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白鲢细胞色素P450(CYP3A137)的克隆及其表达研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-12页
第一章 白鲢 CYP3A 基因克隆、序列分析及其表达检测第12-38页
   ·细胞色素 P4503A 在鱼类中研究情况第12-14页
   ·实验材料第14-18页
     ·实验动物第14页
     ·载体和宿主菌第14页
     ·引物第14-15页
     ·主要试剂第15-16页
     ·本研究常用试剂配方第16-17页
     ·主要仪器设备第17-18页
   ·实验方法第18-28页
     ·cDNA 克隆第18-22页
     ·3’ RACE第22-25页
     ·5’ RACE第25-26页
     ·白鲢不同组织的 CYP3A137 基因表达第26-28页
   ·数据结果分析第28-29页
   ·实验结果第29-34页
     ·白鲢肝脏 RNA 提取第29页
     ·白鲢 CYP3A 基因序列第29-30页
     ·白鲢 CYP3A137 基因序列分析第30-31页
     ·白鲢 CYP3A137 亚铁血红素与其它物种比对第31页
     ·系统进化发育第31-32页
     ·荧光定量 PCR 溶解曲线第32-33页
     ·CYP3A137 在白鲢不同组织的分布第33-34页
   ·讨论第34-36页
     ·白鲢 CYP3A 序列分析第34-35页
     ·白鲢 CYP3A137 组织分布第35-36页
   ·结论第36-38页
第二章 利福平处理对白鲢肝脏 CYP3A137 的影响第38-52页
   ·CYP3A 酶活性检测及其特异诱导第38-39页
   ·实验材料第39-41页
     ·实验动物第39页
     ·利福平第39页
     ·主要试剂及配制方法第39-40页
     ·引物第40-41页
   ·实验方法第41-45页
     ·利福平暴露白鲢第41页
     ·RNA 提取第41页
     ·cDNA 合成第41页
     ·荧光定量 PCR第41-42页
     ·白鲢肝脏微粒体制备第42-43页
     ·蛋白浓度测定第43页
     ·甲醛标准曲线的制备第43页
     ·红霉素-N-脱甲基酶的测定第43-45页
   ·数据结果分析第45-46页
   ·实验结果第46-49页
     ·利福平对白鲢肝脏 CYP3A137 基因表达的诱导作用第46页
     ·甲醛标准曲线第46-47页
     ·利福平对白鲢肝脏 CYP3A137 酶活性的影响第47-49页
   ·讨论第49-50页
   ·结论第50-52页
第三章 毒死蜱处理对白鲢 CYP3A137 基因表达的影响第52-62页
   ·毒死蜱研究概况第52-54页
   ·实验材料第54-55页
     ·实验动物第54页
     ·毒死蜱第54页
     ·主要试剂第54页
     ·引物第54-55页
   ·实验方法第55-57页
     ·毒死蜱对白鲢的急性毒性试验第55页
     ·毒死蜱暴露对白鲢 CYP3A137 基因表达的影响第55页
     ·RNA 提取第55页
     ·cDNA 合成第55页
     ·荧光定量 PCR第55-57页
   ·数据结果分析第57-58页
   ·实验结果第58-60页
     ·毒死蜱对白鲢的急性毒性第58页
     ·毒死蜱对白鲢肝脏 CYP3A137 基因表达的抑制作用第58-60页
   ·讨论第60-61页
   ·结论第61-62页
第四章 离子液体处理对白鲢 CYP3A137 表达的影响第62-72页
   ·离子液体研究概况第62-63页
   ·实验材料第63-65页
     ·实验动物第63页
     ·离子液体第63页
     ·主要试剂第63页
     ·引物第63-65页
   ·实验方法第65-67页
     ·[C8mim]Br 对白鲢的急性毒性试验第65页
     ·[C8mim]Br 暴露对白鲢 CYP3A137 的影响第65页
     ·RNA 提取第65页
     ·cDNA 合成第65页
     ·荧光定量 PCR第65-66页
     ·白鲢肝脏微粒体制备第66页
     ·蛋白浓度测定第66页
     ·甲醛标准曲线的制备第66页
     ·红霉素-N-脱甲基酶的测定第66-67页
   ·数据结果分析第67-68页
   ·实验结果第68-70页
     ·[C8mim]Br 对白鲢的急性毒性第68页
     ·[C8mim]Br 对白鲢肝脏 CYP3A137 基因表达水平的影响第68-69页
     ·[C8mim]Br 对白鲢肝脏 CYP3A137 酶活性水平的影响第69-70页
   ·讨论第70-71页
   ·结论第71-72页
本研究的创新点第72-74页
本研究的不足及展望第74-76页
参考文献第76-82页
图版第82-92页
致谢第92-94页
攻读学位期间学术成果第94-95页

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