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玉米穗粒腐病抗性相关miRNA的分离鉴定

致谢第4-7页
摘要第7-8页
第一章 文献综述第8-12页
    1.1 玉米穗粒腐病研究现状第8页
    1.2 正向遗传学研究进展第8-9页
    1.3 轮枝镰胞菌致病机理研究进展第9页
    1.4 植物免疫系统研究进展第9-10页
    1.5 miRNA在植物免疫过程中作用的研究进展第10-12页
引言第12-13页
第二章 材料与方法第13-26页
    2.1 实验材料第13-14页
        2.1.1 植物材料第13页
        2.1.2 菌株与质粒第13-14页
    2.2 试剂与仪器第14-16页
        2.2.1 分子实验所用试剂第14-15页
        2.2.2 主要仪器第15-16页
    2.3 引物与探针第16-18页
    2.4 实验方法第18-26页
        2.4.1 两个玉米自交系幼苗材料总RNA提取第18页
        2.4.2 编码蛋白RNA的反转录第18页
        2.4.3 防御相关基因的RT-qPCR第18-19页
        2.4.4 小RNA测序第19-20页
        2.4.5 生物信息学分析第20-21页
        2.4.6 用于RT-qPCR的miRNA反转录第21-22页
        2.4.7 Northern Blot第22-23页
            2.4.7.1 制备12%尿素-丙烯酰胺胶第22页
            2.4.7.2 电泳第22页
            2.4.7.3 转膜和紫外交联第22页
            2.4.7.4 杂交和探针标记第22-23页
            2.4.7.5 地高辛探针洗脱、封闭和信号检测第23页
        2.4.8 Zma-miR408b过表达载体构建第23-24页
        2.4.9 玉米基因组DNA提取(用于基因型鉴定)第24页
        2.4.10 用于侵染的轮枝镰胞菌孢子液制备第24-25页
        2.4.11 田间玉米籽粒接种轮枝镰孢菌孢子液第25页
        2.4.12 玉米离体籽粒对轮枝镰孢菌抗性实验第25-26页
第三章 结果与分析第26-44页
    3.1 两个玉米自交系N6和BT-1BT)表现出明显不同的穗粒腐病抗性第26-27页
    3.2 小RNA文库测序数据分析第27-31页
    3.3 玉米籽粒中轮枝镰胞菌应答表达miRNA分析第31-34页
    3.4 穗粒腐病抗性相关miRNA分析第34-36页
    3.5 病原菌诱导miRNA参与调控植物-病原体相互作用和激素信号传导途径第36-39页
    3.6 病原菌诱导表达miRNA下游靶基因分析第39-41页
    3.7 轮枝镰胞菌响应性miRNA的表达与其靶基因的表达趋势相反第41-42页
    3.8 Zma-miR408b过量积累显著降低对轮枝镰胞菌的抗性第42-44页
第四章 结论与讨论第44-47页
参考文献第47-53页
英文摘要第53-54页
附表第54-83页

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