中文摘要 | 第1-10页 |
英文摘要 | 第10-14页 |
缩写 | 第14-15页 |
第一部分 文献综述 | 第15-26页 |
1.1 微孢子虫的起源与进化 | 第15-16页 |
1.2 微孢子虫的分类 | 第16-21页 |
1.2.1 生物学分类系统的演进 | 第16-18页 |
1.2.2 生物学分类标准的评价 | 第18页 |
1.2.3 免疫学分类的应用 | 第18-19页 |
1.2.4 分子生物学分类的进步 | 第19-21页 |
1.2.4.1 微孢子虫蛋白质在其分类上的应用 | 第19页 |
1.2.4.2 微孢子虫染色体核型在其分类上的应用 | 第19-20页 |
1.2.4.3 微孢子虫核糖体RNA在分类上的应用 | 第20-21页 |
1.3 微孢子虫类的病理生物学与流行病学 | 第21-26页 |
1.3.1 微孢子虫的生活史及超微结构 | 第21-22页 |
1.3.2 极丝的结构、功能与孢子发芽 | 第22-23页 |
1.3.2.1 极丝的结构 | 第22页 |
1.3.2.2 极丝的功能与发芽 | 第22-23页 |
1.3.3 孢子生殖的二型型和孢子的二型性 | 第23页 |
1.3.4 寄生组织的差异性 | 第23-24页 |
1.3.5 家蚕病原性微孢子虫发生的临行病学 | 第24-26页 |
1.3.5.1 病原的传染途径与传播方式 | 第24页 |
1.3.5.2 微孢子虫与宿主的相互关系 | 第24-26页 |
第二部分 引言 | 第26-28页 |
第三部分 家蚕病原性微孢子虫SCM_8的研究 | 第28-35页 |
3.1 材料和方法 | 第28-29页 |
3.1.1 材料 | 第28页 |
3.1.2 方法 | 第28-29页 |
3.1.2.1 微孢子虫N.bombycis、SCM_7、SCM_8的繁殖与纯化 | 第28页 |
3.1.2.2 微孢子虫的形态观察与大小测定 | 第28页 |
3.1.2.3 SCM_8的家蚕的病原性 | 第28-29页 |
3.1.2.3.1 感染中量(IC_(50)) | 第28-29页 |
3.1.2.3.2 寄生组织与病变 | 第29页 |
3.1.2.3.3 胚种传染 | 第29页 |
3.1.2.3.4 电镜下的生活史 | 第29页 |
3.2 结果与分析 | 第29-34页 |
3.2.1 微孢子虫的形态于大小 | 第29-30页 |
3.2.2 SCM_8对家蚕的病原性 | 第30页 |
3.2.2.1 SCM_8的感染中量(IC_(50)) | 第30页 |
3.2.2.2 寄生组织与病变 | 第30页 |
3.2.2.3 胚种传染 | 第30页 |
3.2.3 微孢子虫SCM_8的生活史 | 第30-33页 |
3.2.3.1 裂殖体和裂殖体生殖 | 第30-31页 |
3.2.3.2 母孢子和孢子生殖 | 第31-33页 |
3.2.3.3 孢子 | 第33页 |
3.2.4 微孢子虫SCM_8的分类地位 | 第33-34页 |
3.3 讨论 | 第34-35页 |
第四部分 微孢子虫SCM_7SSUrANA基因的克隆与分析 | 第35-69页 |
4.1 材料和方法 | 第35-43页 |
4.1.1 材料 | 第35-36页 |
4.1.2 方法 | 第36-43页 |
4.1.2.1 微孢子虫DNA的制备 | 第36-37页 |
4.1.2.1.1 常规法(碳酸钠法) | 第36页 |
4.1.2.1.2 TEK法 | 第36-37页 |
4.1.2.2 SCM_7SSUrRNA基因核心序列引物的设计 | 第37页 |
4.1.2.3 SCM_7SSUrRNA基因核心序列的PCR扩 | 第37页 |
4.1.2.4 目的片段的回收 | 第37页 |
4.1.2.5 PCR产物的酶切分析 | 第37-38页 |
4.1.2.6 SCM_7SSUrRNA基因核心序列的克隆 | 第38-40页 |
4.1.2.6.1 质粒载体的制备 | 第38页 |
4.1.2.6.2 目的片段的准备 | 第38页 |
4.1.2.6.3 目的片段与载体的连接 | 第38-39页 |
