摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-8页 |
第一章 文献综述 | 第8-15页 |
·木质纤维素稀酸预处理过程中的抑制物 | 第8-11页 |
·抑制物的产生及新分类 | 第8-9页 |
·抑制物的代谢转化途径 | 第9页 |
·抑制物对酵母的影响 | 第9-11页 |
·酵母对抑制物应答的特点 | 第11-12页 |
·酵母对抑制物的应答存在剂量依赖效应 | 第11页 |
·酵母对抑制物的全基因组水平上的适应性应答 | 第11-12页 |
·基于酵母耐受的菌株开发 | 第12-13页 |
·提高菌株自身性能是经济高效型发酵的关键 | 第12页 |
·Adaptation的方法可以获得高耐受性酵母菌株 | 第12-13页 |
·本论文研究的内容和意义 | 第13-15页 |
第二章 实验材料与方法 | 第15-35页 |
·实验材料与仪器设备 | 第15-24页 |
·常规培养基 | 第15-16页 |
·通用溶液与缓冲液及配制方法 | 第16-20页 |
·主要生化试剂及酶制剂 | 第20-22页 |
·仪器设备 | 第22-24页 |
·通用实验方法 | 第24-35页 |
·大肠杆菌和酿酒酵母菌株的培养与菌种保存 | 第24页 |
·CaCl_2法制备感受态细胞 | 第24-25页 |
·碱裂解法小量快速制备质粒DNA | 第25页 |
·玻璃珠法提取酿酒酵母基因组DNA | 第25-26页 |
·PCR扩增DNA片段 | 第26-27页 |
·乙醇沉淀法纯化DNA片段 | 第27-28页 |
·DNA片段的切胶回收 | 第28页 |
·酶切 | 第28-30页 |
·连接(目的DNA片段与载体的连接) | 第30页 |
·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第30-31页 |
·大肠杆菌菌落PCR | 第31页 |
·乙酸锂法转化酿酒酵母细胞(转化质粒) | 第31-32页 |
·乙酸锂法转化酿酒酵母细胞(转化DNA片段用于基因重组) | 第32页 |
·梯度连续稀释法进行表型实验 | 第32-34页 |
·生物信息学方法的利用 | 第34-35页 |
第三章 功能基因组学方法对酿酒酵母耐受糠醛基因的筛选 | 第35-64页 |
·实验材料 | 第35-40页 |
·野生型菌株 | 第35-36页 |
·酿酒酵母单基因缺失株文库 | 第36-39页 |
·筛选试剂 | 第39页 |
·筛选培养基 | 第39-40页 |
·实验方法 | 第40-43页 |
·背景菌的确立以及糠醛浓度的确定 | 第40页 |
·酿酒酵母耐受糠醛基因的初筛 | 第40-41页 |
·酿酒酵母耐受糠醛基因的复筛 | 第41-42页 |
·功能分类以及细胞定位分析方法 | 第42-43页 |
·实验结果与讨论 | 第43-64页 |
·背景菌的确立以及糠醛浓度的确定 | 第43-44页 |
·初筛结果与讨论 | 第44页 |
·复筛结果与讨论以及抗性程度分析及讨论 | 第44-46页 |
·筛选得到基因的功能分类研究及分析 | 第46-58页 |
·筛选得到基因的细胞定位研究及分析 | 第58-64页 |
第四章 酿酒酵母SIZ1、DEP1 和SAP30 基因相互作用初探 | 第64-75页 |
·实验材料 | 第64-66页 |
·菌株 | 第64-65页 |
·质粒 | 第65页 |
·PCR引物 | 第65页 |
·选择培养基 | 第65-66页 |
·实验方法 | 第66-68页 |
·糠醛高耐受性单基因缺失株的基因型验证 | 第66-67页 |
·酿酒酵母双基因缺失株的构建策略 | 第67-68页 |
·实验结果与讨论 | 第68-75页 |
·酿酒酵母SIZ1、DEP1 和SAP30 单倍体单基因缺失株的基因型以及表型验证 | 第68-70页 |
·酿酒酵母siz1sap30,siz1dep1,dep1sap30 双基因缺失株的构建 | 第70-73页 |
·双基因互作表型实验 | 第73-75页 |
参考文献 | 第75-78页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第78-79页 |
致谢 | 第79页 |