中文摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-12页 |
文献综述 | 第12-23页 |
1 水稻和稻瘟菌 | 第12-14页 |
·水稻的概述 | 第12页 |
·水稻稻瘟菌 | 第12-13页 |
·稻瘟菌侵害水稻的机制 | 第13-14页 |
2 MAP 蛋白酶细胞学作用 | 第14页 |
3 烯脂酰辅酶 A 水合酶的研究进展 | 第14-17页 |
4 原核及真核表达系统的特点 | 第17页 |
5 研究蛋白质互作的方法 | 第17-21页 |
6 本研究的背景和基础 | 第21页 |
7 本研究的意义 | 第21-23页 |
第一章 烯脂酰辅酶 A 水合酶原核载体的构建和表达 | 第23-38页 |
1 材料 | 第23-25页 |
·稻瘟菌材料 | 第23页 |
·菌株和质粒 | 第23页 |
·实验试剂 | 第23页 |
·实验仪器 | 第23-24页 |
·实验溶液和培养基 | 第24-25页 |
2 方法 | 第25-32页 |
·烯脂酰辅酶 A 水合酶的克隆 | 第25-28页 |
·烯脂酰辅酶 A 水合酶原核表达载体的构建 | 第28-30页 |
·烯脂酰辅酶 A 水合酶的原核表达 | 第30-32页 |
3 结果与分析 | 第32-37页 |
·烯脂酰辅酶 A 水合酶(ECH)的克隆 | 第32-35页 |
·烯脂酰辅酶 A 水合酶(ECH)原核表达载体的构建和表达 | 第35-36页 |
·烯脂酰辅酶 A 水合酶(ECH)蛋白的原核表达 | 第36-37页 |
结论 | 第37-38页 |
第二章 烯脂酰辅酶 A 水合酶和 MAP 蛋白酶的真核表达 | 第38-60页 |
1 材料 | 第38-40页 |
·稻瘟菌材料 | 第38页 |
·菌株和质粒 | 第38页 |
·实验试剂 | 第38-39页 |
·实验仪器 | 第39页 |
·实验溶液和培养基 | 第39-40页 |
2 方法 | 第40-50页 |
·MAP 蛋白酶的克隆 | 第40-42页 |
·烯脂酰辅酶 A 水合酶和 MAP 蛋白酶酵母表达载体的构建 | 第42-45页 |
·酵母表达载体的线性化 | 第45-46页 |
·酵母的转化 | 第46-47页 |
·鉴定酵母转化子的表达型 | 第47页 |
·酵母转化子蛋白质的诱导表达 | 第47-49页 |
·酵母蛋白的提取 | 第49页 |
·烯脂酰辅酶 A 水合酶的提纯 | 第49-50页 |
3 结果与分析 | 第50-59页 |
·MAP 蛋白酶的克隆 | 第50-52页 |
·烯脂酰辅酶 A 水合酶和 MAP 蛋白酶酵母表达载体构建 | 第52-54页 |
·烯脂酰辅酶 A 水合酶和 MAP 蛋白酶酵母的转化 | 第54-56页 |
·烯脂酰辅酶 A 水合酶- PPICZC 酵母蛋白类型的鉴定 | 第56-57页 |
·烯脂酰辅酶 A 水合酶- PPICZC 酵母蛋白的诱导表达 | 第57-59页 |
结论 | 第59-60页 |
第三章 酵母双杂交技术鉴定蛋白质相互作用 | 第60-66页 |
1 材料 | 第60-61页 |
·菌株 | 第60页 |
·主要试剂配制 | 第60-61页 |
·主要实验仪器 | 第61页 |
2 方法 | 第61-62页 |
酵母双杂交方法验证蛋白的互作 | 第61-62页 |
3 结果 | 第62-65页 |
·烯脂酰辅酶 A 水合酶和 MAP 重组载体的 PCR 验证 | 第62-63页 |
·烯脂酰辅酶 A 水合酶和 MAP 重组载体共转化酵母的检测 | 第63-64页 |
·烯脂酰辅酶 A 水合酶和 MAP 互作的鉴定 | 第64-65页 |
结论 | 第65-66页 |
讨论 | 第66-69页 |
参考文献 | 第69-77页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第77-78页 |
致谢 | 第78页 |