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柿果实成熟期间差异表达基因的研究

目录第1-9页
中文摘要第9-11页
英文摘要第11-13页
前言第13-15页
第一章 果实成熟及其分子生物学机制第15-55页
 一、 果实成熟的相关因子第15-30页
  1. 乙烯与果实成熟第16-21页
   1.1 乙烯生物合成途径第16-19页
   1.2 乙烯促进果实成熟第19页
   1.3 调控乙烯合成的主要因子第19-21页
  2. ABA与果实成热第21-23页
  3. 细胞壁水解酶第23-28页
   3.1 多聚半乳糖醛酸酶第23-24页
   3.2 羧甲基纤维素酶第24-25页
   3.3 果胶甲酯酶第25页
   3.4 其他细胞壁水解酶第25页
   3.5 Expansin第25-26页
   3.6 水解酶功能的分析第26-28页
  4. 光信号第28页
  5. 脂氧合酶第28-30页
 二、 乙烯调控果实成熟的分子生物学机制第30-36页
  1. 植物信息传递第30页
  2. 乙烯影响果实成熟的分子机制第30-36页
   2.1 乙烯信号转导的研究第31-36页
   2.2 乙烯调节果实成熟相关基因的表达第36页
 三、 调控果实成熟的乙烯工程第36-38页
  1. ACC合成酶基因工程第37页
  2. ACC氧化酶基因工程第37-38页
  3. ACC脱氨酶基因工程第38页
 四、 柿果实采后生理学研究进展第38-39页
 五、 基因分离方法第39-42页
  1. 差别杂交第39页
  2. 减法杂交第39-40页
  3. mRNA差别显示PCR技术第40-42页
   3.1 mRNA差别显示的原理第40-41页
   3.2 mRNA差别显示的主要过程第41页
   3.3 差异显示技术应用的广泛性第41-42页
   3.4 mRNA差别显示技术的局限性第42页
 参考文献第42-55页
第二章 柿果实的采集及硬度和乙烯释放量的测定第55-59页
 1. 材料和方法第55-56页
  1.1 柿果的采集第55页
  1.2 柿果的处理第55-56页
  1.3 柿果实硬度的测定第56页
  1.4 柿果乙烯释放量的测定第56页
 2. 实验结果第56-57页
 3. 讨论第57页
 4. 结论第57-58页
 参考文献第58-59页
第三章 柿果组织总RNA的提取和质量检测第59-69页
 1. 材料和方法第59-63页
  1.1 柿果组织的选取第59页
  1.2 总RNA的提取第59-63页
   1.2.1 Tris-硼酸法第60页
   1.2.2 异硫氰酸胍法第60-61页
   1.2.3 PEG-异硫氰酸胍法第61页
   1.2.4 TRIzoL试剂法第61页
   1.2.5 经典总RNA抽提试剂盒第61页
   1.2.6 Flash UNIQ-10柱离心式总RNA抽提试剂盒第61-62页
   1.2.7 改良CTAB法第62-63页
  1.3 总RNA质量的测定第63页
   1.3.1 RNA纯度的测定第63页
   1.3.2 RNA完整性的测定第63页
 2. 实验结果第63-64页
  2.1 总RNA纯度测定结果第63-64页
  2.2 总RNA完整性检测结果第64页
 3. 讨论第64-65页
  3.1 柿果实材料的选定第64-65页
  3.2 柿果组织总RNA的提取第65页
 4. 结论第65-66页
 参考文献第66-69页
第四章 柿果实RT-PCR扩增差异片段的筛选第69-89页
 1. 材料和方法第70-72页
  1.1 柿果实的采集和挑选第70页
  1.2 柿果组织总RNA的反转录第70页
  1.3 反转录产物PCR扩增第70-71页
  1.4 PCR产物差异条带的筛选第71-72页
 2. 实验结果第72-85页
 3. 讨论第85-86页
  3.1 锚定引物第85页
  3.2 随机引物第85页
  3.3 退火温度第85页
  3.4 扩增片段的大小第85页
  3.5 分离胶第85-86页
  3.6 银盐染色第86页
  3.7 扩增条带的强弱与数量第86页
 4. 结论第86页
 参考文献第86-89页
第五章 差异条带的二次PCR扩增及扩增产物的纯化回收第89-95页
 1. 材料和方法第89-90页
  1.1 柿果果实第89页
  1.2 差异片段的二次扩增第89页
  1.3 二次扩增产物琼脂糖凝胶电泳第89-90页
  1.4 差异条带的回收第90页
 2. 实验结果第90-93页
 3. 讨论第93-94页
  3.1 二次PCR扩增结果第93-94页
  3.2 相同的PCR扩增条件第94页
 4. 结论第94页
 参考文献第94-95页
第六章 差异片段对大肠杆菌的转化第95-99页
 1. 材料和方法第95-96页
  1.1 柿果果实第95页
  1.2 差异片段与载体的连接第95-96页
  1.3 感受态大肠杆菌的制备第96页
  1.4 大肠杆菌DH5α的转化第96页
 2. 实验结果第96-97页
 3. 讨论第97-98页
  3.1 载体的选择第97页
  3.2 阳性菌落的筛选第97-98页
  3.3 菌落转化第98页
 4. 结论第98页
 参考文献第98-99页
第七章 转化菌落的快速鉴定第99-103页
 1. 材料和方法第99-100页
  1.1 柿果果实第99页
  1.2 质粒的提取第99-100页
  1.3 质粒的纯化第100页
 2. 实验结果第100-101页
 3. 讨论第101页
 参考文献第101-103页
第八章 阳性片段的筛选和测序第103-117页
 1. 材料和方法第103-104页
  1.1 柿果果实第103页
  1.2 反向Northern杂交第103-104页
 2. 实验结果第104-114页
 3. 讨论第114-115页
  3.1 杂交鉴定第114页
  3.2 杂交信号第114-115页
  3.3 测序结果分析第115页
 4. 结论第115页
 参考文献第115-117页
附录1 主要仪器设备第117页
附录2 主要试剂第117-119页
作者简介第119页

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