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酿酒酵母基因组中糠醛耐受相关基因的初步研究

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-8页
第一章 文献综述第8-15页
   ·木质纤维素稀酸预处理过程中的抑制物第8-11页
     ·抑制物的产生及新分类第8-9页
     ·抑制物的代谢转化途径第9页
     ·抑制物对酵母的影响第9-11页
   ·酵母对抑制物应答的特点第11-12页
     ·酵母对抑制物的应答存在剂量依赖效应第11页
     ·酵母对抑制物的全基因组水平上的适应性应答第11-12页
   ·基于酵母耐受的菌株开发第12-13页
     ·提高菌株自身性能是经济高效型发酵的关键第12页
     ·Adaptation的方法可以获得高耐受性酵母菌株第12-13页
   ·本论文研究的内容和意义第13-15页
第二章 实验材料与方法第15-35页
   ·实验材料与仪器设备第15-24页
     ·常规培养基第15-16页
     ·通用溶液与缓冲液及配制方法第16-20页
     ·主要生化试剂及酶制剂第20-22页
     ·仪器设备第22-24页
   ·通用实验方法第24-35页
     ·大肠杆菌和酿酒酵母菌株的培养与菌种保存第24页
     ·CaCl_2法制备感受态细胞第24-25页
     ·碱裂解法小量快速制备质粒DNA第25页
     ·玻璃珠法提取酿酒酵母基因组DNA第25-26页
     ·PCR扩增DNA片段第26-27页
     ·乙醇沉淀法纯化DNA片段第27-28页
     ·DNA片段的切胶回收第28页
     ·酶切第28-30页
     ·连接(目的DNA片段与载体的连接)第30页
     ·大肠杆菌感受态细胞的转化第30-31页
     ·大肠杆菌菌落PCR第31页
     ·乙酸锂法转化酿酒酵母细胞(转化质粒)第31-32页
     ·乙酸锂法转化酿酒酵母细胞(转化DNA片段用于基因重组)第32页
     ·梯度连续稀释法进行表型实验第32-34页
     ·生物信息学方法的利用第34-35页
第三章 功能基因组学方法对酿酒酵母耐受糠醛基因的筛选第35-64页
   ·实验材料第35-40页
     ·野生型菌株第35-36页
     ·酿酒酵母单基因缺失株文库第36-39页
     ·筛选试剂第39页
     ·筛选培养基第39-40页
   ·实验方法第40-43页
     ·背景菌的确立以及糠醛浓度的确定第40页
     ·酿酒酵母耐受糠醛基因的初筛第40-41页
     ·酿酒酵母耐受糠醛基因的复筛第41-42页
     ·功能分类以及细胞定位分析方法第42-43页
   ·实验结果与讨论第43-64页
     ·背景菌的确立以及糠醛浓度的确定第43-44页
     ·初筛结果与讨论第44页
     ·复筛结果与讨论以及抗性程度分析及讨论第44-46页
     ·筛选得到基因的功能分类研究及分析第46-58页
     ·筛选得到基因的细胞定位研究及分析第58-64页
第四章 酿酒酵母SIZ1、DEP1 和SAP30 基因相互作用初探第64-75页
   ·实验材料第64-66页
     ·菌株第64-65页
     ·质粒第65页
     ·PCR引物第65页
     ·选择培养基第65-66页
   ·实验方法第66-68页
     ·糠醛高耐受性单基因缺失株的基因型验证第66-67页
     ·酿酒酵母双基因缺失株的构建策略第67-68页
   ·实验结果与讨论第68-75页
     ·酿酒酵母SIZ1、DEP1 和SAP30 单倍体单基因缺失株的基因型以及表型验证第68-70页
     ·酿酒酵母siz1sap30,siz1dep1,dep1sap30 双基因缺失株的构建第70-73页
     ·双基因互作表型实验第73-75页
参考文献第75-78页
发表论文和参加科研情况说明第78-79页
致谢第79页

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