| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-8页 |
| 前言 | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-20页 |
| ·Mitofilin 的结构与功能 | 第9-11页 |
| ·Mitofilin 的结构 | 第9-10页 |
| ·Mitofilin 的功能 | 第10-11页 |
| ·线粒体蛋白的转运与 Tim23 | 第11-14页 |
| ·线粒体蛋白的转运 | 第11-12页 |
| ·TIM23 复合体的组成 | 第12-13页 |
| ·Tim23 的结构与功能 | 第13-14页 |
| ·线粒体与细胞凋亡 | 第14-15页 |
| ·线粒体内膜结构与动态网络 | 第15-17页 |
| ·蓝色温和电泳技术 BN-PAGE | 第17-18页 |
| ·慢病毒载体系统 | 第18-19页 |
| ·本课题的研究背景及立题依据 | 第19-20页 |
| 第二章 材料与方法 | 第20-34页 |
| ·实验材料 | 第20-21页 |
| ·试剂 | 第20页 |
| ·细胞株 | 第20-21页 |
| ·菌株、载体 | 第21页 |
| ·动物 | 第21页 |
| ·常用试剂、溶液的配制 | 第21-24页 |
| ·Western Blot 相关试剂 | 第21-22页 |
| ·细胞裂解溶液及免疫沉淀相关溶液 | 第22页 |
| ·BN-PAGE 和 hrCN-PAGE 相关溶液 | 第22-23页 |
| ·呼吸链复合体酶活显色液和终止液 | 第23页 |
| ·细胞培养相关溶液 | 第23页 |
| ·细菌培养相关溶液 | 第23-24页 |
| ·主要仪器设备 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-34页 |
| ·一般细胞培养条件 | 第24页 |
| ·细胞总蛋白的提取 | 第24页 |
| ·免疫印迹（Western-blot） | 第24-25页 |
| ·载体构建 | 第25页 |
| ·转染 | 第25页 |
| ·shRNA 载体构建 | 第25-26页 |
| ·慢病毒包装、浓缩、感染及滴度测定 | 第26页 |
| ·细胞 RNA 提取 | 第26-27页 |
| ·RT-PCR | 第27页 |
| ·Real-time PCR | 第27页 |
| ·集落形成实验 | 第27页 |
| ·细胞凋亡诱导实验 | 第27-28页 |
| ·细胞凋亡检测(Annexin V-PE/7-AAD 双标法) | 第28页 |
| ·细胞周期检测 | 第28页 |
| ·RNA 干扰实验 | 第28页 |
| ·线粒体功能检测 | 第28-29页 |
| ·线粒体网络观察 | 第29-30页 |
| ·线粒体内膜结构观察 | 第30页 |
| ·细胞 ATP 含量测定 | 第30-31页 |
| ·慢病毒小鼠体内转染 | 第31页 |
| ·线粒体蛋白质的提取 | 第31页 |
| ·呼吸链复合体活性检测 | 第31-32页 |
| ·Mitofilin 蛋白与 Tim23 蛋白相互作用的验证 | 第32页 |
| ·蛋白质相互作用结构域的确定 | 第32-33页 |
| ·蛋白稳定性实验 | 第33页 |
| ·统计学分析 | 第33-34页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第34-58页 |
| ·Mitofilin 蛋白下调对线粒体的影响 | 第34-45页 |
| ·pSicoR-GFP-Mitofilin 干涉载体构建及干涉效果鉴定 | 第34-36页 |
| ·Mitofilin 干涉稳定细胞株的构建 | 第36-38页 |
| ·Mitofilin 下调导致线粒体内膜结构紊乱 | 第38-39页 |
| ·Mitofilin 下调改变线粒体网络结构 | 第39-40页 |
| ·Mitofilin 下调损伤线粒体功能 | 第40-42页 |
| ·Mitofilin 下调降低线粒体呼吸链复合体 V 活性 | 第42-44页 |
| ·Mitofilin 下调细胞 ATP 检测 | 第44-45页 |
| ·小结 | 第45页 |
| ·Mitofilin 蛋白对细胞凋亡的影响 | 第45-58页 |
| ·Mitofilin 下调阻滞细胞周期进程 | 第45-46页 |
| ·Mitofilin 下调降低细胞集落形成能力 | 第46-47页 |
| ·Mitofilin 下调细胞凋亡比例增加 | 第47-48页 |
| ·Mitofilin 蛋白的表达变化对细胞凋亡的影响 | 第48-49页 |
| ·Mitofilin 与 Tim23 相互作用的确证 | 第49-52页 |
| ·Mitofilin 对 Tim23 稳定性的影响 | 第52-56页 |
| ·回转 Tim23 减少 Mitofilin 下调诱导的细胞凋亡 | 第56-57页 |
| ·小结 | 第57-58页 |
| 第四章 结论与展望 | 第58-59页 |
| ·结论 | 第58页 |
| ·展望 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-64页 |
| 发表论文和参加科研情况 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 附录 | 第66-67页 |
