| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 引言 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-21页 |
| 1 草鱼出血病的研究进展 | 第12-15页 |
| ·草鱼出血病研究历史 | 第12-13页 |
| ·草鱼出血病的症状及流行情况 | 第13页 |
| ·草鱼呼肠孤病毒的生物学特性 | 第13-14页 |
| ·草鱼出血病的主要防治措施 | 第14-15页 |
| ·药物防治 | 第14页 |
| ·疫苗免疫预防 | 第14-15页 |
| ·生态防控 | 第15页 |
| ·其它防治方法 | 第15页 |
| 2 微载体培养技术研究进展 | 第15-17页 |
| ·微载体培养的发明与发展 | 第15-16页 |
| ·微载体培养的优点 | 第16页 |
| ·微载体培养的问题与展望 | 第16-17页 |
| 3 疫苗免疫途径的研究进展 | 第17-19页 |
| ·注射免疫 | 第17-18页 |
| ·浸泡免疫 | 第18-19页 |
| ·口服免疫 | 第19页 |
| 4 本论文研究的目的与意义 | 第19-21页 |
| 第二章 微载体规模化培养草鱼细胞与病毒的工艺及优化 | 第21-35页 |
| 1 材料与方法 | 第21-24页 |
| ·试验材料 | 第21-22页 |
| ·细胞与病毒 | 第21-22页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第22页 |
| ·试验方法 | 第22-24页 |
| ·种子细胞与病毒培养 | 第22页 |
| ·Cephodex 微载体预处理 | 第22页 |
| ·CIK 细胞微载体培养 | 第22页 |
| ·间歇搅拌方式对 CIK 细胞贴壁的影响 | 第22-23页 |
| ·血清浓度对 CIK 细胞贴壁的影响 | 第23页 |
| ·细胞接种浓度对 CIK 细胞生长的影响 | 第23页 |
| ·微载体浓度对 CIK 细胞生长的影响 | 第23页 |
| ·搅拌速度对 CIK 细胞生长的影响 | 第23-24页 |
| ·细胞计数及形态观察 | 第24页 |
| ·病毒感染及电镜观察 | 第24页 |
| 2 试验结果 | 第24-33页 |
| ·CIK 细胞在方瓶中的生长及接毒后的病变形态 | 第24-25页 |
| ·间歇搅拌方式对 CIK 细胞贴壁的影响 | 第25-26页 |
| ·血清浓度对 CIK 细胞生长的影响 | 第26-27页 |
| ·细胞接种浓度对 CIK 细胞生长的影响 | 第27-28页 |
| ·微载体浓度对 CIK 细胞生长的影响 | 第28页 |
| ·搅拌速度对 CIK 细胞生长的影响 | 第28-29页 |
| ·CIK 细胞在微载体上的生长状态 | 第29-30页 |
| ·病毒在微载体细胞上的增殖 | 第30-31页 |
| ·病毒滴度测定结果 | 第31-33页 |
| 3 讨论 | 第33-35页 |
| 第三章 草鱼出血病病毒灭活疫苗的浸泡免疫效果研究 | 第35-49页 |
| 1. 材料与方法 | 第35-41页 |
| ·实验材料 | 第35-36页 |
| ·试验鱼及饲养条件 | 第35页 |
| ·主要试剂 | 第35-36页 |
| ·实验仪器与设备 | 第36页 |
| ·实验方法 | 第36-41页 |
| ·灭活疫苗的制备 | 第36页 |
| ·疫苗的无菌检验和安全性检验 | 第36-37页 |
| ·免疫实验 | 第37页 |
| ·样品采集与处理 | 第37页 |
| ·血清采集与处理 | 第37页 |
| ·组织采集与处理 | 第37页 |
| ·血细胞计数 | 第37页 |
| ·白细胞吞噬活性 | 第37-38页 |
| ·超氧化物歧化酶（SOD）活力测定 | 第38页 |
| ·血清抗体效价 | 第38页 |
| ·Real-time PCR 检测样品中 IgM 和 Mx 基因表达量 | 第38-40页 |
| ·总 RNA 提取和 cDNA 的合成 | 第38-39页 |
| ·引物设计与合成 | 第39-40页 |
| ·Real-time PCR 分析 | 第40页 |
| ·攻毒实验 | 第40-41页 |
| ·数据处理 | 第41页 |
| 2 试验结果 | 第41-47页 |
| ·疫苗的无菌检验和安全性检验 | 第41页 |
| ·草鱼外周血细胞计数 | 第41-42页 |
| ·白细胞吞噬活性 | 第42-43页 |
| ·对血清超氧化物歧化酶（SOD）活性的影响 | 第43-44页 |
| ·血清中和抗体测定 | 第44页 |
| ·总 RNA 的提取及检测 | 第44-45页 |
| ·浸泡免疫对 IgM 和 Mx 基因表达的影响 | 第45-46页 |
| ·攻毒试验 | 第46-47页 |
| 3 讨论 | 第47-49页 |
| ·疫苗浸泡免疫对草鱼非特异性免疫功能的影响 | 第47-48页 |
| ·疫苗浸泡免疫对草鱼特异性免疫功能的影响 | 第48-49页 |
| 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-58页 |
| 附录 | 第58-60页 |
| 攻读硕士学位期间发表的研究论文 | 第60页 |
| 攻读硕士学位期间参加的会议 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61页 |