摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-9页 |
第一章 绪论 | 第9-20页 |
·研究背景 | 第9-18页 |
·肝纤维化及其发病机制 | 第9-10页 |
·肝星状细胞在肝纤维化中的作用 | 第10-11页 |
·肝纤维化相关信号通路调控的研究进展 | 第11-13页 |
·目前治疗肝纤维化药物的开发现状 | 第13页 |
·樟芝的药理作用及生物活性物质的研究进展 | 第13-18页 |
·本课题研究意义 | 第18页 |
·本课题研究内容 | 第18-20页 |
第二章 肝纤维化细胞模型的构建及验证 | 第20-34页 |
·材料 | 第20-22页 |
·细胞株 | 第20页 |
·试剂 | 第20-21页 |
·仪器 | 第21-22页 |
·方法 | 第22-27页 |
·细胞培养液配制 | 第22页 |
·细胞培养 | 第22-23页 |
·MTT 法检测细胞毒性 | 第23页 |
·RNA 提取(Trizol 法) | 第23-24页 |
·逆转录-cDNA 的制备 | 第24页 |
·实时荧光定量 PCR(qRT-PCR) | 第24-25页 |
·蛋白质印迹分析(Western Blotting) | 第25-26页 |
·天狼猩红染色(PSR)及染料反应的量化 | 第26-27页 |
·统计学方法 | 第27页 |
·结果与讨论 | 第27-33页 |
·TGF-β1 对 CFSC-8B 细胞的活化 | 第27-28页 |
·TGF-β1 诱导肝纤维化细胞模型的构建 | 第28页 |
·TGF-β1 诱导肝纤维化细胞模型的验证 | 第28-33页 |
·本章小结 | 第33-34页 |
第三章 药食用真菌抗肝纤维化活性成分筛选及其分离纯化 | 第34-49页 |
·材料 | 第34-35页 |
·细胞株及菌粉 | 第34页 |
·试剂 | 第34-35页 |
·仪器 | 第35页 |
·方法 | 第35-37页 |
·药食用真菌液态发酵菌粉的分级提取 | 第35-36页 |
·MTT 法检测细胞毒性 | 第36页 |
·天狼猩红染色(PSR)及染料反应的量化 | 第36页 |
·硅胶柱色谱法 | 第36-37页 |
·高效液相色谱法 | 第37页 |
·统计学方法 | 第37页 |
·结果与讨论 | 第37-48页 |
·药食用真菌液态发酵菌粉的分级提取 | 第37-38页 |
·药食用真菌提取物的细胞毒性测定 | 第38-39页 |
·药食用真菌抗肝纤维化活性物质的筛选 | 第39-40页 |
·樟芝正己烷组分经硅胶柱色谱的分离 | 第40-41页 |
·硅胶柱分离组分抗肝纤维化活性评价 | 第41-42页 |
·制备型高效液相色谱的分离 | 第42页 |
·单体化合物的结构鉴定 | 第42-47页 |
·Antrodin A 和 Antrodin B 抗肝纤维化活性评价 | 第47-48页 |
·本章小结 | 第48-49页 |
第四章 Antrodin B 抗肝纤维化的作用机制研究 | 第49-62页 |
·材料 | 第49-51页 |
·细胞株 | 第49页 |
·试剂 | 第49-50页 |
·仪器 | 第50-51页 |
·方法 | 第51-53页 |
·细胞培养 | 第51页 |
·MTT 法检测细胞毒性 | 第51页 |
·体外 PDGF-BB 刺激细胞增殖模型的建立 | 第51页 |
·细胞划痕损伤修复实验(Wound-healing assay) | 第51-52页 |
·细胞小室迁移实验(Transwell migration assay) | 第52页 |
·RNA 提取 | 第52页 |
·逆转录-cDNA 的制备 | 第52页 |
·实时荧光定量 PCR(qRT-PCR) | 第52页 |
·蛋白质印迹分析(Western Blotting) | 第52页 |
·统计学方法 | 第52-53页 |
·结果与讨论 | 第53-61页 |
·Antrodin B 对 CFSC-8B 细胞生长的影响 | 第53页 |
·体外 PDGF-BB 刺激 CFSC-8B 细胞增殖模型的构建 | 第53-54页 |
·Antrodin B 对 PDGF-BB 刺激 CFSC-8B 细胞增殖的影响 | 第54页 |
·Antrodin B 对 CFSC-8B 细胞迁移的影响 | 第54-58页 |
·Antrodin B 对肝纤维化相关基因表达的影响 | 第58-59页 |
·Antrodin B 对 PDGF-BB/MAPK 信号通路的影响 | 第59-60页 |
·Antrodin B 对 TGF-β1/Smads 信号通路的影响 | 第60-61页 |
·本章小结 | 第61-62页 |
第五章 主要结论与展望 | 第62-64页 |
·主要结论 | 第62页 |
·问题与展望 | 第62-64页 |
致谢 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-69页 |
附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第69页 |