摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
缩略语中英文对照 | 第6-11页 |
第一章 前言 | 第11-23页 |
·小肽的吸收 | 第11-13页 |
·小肽转运系统 | 第11-12页 |
·小肽吸收的优势 | 第12-13页 |
·鱼类小肽转运载体PepT1研究进展 | 第13-23页 |
·PepT1的生理特性 | 第13-15页 |
·PepT1的cDNA序列和蛋白质分子结构 | 第15-18页 |
·PepT1mRNA的组织分布和表达 | 第18-20页 |
·PepT1表达的调控 | 第20-23页 |
第二章 鲤鱼肠道PepT1的克隆与表达 | 第23-45页 |
·材料 | 第23-24页 |
·载体和菌种 | 第23页 |
·实验动物 | 第23页 |
·主要试剂 | 第23-24页 |
·主要仪器 | 第24页 |
·试剂配制 | 第24页 |
·方法 | 第24-37页 |
·组织取样及总RNA提取 | 第24-26页 |
·第一链cDNA合成 | 第26-27页 |
·克隆PepT1基因开放阅读框并进行序列分析 | 第27-30页 |
·构建基因工程菌 | 第30-34页 |
·PepT1在E.coliRosetta中的诱导表达 | 第34页 |
·SDS-PAGE分析 | 第34-36页 |
·构建表达目标多肽的重组基因工程菌 | 第36-37页 |
·实验结果 | 第37-41页 |
·检测总RNA的质量 | 第37-38页 |
·PepT1基因的克隆和序列分析 | 第38-39页 |
·原核表达载体的构建 | 第39-40页 |
·重组蛋白的诱导表达 | 第40-41页 |
·讨论 | 第41-45页 |
·PepT1基因的克隆 | 第41-42页 |
·基因工程菌的构建和融合蛋白的原核表达 | 第42-45页 |
第三章 鲤鱼肠道 PepT1抗血清的制备 | 第45-51页 |
·材料 | 第45-47页 |
·质粒和菌种 | 第45页 |
·实验动物与饲养管理 | 第45页 |
·主要试剂和酶 | 第45-46页 |
·主要仪器 | 第46-47页 |
·方法 | 第47-49页 |
·SDS-PAGE电泳 | 第47页 |
·目标蛋白浓度的测定 | 第47页 |
·抗体的制备 | 第47-48页 |
·PepT1抗血清效价检测 | 第48-49页 |
·结果 | 第49-50页 |
·PepT1抗血清效价测定结果 | 第49页 |
·颈动脉采血结果 | 第49-50页 |
·讨论 | 第50-51页 |
第四章 鲤鱼 PepT1蛋白的组织分布 | 第51-63页 |
·鲤鱼 PepT1蛋白的免疫组织化学研究 | 第51-57页 |
·主要用具和主要仪器 | 第51页 |
·主要试剂配制 | 第51-52页 |
·方法 | 第52-53页 |
·免疫组化染色 | 第53-54页 |
·结果 | 第54-56页 |
·讨论 | 第56-57页 |
·鲤鱼PepT1基因表达丰度的组织差异 | 第57-63页 |
·材料 | 第57页 |
·方法 | 第57-59页 |
·实验结果 | 第59-61页 |
·讨论 | 第61-63页 |
第五章 寡肽对鲤鱼肠道 PepT1基因表达的调控作用 | 第63-69页 |
·材料 | 第63-64页 |
·试验动物 | 第63页 |
·主要试剂 | 第63页 |
·主要仪器 | 第63-64页 |
·方法 | 第64-65页 |
·组织取样及总RNA提取 | 第64页 |
·第一链cDNA合成 | 第64页 |
·PepT1基因表达检测 | 第64-65页 |
·数据处理 | 第65页 |
·结果 | 第65-67页 |
·总RNA的质量检测 | 第65页 |
·PepT1mRNA表达检测结果 | 第65-67页 |
·讨论 | 第67-69页 |
小结 | 第69-71页 |
参考文献 | 第71-79页 |
致谢 | 第79-81页 |
攻读学位期间学术业绩 | 第81-83页 |