| 目录 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 英文縮略词表(ABBREVIATION) | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-28页 |
| 综述1、影响体细胞核移植效率的因素 | 第12-21页 |
| ·卵巢及其来源 | 第12-14页 |
| ·卵巢受来源母猪品种、年龄影响 | 第12-13页 |
| ·季节变化与卵巢 | 第13页 |
| ·卵巢受采集时间和温度影响 | 第13-14页 |
| ·供体细胞 | 第14-15页 |
| ·徒手克隆的流程与注意事项 | 第15-17页 |
| ·受体母猪与胚胎移植 | 第17-19页 |
| 参考文献 | 第19-21页 |
| 综述2 5-aza-CdR在体细胞核移植中的应用及甲基化相关基因的研究 | 第21-28页 |
| ·DNA甲基转移酶的基本作用与特征 | 第21-22页 |
| ·5-aza-CdR对胚胎发育的影响 | 第22页 |
| ·Tet蛋白家族的结构与功能 | 第22-23页 |
| ·Tet蛋白家族的生物学作用 | 第23-24页 |
| ·Dnmts与Tet蛋白家族关系 | 第24-26页 |
| 参考文献 | 第26-28页 |
| 第二章 实验研究 | 第28-56页 |
| 第一节 徒手克隆技术的优化 | 第28-42页 |
| 1 材料与方法 | 第28-36页 |
| ·实验材料 | 第28-30页 |
| ·仪器 | 第28页 |
| ·主要耗材 | 第28-29页 |
| ·溶液配制 | 第29页 |
| ·供体细胞 | 第29-30页 |
| ·试验方法 | 第30-36页 |
| ·卵巢的采集及处理 | 第30-31页 |
| ·卵母细胞体外成熟 | 第31-32页 |
| ·徒手克隆前准备 | 第32-33页 |
| ·脱卵丘 | 第33-34页 |
| ·供体细胞准备 | 第34页 |
| ·徒手体细胞核移植技术 | 第34-36页 |
| ·胚胎移植 | 第36页 |
| ·妊娠诊断 | 第36页 |
| 2 结果 | 第36-39页 |
| ·克隆胚胎的生产 | 第36-37页 |
| ·猪克隆胚胎移植 | 第37-38页 |
| ·妊娠诊断结果 | 第38页 |
| ·怀孕母猪的分娩 | 第38-39页 |
| 3 分析与讨论 | 第39-41页 |
| ·胚胎构建及其胚胎发育 | 第39-40页 |
| ·关于胚胎移植 | 第40页 |
| ·关于徒手克隆操作 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-42页 |
| 第二节 Tet1在早期胚胎发育中的变化 | 第42-56页 |
| 1 材料与方法 | 第42-48页 |
| ·材料 | 第42-44页 |
| ·实验材料 | 第42页 |
| ·试剂 | 第42页 |
| ·仪器 | 第42-43页 |
| ·溶液配制 | 第43-44页 |
| ·方法 | 第44-48页 |
| ·卵巢的采集同第一节 | 第44页 |
| ·卵母细胞体外成熟同第一节 | 第44页 |
| ·卵母细胞的处理 | 第44页 |
| ·冷冻细胞的复苏及培养 | 第44页 |
| ·胎儿成纤维细胞的处理 | 第44-45页 |
| ·细胞RNA的提取及反转录 | 第45页 |
| ·引物设计与合成 | 第45-46页 |
| ·荧光实时定量PCR检测 | 第46页 |
| ·统计分析 | 第46-47页 |
| ·卵母细胞孤雌激活 | 第47页 |
| ·间接免疫荧光染色技术 | 第47-48页 |
| 2 结果 | 第48-53页 |
| ·卵母细胞成熟及PA早期发育过程中不同时期Tet1的间接免疫荧光染色 | 第48-51页 |
| ·5-aza-CdR处理对卵母细胞成熟过程中甲基化相关基因表达的影响 | 第51-52页 |
| ·5-aza-CdR处理对猪胎儿成纤维细胞甲基化相关基因的表达影响 | 第52-53页 |
| 3 分析与讨论 | 第53-55页 |
| ·Tet1在卵母细胞成熟过程中及PA后胚胎早期发育过程中的探索 | 第53页 |
| ·5-aza-CdR与Dnmts相关基因的的探讨 | 第53-54页 |
| ·5-aza-CdR与Tet蛋白家族相关基因的的探讨 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-56页 |
| 全文结论 | 第56-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
