缩略词表 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
前言 | 第10-15页 |
1. 细胞周期调控 | 第10-11页 |
2. Cdc25 磷酸酶家族的结构与功能 | 第11-13页 |
3. c-Abl 激酶家族的结构与功能 | 第13-14页 |
4. 本课题研究的科学问题 | 第14-15页 |
材料与方法 | 第15-22页 |
1. 菌株、细胞株及质粒 | 第15页 |
2. 分子生物学工具酶 | 第15页 |
3. Cdc25C 全长基因的获得 | 第15页 |
4. 质粒构建及序列测定 | 第15-16页 |
5. 质粒小提 | 第16-17页 |
6. 谷胱甘肽 S 转移酶(GST)融合表达蛋白的制备 | 第17页 |
7. 细胞培养、冻存与转染 | 第17-18页 |
8. 免疫沉淀与免疫印迹 | 第18-19页 |
9. 蛋白浓度的测定 | 第19页 |
10. 体外结合实验 | 第19-20页 |
11. 体外磷酸酶活性检测 | 第20页 |
12. 细胞同步化实验 | 第20页 |
13. 细胞核、细胞质蛋白分离 | 第20页 |
14. 流式细胞术检测细胞周期 | 第20-21页 |
15. 细胞中总 RNA 提取及 RT-PCR | 第21页 |
16. 激酶分析实验 | 第21页 |
17. 其他 | 第21-22页 |
结果 | 第22-36页 |
1. c-Abl 与 Cdc25C 之间存在直接相互作用 | 第22-24页 |
2. c-Abl 酪氨酸激酶可介导 Cdc25C 酪氨酸磷酸化修饰 | 第24-25页 |
3. 利用串联质谱技术(LC-MS/MS)分析 c-Abl 介导的 Cdc25C 的酪氨酸磷酸化位点 | 第25-28页 |
4. c-Abl 激酶介导的 Cdc25C 酪氨酸磷酸化可抑制 Cdc25C 的磷酸酶活性 | 第28-30页 |
5. Cdc25C S216 位点磷酸化受 c-Abl 介导的酪氨酸磷酸化调节 | 第30-32页 |
6. Cdc25C 在细胞内的稳定性依赖 c-Abl 激酶活性 | 第32-33页 |
7. c-Abl 介导的 Cdc25C 酪氨酸磷酸化抑制细胞增殖并促进 G2/M 期阻滞 | 第33-36页 |
讨论 | 第36-40页 |
1. c-Abl 酪氨酸激酶与 Cdc25C 之间的存在直接相互作用 | 第36页 |
2. c-Abl 激酶可介导 Cdc25C 酪氨酸磷酸化 | 第36-37页 |
3. c-Abl 介导的 Cdc25C 酪氨酸磷酸化抑制 Cdc25C 的磷酸酶活性 | 第37-38页 |
4. c-Abl 介导的 Cdc25C 酪氨酸磷酸化缺失导致 Cdc25C 阻滞在细胞质并降解 | 第38页 |
5. c-Abl 介导的 Cdc25C 酪氨酸磷酸化修饰可抑制细胞增殖并促进 G2/M 期阻滞 | 第38-40页 |
结论 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-46页 |
文献综述 | 第46-52页 |
参考文献 | 第48-52页 |
发表论文 | 第52-58页 |
参考文献 | 第57-58页 |
个人简历 | 第58-59页 |
致谢 | 第59页 |