4.1.2.6.4 感受态细胞的制备 | 第39页 |
4.1.2.6.5 转化 | 第39页 |
4.1.2.6.6 阳性克隆的筛选与验证 | 第39-40页 |
4.1.2.7 测序 | 第40页 |
4.1.2.8 SCM7SSUrRNA基因核心序列两端未知序列的扩增 | 第40-41页 |
4.1.2.8.1 模板DNA的制备 | 第40页 |
4.1.2.8.2 引物设计 | 第40页 |
4.1.2.8.3 Inverse PCR | 第40-41页 |
4.1.2.9 序列分析 | 第41页 |
4.1.2.9.1 一级结构分析 | 第41页 |
4.1.2.9.2 二级结构分析 | 第41页 |
4.1.2.9.2.1 二级结构的构建 | 第41页 |
4.1.2.9.2.2 二级结构的分析 | 第41页 |
4.1.2.9.3 序列的同源性分析 | 第41页 |
4.1.2.10 微孢子虫门的系统发育分析 | 第41-43页 |
4.1.2.11 微孢子虫门的进化分析 | 第43页 |
4.2 结果与分析 | 第43-64页 |
4.2.1 微孢子虫DNA的制备 | 第43-44页 |
4.2.2 SCM_7SSUrRNA基因核心序列的引物设计 | 第44页 |
4.2.3 N.bombycis、SCM_7和SCM_8的SSUrRNA基因核心序列的PCR扩增 | 第44-45页 |
4.2.4 PCR产物的酶切分析 | 第45-46页 |
4.2.5 SCM_7SSUrRNA基因核心序列的克隆 | 第46-47页 |
4.2.6 测序结果 | 第47-48页 |
4.2.7 SCM7SSUrRNA核心序列两端未知序列的扩增 | 第48-49页 |
4.2.7.1 引物设计 | 第48页 |
4.2.7.2 两端未知序列的Inverse PCR扩增 | 第48-49页 |
4.2.8 序列分析 | 第49-55页 |
4.2.8.1 一级结构分析 | 第49-50页 |
4.2.8.1.1 序列组成及特征 | 第49页 |
4.2.8.1.2 酶切图谱 | 第49-50页 |
4.2.8.2 二级结构分析 | 第50-52页 |
4.2.8.3 同源性分析 | 第52-55页 |
4.2.9 微孢子虫门的系统发育分析 | 第55-60页 |
4.2.10 微孢子虫门的进化分析 | 第60-64页 |
4.3 讨论 | 第64-69页 |
4.3.1 微孢子虫DNA的制备 | 第64页 |
4.3.2 SCM_7SSUrRNA基因核心序列的引物设计 | 第64页 |
4.3.3 SCM_7SSUrRNA基因核心序列PCR产物的酶切分析 | 第64-65页 |
4.3.4 SCM_7SSUrRNA基因核心序列的克隆 | 第65页 |
4.3.5 Inverse PCR | 第65页 |
4.3.6 序列分析软件 | 第65-66页 |
4.3.7 系统发育和进化树构建软件 | 第66页 |
4.3.8 SCM_7SSUrRNA序列的同源性 | 第66-67页 |
4.3.9 微孢子虫门的系统发育 | 第67页 |
4.3.10 微孢子虫门的进化 | 第67-69页 |
第五部分 结论 | 第69-73页 |
5.1 SCM_8的感染中量(IC_(50)) | 第69页 |
5.2 SCM_8的寄生虫组织及病变 | 第69页 |
5.3 SCM_8的胚种传染 | 第69页 |
5.4 SCM_8的生活史 | 第69-70页 |
5.4.1 裂殖体和裂殖体生殖 | 第69页 |
5.4.2 母孢子和孢子生殖 | 第69页 |
5.4.3 孢子 | 第69-70页 |
5.5 SCM_8的分类地位 | 第70页 |
5.6 SCM_7SSUrRNA序列的一级结构 | 第70-71页 |
5.7 SCM_7SSUrRNA序列的二级结构 | 第71页 |
5.8 SCM_7SSUrRNA序列的同源性 | 第71页 |
5.9 微孢子虫门的系统发育 | 第71页 |
5.10 微孢子虫门的进化 | 第71-73页 |
参考文献 | 第73-84页 |
附录Ⅰ | 第84-87页 |
附录Ⅱ | 第87-93页 |
致谢 | 第93页 |