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猪转铁蛋白受体与PPV-VP2相互作用研究(一)蛋白表达、血清制备、酵母双杂交检测及受体逆转录病毒包装质粒的构建

摘要第1-7页
Abstract第7-15页
第一章 引言第15-22页
   ·猪细小病毒第15-18页
     ·病原学第15-16页
     ·基因组结构第16-17页
     ·基因组的复制与转录第17页
     ·基因组编码蛋白及其功能第17-18页
   ·转铁蛋白受体第18-19页
     ·转铁蛋白受体的结构第19页
     ·转铁蛋白受体的功能第19页
   ·病毒细胞受体第19-21页
     ·病毒细胞受体的研究方法第20页
     ·转铁蛋白受体作为病毒细胞受体的研究进展第20-21页
   ·研究的目的与意义第21-22页
第二章 截短表达猪转铁蛋白受体及其抗体的制备第22-31页
   ·材料第22页
     ·组织第22页
     ·主要试剂第22页
     ·主要仪器第22页
   ·方法第22-27页
     ·引物的设计第22-24页
     ·猪肝脏 Total RNA 的提取第24页
     ·第一链 cDNA 的合成第24页
     ·基因的扩增第24-25页
     ·原核表达质粒的构建第25-26页
     ·原核表达及蛋白的纯化第26-27页
     ·多克隆抗体的制备第27页
   ·结果第27-30页
     ·基因的扩增第27-28页
     ·重组质粒的酶切鉴定第28页
     ·诱导表达及蛋白的纯化第28-30页
     ·多克隆抗体的鉴定第30页
   ·讨论第30-31页
第三章 截短表达猪细小病毒 VP2 及其抗体的制备第31-39页
   ·材料第31页
     ·病毒第31页
     ·主要试剂第31页
     ·主要仪器第31页
   ·方法第31-34页
     ·引物的设计第31-32页
     ·猪细小病毒基因组的提取第32-33页
     ·基因的扩增第33页
     ·原核表达质粒的构建第33-34页
     ·原核表达及蛋白的纯化第34页
     ·多克隆抗体的制备第34页
   ·结果第34-38页
     ·基因的扩增第34-35页
     ·重组质粒的酶切鉴定第35页
     ·原核表达及蛋白的纯化第35-37页
     ·多克隆抗体的鉴定第37-38页
   ·讨论第38-39页
第四章 酵母双杂交检测截短的 TfR 胞外区与 VP2 之间的相互作用第39-46页
   ·材料第39页
     ·菌种和载体第39页
     ·主要试剂第39页
     ·主要仪器第39页
   ·方法第39-42页
     ·实验设计方案第39-40页
     ·诱饵质粒和捕获质粒的引物设计第40-41页
     ·诱饵质粒与捕获质粒的构建第41-42页
     ·酵母感受态的制备第42页
     ·酵母转化第42页
     ·酵母双杂交点对点的验证第42页
   ·结果第42-45页
     ·基因扩增及质粒的鉴定第42-43页
     ·酵母双杂交点对点的验证第43-45页
   ·讨论第45-46页
第五章 猪转铁蛋白受体逆转录病毒包装质粒的构建第46-50页
   ·材料第46页
     ·组织细胞第46页
     ·主要试剂第46页
     ·主要仪器第46页
   ·方法第46-48页
     ·猪转铁蛋白受体全长基因的扩增策略第46-47页
     ·扩增引物的设计第47页
     ·基因的扩增第47-48页
     ·逆转录病毒包装质粒的构建第48页
   ·结果第48-49页
   ·讨论第49-50页
第六章 全文结论第50-51页
参考文献第51-57页
附录第57-58页
致谢第58-59页
作者简介第59页

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