| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-19页 |
| 第1章 绪论 | 第19-27页 |
| ·研究背景和选题意义 | 第19-25页 |
| ·昆虫免疫系统 | 第19页 |
| ·昆虫免疫组织 | 第19-20页 |
| ·昆虫的抗病毒免疫 | 第20页 |
| ·miRNA 的起源及合成 | 第20-22页 |
| ·miRNA 的生物学功能 | 第22页 |
| ·国内外抗病毒免疫相关 miRNA 研究进展 | 第22-24页 |
| ·miRNA 在昆虫宿主与病毒中的相互作用 | 第24-25页 |
| ·本课题研究的主要内容和方法 | 第25-27页 |
| 第2章 家蚕马氏管组织小 RNA 文库的构建与深度测序 | 第27-45页 |
| ·实验材料与设备 | 第27-28页 |
| ·实验材料准备 | 第27页 |
| ·实验仪器与试剂 | 第27-28页 |
| ·常用生物信息学分析软件 | 第28页 |
| ·实验方法 | 第28-32页 |
| ·重组病毒 BmNPV-EGFP 的构建 | 第28页 |
| ·重组病毒 BmNPV-EGFP 侵染家蚕和侵染时相的观察 | 第28-29页 |
| ·家蚕马氏管总 RNA 的提取 | 第29页 |
| ·小 RNA 文库的构建 | 第29页 |
| ·Solexa 测序 | 第29-30页 |
| ·生物信息学分析 | 第30-32页 |
| ·结果与分析 | 第32-43页 |
| ·重组病毒 BmNPV-EGFP 对家蚕各组织侵染时相的结果 | 第32-33页 |
| ·生物信息学分析结果 | 第33-43页 |
| ·讨论 | 第43-44页 |
| ·小结 | 第44-45页 |
| 第3章 家蚕马氏管响应 BmNPV 感染候选 miRNA 的实验验证 | 第45-63页 |
| ·实验材料与试剂 | 第45-50页 |
| ·实验材料的准备 | 第45页 |
| ·工具酶和其他试剂 | 第45页 |
| ·常用试剂的配制 | 第45-47页 |
| ·主要的实验仪器和设备 | 第47-48页 |
| ·引物设计 | 第48-50页 |
| ·实验方法 | 第50-56页 |
| ·家蚕各时相马氏管总 RNA 的提取 | 第50-51页 |
| ·反转录反应 | 第51-52页 |
| ·PCR 验证 | 第52-53页 |
| ·琼脂糖凝胶的制备与电泳 | 第53-54页 |
| ·玻璃奶回收 DNA | 第54页 |
| ·目的片段与 pMD18-T 载体的连接 | 第54页 |
| ·质粒 DNA 的转化 | 第54-55页 |
| ·碱裂解法少量提取质粒 DNA | 第55页 |
| ·重组质粒 DNA 的酶切鉴定 | 第55-56页 |
| ·甘油菌的制备及序列测定 | 第56页 |
| ·结果与分析 | 第56-59页 |
| ·RNA 质量的鉴定 | 第56页 |
| ·候选 miRNA 的 RT-PCR 验证 | 第56页 |
| ·候选 miRNA 的酶切鉴定 | 第56-57页 |
| ·候选 miRNA 的测序结果 | 第57-59页 |
| ·候选 miRNA 在感染和对照样品池中相对表达分析 | 第59页 |
| ·讨论 | 第59-61页 |
| ·小结 | 第61-63页 |
| 第4章 家蚕编码的 bmo-miR_375 的表达分析与靶标预测 | 第63-75页 |
| ·实验材料及试剂 | 第63-64页 |
| ·实验材料的准备 | 第63页 |
| ·工具酶和其它试剂 | 第63-64页 |
| ·常用试剂和缓冲液的配制 | 第64页 |
| ·常用生物信息学分析工具 | 第64页 |
| ·试验方法 | 第64-66页 |
| ·引物设计 | 第64-65页 |
| ·家蚕各时相马氏管总和各组织 RNA 的提取 | 第65页 |
| ·反转录反应 | 第65页 |
| ·半定量 RT-PCR 检测 | 第65页 |
| ·家蚕编码候选 miRNA 的靶标预测 | 第65-66页 |
| ·结果与分析 | 第66-71页 |
| ·bmo-miR_375 在 BmNPV 侵染马氏管后不同时相中相对表达分析 | 第66-68页 |
| ·候选 bmo-miR_375 在家蚕幼虫不同组织中表达谱分析 | 第68页 |
| ·候选 bmo-miR_375 靶标预测结果 | 第68-71页 |
| ·讨论 | 第71-73页 |
| ·小结 | 第73-75页 |
| 全文总结 | 第75-77页 |
| 参考文献 | 第77-83页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第83-85页 |
| 致谢 | 第85页 |
