目录 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
符号与缩略语说明 | 第9-10页 |
前言 | 第10-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-31页 |
1 阿特津拉降解研究进展 | 第11-18页 |
·阿特拉津概述 | 第11-12页 |
·阿特拉津生物降解的研究 | 第12-15页 |
·阿特拉津的生物降解机理 | 第15-16页 |
·阿特拉津降解基因 | 第16-17页 |
·阿特拉津降解酶 | 第17-18页 |
2 抗除草剂转基因工程研究 | 第18-26页 |
·转基因抗除草剂国内外研究现状 | 第18页 |
·转基因除草剂的遗传转化方法及特点 | 第18-22页 |
·转基因抗除草剂的优越性及安全性 | 第22-24页 |
·抗除草剂基因在水稻上的应用及问题 | 第24-26页 |
3 本文的研究目标和意义 | 第26-27页 |
参考文献 | 第27-31页 |
第二章 抗阿特拉津trzN基因水稻表达载体的构建及遗传转化 | 第31-63页 |
第一节 抗阿特拉津trzN基因的定点突变 | 第31-44页 |
1 材料与方法 | 第32-40页 |
·菌株与质粒 | 第32页 |
·培养基 | 第32页 |
·抗生素及使用浓度 | 第32页 |
·试剂和酶 | 第32页 |
·分子生物学操作 | 第32-34页 |
·trzN-pMD19质粒DNA的提取 | 第34页 |
·trzN基因中BamHI酶切位点的突变 | 第34-37页 |
·trzN基因中KpnI酶切位点的突变 | 第37-39页 |
·trzN的PCR产物加A尾 | 第39页 |
·酶连 | 第39-40页 |
·酶连产物转化E.coli DH5α | 第40页 |
·质粒DNA的小量提取 | 第40页 |
2 结果与分析 | 第40-44页 |
·pET29a-trzN质粒提取 | 第40页 |
·trzN基因中BamHI酶切位点的突变 | 第40-42页 |
·trzN基因中KpnI酶切位点的突变 | 第42-43页 |
·T-A克隆与测序验证 | 第43-44页 |
第二节 抗阿特拉津trzN基因水稻表达载体构建及遗传转化 | 第44-61页 |
1 材料与方法 | 第44-54页 |
·菌株和质粒 | 第44页 |
·培养条件 | 第44页 |
·试剂 | 第44页 |
·抗生素及使用浓度 | 第44-45页 |
·表达载体构建 | 第45-47页 |
·植物表达载体的农杆菌的制备及转化 | 第47-48页 |
·农杆菌重组质粒的鉴定 | 第48-49页 |
·根癌农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第49-51页 |
·转基因植株的鉴定 | 第51-54页 |
2 结果与分析 | 第54-59页 |
·表达载体的构建 | 第54-56页 |
·农杆菌介导的遗传转化和表达植株再生 | 第56-57页 |
·转基因植株的鉴定 | 第57-59页 |
3 讨论 | 第59-61页 |
·定点突变 | 第59页 |
·水稻表达载体的构建 | 第59-60页 |
·农杆菌介导的遗传转化及转基因检测 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-63页 |
第三章 转trzN基因水稻的抗阿特拉津性能研究 | 第63-69页 |
1 材料与方法 | 第63-64页 |
·水稻种子 | 第63页 |
·潮霉素抗性验证遗传分析 | 第63页 |
·野生型日本晴水稻对阿特拉津浓度的探索 | 第63页 |
·转trzN基因水稻幼苗抗阿特拉津表型的研究 | 第63-64页 |
2 结果与分析 | 第64-66页 |
·野生型日本晴水稻对阿特拉津浓度的探索 | 第64-65页 |
·转trzN基因水稻幼苗抗阿特拉津表型的研究 | 第65-66页 |
3 本章小结与讨论 | 第66-68页 |
参考文献 | 第68-69页 |
全文总结与展望 | 第69-71页 |
创新之处 | 第71-73页 |
附录 | 第73-79页 |
附录一:文中所用的培养基和试剂配方 | 第73-77页 |
一、培养基 | 第73-74页 |
二、母液配方 | 第74-75页 |
三、激素、抗生素和试剂溶液的配制 | 第75-77页 |
附录二:trzN原始序列 | 第77-79页 |
trzN定点突变序列 | 第78-79页 |
致谢 | 第79页 |