | 第24-25页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第25页 |
| ·Southern Blot分析 | 第25页 |
| ·探针制备 | 第25-26页 |
| ·PCR分析 | 第26页 |
| ·组织蛋白提取 | 第26页 |
| ·Western Blot分析 | 第26-27页 |
| ·结果与分析 | 第27-29页 |
| ·PCR鉴定Mark4敲缺鼠基因型 | 第27页 |
| ·Southern Blot分析鉴定基因型 | 第27-28页 |
| ·Western Blot分析组织中Mark4表达 | 第28-29页 |
| ·讨论 | 第29-30页 |
| ·基因敲除技术 | 第29页 |
| ·回交 | 第29-30页 |
| ·小结 | 第30-31页 |
| 第三章 Mark4对高脂诱导肥胖和胰岛素敏感性的影响 | 第31-42页 |
| ·前言 | 第31页 |
| ·材料与方法 | 第31-33页 |
| ·实验鼠饲养 | 第31-32页 |
| ·体增重和体脂含量测定 | 第32页 |
| ·葡萄糖耐受性测定(OGTT) | 第32页 |
| ·胰岛素耐受性测定(ITT) | 第32页 |
| ·脂肪组织苏木精和伊红染色(HE染色) | 第32-33页 |
| ·血液生化指标测定 | 第33页 |
| ·数据处理和分析 | 第33页 |
| ·结果与分析 | 第33-38页 |
| ·Mark4对高脂诱导下体重变化的影响 | 第33-34页 |
| ·Mark4对脂肪沉积和脂代谢的影响 | 第34-37页 |
| ·Mark4对胰岛素敏感性的影响 | 第37-38页 |
| ·讨论 | 第38-41页 |
| ·AMPK关联激酶与能量代谢调控 | 第38-39页 |
| ·Marks激酶调节胰岛素敏感性 | 第39-40页 |
| ·性别影响 | 第40-41页 |
| ·小结 | 第41-42页 |
| 第四章 Mark4对机体能量代谢率的影响 | 第42-56页 |
| ·前言 | 第42页 |
| ·材料与方法 | 第42-44页 |
| ·实验鼠饲养管理 | 第42-43页 |
| ·高脂诱导下能量代谢水平测定 | 第43页 |
| ·饥饿条件下基础能量代谢水平测定 | 第43页 |
| ·组织总RNA提取 | 第43页 |
| ·cDNA合成和实时定量PCR测定 | 第43-44页 |
| ·数据处理和分析 | 第44页 |
| ·结果与分析 | 第44-52页 |
| ·高脂诱导下Mark4对采食量的影响 | 第44-45页 |
| ·高脂诱导下Mark4对能量代谢率(EE)和肌肉活动量的影响 | 第45-46页 |
| ·Mark4对UCP1和PGC-1α表达的影响 | 第46-47页 |
| ·高脂诱导下Mark4对耗氧量(MR)、CO_2产量和呼吸商(RQ)的影响 | 第47-49页 |
| ·Mark4对饥饿后采食量的影响 | 第49页 |
| ·基础代谢条件下Mark4对能量代谢率和肌肉活动量的影响 | 第49-50页 |
| ·基础代谢条件下Mark4对耗氧量、CO_2产量和呼吸商的影响 | 第50-52页 |
| ·讨论 | 第52-55页 |
| ·高脂诱导下Mark4对能量代谢率的调控 | 第52-53页 |
| ·Mark4对基础代谢率的影响 | 第53页 |
| ·Mark4对棕色脂肪(BAT)产热功能的调节 | 第53-55页 |
| ·小结 | 第55-56页 |
| 第五章 Mark4对能量代谢和葡萄糖平衡的调控作用 | 第56-74页 |
| ·前言 | 第56-57页 |
| ·材料与方法 | 第57-59页 |
| ·3T3-L1前体脂肪细胞的培养和分化 | 第57页 |
| ·细胞转染 | 第57页 |
| ·细胞蛋白提取 | 第57-58页 |
| ·组织蛋白提取 | 第58页 |
| ·Western Blot分析 | 第58页 |
| ·TUNEL细胞凋亡检测 | 第58-59页 |
| ·细胞凋亡荧光检测 | 第59页 |
| ·结果与分析 | 第59-70页 |
| ·Mark4对能量代谢通路的影响 | 第59-60页 |
| ·Mark4对胰岛素信号通路的影响 | 第60-63页 |
| ·Mark4对脂肪代谢的影响 | 第63-66页 |
| ·Mark4对脂肪细胞凋亡的影响 | 第66-70页 |
| ·讨论 | 第70-73页 |
| ·Mark4对能量代谢通路的调控作用 | 第70页 |
| ·Mark4与脂肪细胞凋亡 | 第70-71页 |
| ·Mark4与肥胖、炎症反应以及胰岛素抵抗的关系 | 第71-73页 |
| ·小结 | 第73-74页 |
| 第六章 结论、创新点与进一步研究内容 | 第74-76页 |
| ·结论 | 第74-75页 |
| ·创新点 | 第75页 |
| ·进一步研究内容 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-84页 |
| 附录 | 第84-85页 |
| 缩略词 | 第85-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
| 作者简介 | 第87页 |
