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黑莓花青素苷、原花色素的合成代谢及相关基因克隆和表达研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-9页
缩略词表第9-11页
目录第11-14页
第一章 课题提出与前人研究进展第14-30页
 1 悬钩子属植物分类与地理分布第14-16页
 2 黑莓的产业发展现状第16页
 3 黑莓的营养价值及经济价值第16-17页
 4 黑莓育种中急需解决的几个问题第17-19页
 5 植物类黄酮生物合成研究进展及存在的问题第19-28页
   ·花青素苷和原花色素的生物合成、转运和存储第21-25页
   ·植物花青素苷、原花色素代谢的转录调控第25-28页
     ·转录因子对合成途径中结构基因的影响第26-27页
     ·独立作用与协同效应第27-28页
 6 本课题的目标与意义第28-30页
第二章 黑莓果实发育过程中花青素苷与原花色素的代谢变化第30-40页
 1 材料与方法第30-32页
   ·试验材料第30-31页
   ·试验方法第31-32页
     ·花青素苷的提取与定量第31-32页
     ·原花色素的提取与定量第32页
   ·数据统计第32页
 2 结果与分析第32-36页
   ·黑莓果实纵横径及单果重变化第32-33页
   ·黑莓果实成熟过程中花青素苷的代谢变化第33-34页
   ·黑莓果实发育过程中原花色素的代谢变化第34-36页
 3 讨论第36-40页
   ·果实生长曲线第36页
   ·栽培管理第36-37页
   ·花青素苷与原花色素的测定第37-40页
第三章 花青素苷合成中调控因子RUMYB10基因的全长克隆,序列分析及表达第40-54页
 1 材料与方法第40-44页
   ·植物材料第40页
   ·工程菌株第40-41页
   ·载体第41页
   ·主要试验方法第41-44页
     ·DNA的提取及质量检测第41-42页
     ·引物设计与片段扩增第42页
     ·SON-PCR侧翼序列扩增第42-43页
     ·PCR产物的回收、连接、转化及测序后的数据分析第43页
     ·实时定量PCR检测基因表达水平第43-44页
 2 结果与分析第44-51页
   ·RuMFB10的全长扩增第44页
   ·RuMYB10基因序列分析第44-45页
   ·RuMYB10基因的RT-PCR验证第45-46页
   ·RuMYB10转录因子结构分析第46-48页
   ·RuMYB10功能相近转录因子的系统发育分析第48-50页
   ·RuMYB10的三级结构预测第50页
   ·RuMYB10在黑莓果实发育过程中的表达第50-51页
 3 讨论第51-54页
第四章 黑莓花青素苷和原花色素生物合成结构基因的克隆及表达第54-81页
 1 材料与方法第54-61页
   ·基因组DNA和果实总RNA的提取第54-56页
     ·基因组DNA提取及质量检测第55页
     ·RNA提取及检测第55-56页
   ·引物设计及合成第56页
   ·PCR扩增反应程序及体系第56-57页
   ·PCR产物回收第57页
   ·感受态细胞制备第57-58页
   ·产物与载体的连接及转化第58页
   ·重组质粒鉴定第58-59页
   ·cDNA第一链合成第59页
   ·实时定量PCR程序及体系第59-60页
   ·数据处理第60-61页
     ·核酸序列分析第60-61页
     ·定量数据分析第61页
 2 结果与分析第61-73页
   ·DNA提取及检测第61-62页
   ·RNA提取及检测第62-64页
   ·各基因生物信息学分析第64-68页
   ·结构基因表达模式第68-73页
     ·标准曲线的构建第69-70页
     ·六个结构基因在黑莓果实发育过程中表达及聚类模式第70-72页
     ·基因的表达与产物积累的相关性分析第72-73页
 3 讨论第73-81页
   ·黑莓果实RNA的提取第73-75页
   ·基于基因同源序列的PCR扩增策略第75-76页
   ·黑莓编码基因中密码子偏好性第76-77页
   ·类黄酮代谢结构基因的表达与花青素苷、原花色素积累的关系第77-79页
   ·潜在的特殊功能的糖基转移酶基因RuGT第79-81页
第五章 需进一步研究的内容第81-83页
参考文献 LITERATURE CITED第83-99页
附录第99-101页
致谢第101-102页
学习期间发表论文情况第102-103页

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