中文摘要 | 第1-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
1 前言 | 第11-39页 |
1.1 植物抗旱分子生物学 | 第11-24页 |
1.1.1 植物对水分胁迫的分子应答 | 第11-14页 |
1.1.1.1 基因转录调控模型 | 第11-12页 |
1.1.1.2 干旱胁迫应答基因的表达 | 第12页 |
1.1.1.3 干旱诱导基因表达的作用 | 第12页 |
1.1.1.4 干旱诱导基因表达的调控 | 第12-13页 |
1.1.1.5 干旱胁迫信号的传导 | 第13页 |
1.1.1.6 干旱胁迫下信号传导途径有关编码因子的诱导表达 | 第13-14页 |
1.1.1.7 干旱胁迫信号感受 | 第14页 |
1.1.2 干旱胁迫下植物渗透调节物质的积累 | 第14-17页 |
1.1.2.1 脯氨酸的积累与植物的耐旱性 | 第15页 |
1.1.2.2 甘氨酸甜菜碱积累与植物的耐旱性 | 第15-16页 |
1.1.2.3 干旱胁迫下植物碳水化合物的代谢改变 | 第16-17页 |
1.1.3 植物抗旱基因工程 | 第17-20页 |
1.1.3.1 植物抗旱基因工程策略 | 第17-18页 |
1.1.3.2 植物抗旱基因工程进展 | 第18-20页 |
1.1.4 海藻糖的抗逆特性 | 第20-24页 |
1.1.4.1 海藻糖的理化特性 | 第20页 |
1.1.4.2 海藻糖的分布 | 第20页 |
1.1.4.3 海藻糖的生理功能 | 第20-21页 |
1.1.4.4 海藻糖保护原生质膜的可能机制 | 第21页 |
1.1.4.5 海藻糖的生物合成 | 第21-22页 |
1.1.4.6 海藻糖合成酶基因的遗传转化 | 第22-24页 |
1.2 农杆菌介导单子叶植物遗传转化的分子基础及进展 | 第24-35页 |
1.2.1 农杆菌介导单子叶植物遗传转化发展概述 | 第24页 |
1.2.2 农杆菌介导遗传转化的优点 | 第24页 |
1.2.3 农杆菌T-DNA介导转化的分子机制 | 第24-31页 |
1.2.4 单子叶植物农杆菌介导遗传转化的研究进展 | 第31-32页 |
1.2.5 影响单子叶植物农杆菌转化的因素 | 第32-35页 |
1.2.5.1 vir基因表达的诱导 | 第32-33页 |
1.2.5.2 选择分裂活跃的细胞作为受体材料 | 第33-34页 |
1.2.5.3 农杆菌菌株和质粒载体 | 第34-35页 |
1.3 甘蔗遗传转化研究进展 | 第35-36页 |
1.4 甘蔗抗旱育种 | 第36-37页 |
1.5 本研究的目的意义及内容 | 第37-38页 |
1.6 技术路线 | 第38-39页 |
2 材料与方法 | 第39-54页 |
2.1 材料与试剂 | 第39页 |
2.1.1 质粒与菌株 | 第39页 |
2.1.2 植物受体材料 | 第39页 |
2.1.3 试剂 | 第39页 |
2.2 方法 | 第39-54页 |
2.2.1 植物表达载体构建 | 第39-47页 |
2.2.2 拟南芥干旱诱导启动子Prd29A的克隆 | 第47页 |
2.2.3 大肠杆菌海藻糖磷酸合酶基因的克隆 | 第47-48页 |
2.2.4 植物表达载体导入农杆菌 | 第48-50页 |
2.2.5 作基因功能鉴定的烟草转化试验 | 第50页 |
2.2.6 农杆菌介导甘蔗遗传转化 | 第50-54页 |
2.2.6.1 通过胚状体建立甘蔗再生体系 | 第50-51页 |
2.2.6.2 PPT浓度梯度筛选预试验 | 第51页 |
2.2.6.3 农杆菌介导甘蔗转化体系的建立 | 第51-53页 |
2.2.6.4 转化植株的分子检测 | 第53-54页 |
3 结果与分析 | 第54-70页 |
3.1 植物表达载体构建 | 第54-55页 |
3.2 拟南芥干旱诱导启动子Prd29A的克隆 | 第55-57页 |
3.3 大肠杆菌海藻糖磷酸合酶基因的克隆 | 第57-58页 |
3.4 植物表达载体导入农杆菌 | 第58-59页 |
3.5 海藻糖合酶基因农杆菌介导转化烟草 | 第59-61页 |
3.6 农杆菌介导甘蔗遗传转化 | 第61-70页 |
3.6.1 甘蔗胚性愈伤组织的诱导及分化成苗 | 第61-62页 |
3.6.2 甘蔗对PPT的敏感性 | 第62-63页 |
3.6.3 不同龄期愈伤组织作为转化起始材料的试验 | 第63-64页 |
3.6.4 农杆菌菌液浓度和侵染时间 | 第64-65页 |
3.6.5 AS的使用 | 第65页 |
3.6.6 共培养时间 | 第65页 |
3.6.7 不同基因型甘蔗愈伤组织的转化 | 第65-66页 |
3.6.8 程序化的转化及筛选 | 第66-67页 |
3.6.9 抗性植株的获得 | 第67-68页 |
3.6.10 转化植株的分子检测 | 第68-69页 |
3.6.11 抗性植株的形态观察 | 第69-70页 |
4 讨论 | 第70-77页 |
4.1 关于海藻糖合酶基因 | 第70-71页 |
4.2 关于启动子 | 第71-72页 |
4.3 关于选择标记 | 第72页 |
4.4 关于甘蔗农杆菌介导的遗传转化 | 第72-73页 |
4.5 关于农杆菌菌株EHA105 | 第73-74页 |
4.6 关于受体系统 | 第74页 |
4.7 Vir基因表达的诱导 | 第74-75页 |
4.8 分子检测 | 第75-76页 |
4.9 转化抗性植株的形态改变 | 第76页 |
4.10 关于工作的延续性和展望 | 第76-77页 |
5 结论 | 第77-78页 |
参考文献 | 第78-95页 |
缩写词 | 第95-96页 |
致谢 | 第96页 |