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农杆菌介导海藻糖合酶基因遗传转化甘蔗研究

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-11页
1 前言第11-39页
 1.1 植物抗旱分子生物学第11-24页
  1.1.1 植物对水分胁迫的分子应答第11-14页
   1.1.1.1 基因转录调控模型第11-12页
   1.1.1.2 干旱胁迫应答基因的表达第12页
   1.1.1.3 干旱诱导基因表达的作用第12页
   1.1.1.4 干旱诱导基因表达的调控第12-13页
   1.1.1.5 干旱胁迫信号的传导第13页
   1.1.1.6 干旱胁迫下信号传导途径有关编码因子的诱导表达第13-14页
   1.1.1.7 干旱胁迫信号感受第14页
  1.1.2 干旱胁迫下植物渗透调节物质的积累第14-17页
   1.1.2.1 脯氨酸的积累与植物的耐旱性第15页
   1.1.2.2 甘氨酸甜菜碱积累与植物的耐旱性第15-16页
   1.1.2.3 干旱胁迫下植物碳水化合物的代谢改变第16-17页
  1.1.3 植物抗旱基因工程第17-20页
   1.1.3.1 植物抗旱基因工程策略第17-18页
   1.1.3.2 植物抗旱基因工程进展第18-20页
  1.1.4 海藻糖的抗逆特性第20-24页
   1.1.4.1 海藻糖的理化特性第20页
   1.1.4.2 海藻糖的分布第20页
   1.1.4.3 海藻糖的生理功能第20-21页
   1.1.4.4 海藻糖保护原生质膜的可能机制第21页
   1.1.4.5 海藻糖的生物合成第21-22页
   1.1.4.6 海藻糖合成酶基因的遗传转化第22-24页
 1.2 农杆菌介导单子叶植物遗传转化的分子基础及进展第24-35页
  1.2.1 农杆菌介导单子叶植物遗传转化发展概述第24页
  1.2.2 农杆菌介导遗传转化的优点第24页
  1.2.3 农杆菌T-DNA介导转化的分子机制第24-31页
  1.2.4 单子叶植物农杆菌介导遗传转化的研究进展第31-32页
  1.2.5 影响单子叶植物农杆菌转化的因素第32-35页
   1.2.5.1 vir基因表达的诱导第32-33页
   1.2.5.2 选择分裂活跃的细胞作为受体材料第33-34页
   1.2.5.3 农杆菌菌株和质粒载体第34-35页
 1.3 甘蔗遗传转化研究进展第35-36页
 1.4 甘蔗抗旱育种第36-37页
 1.5 本研究的目的意义及内容第37-38页
 1.6 技术路线第38-39页
2 材料与方法第39-54页
 2.1 材料与试剂第39页
  2.1.1 质粒与菌株第39页
  2.1.2 植物受体材料第39页
  2.1.3 试剂第39页
 2.2 方法第39-54页
  2.2.1 植物表达载体构建第39-47页
  2.2.2 拟南芥干旱诱导启动子Prd29A的克隆第47页
  2.2.3 大肠杆菌海藻糖磷酸合酶基因的克隆第47-48页
  2.2.4 植物表达载体导入农杆菌第48-50页
  2.2.5 作基因功能鉴定的烟草转化试验第50页
  2.2.6 农杆菌介导甘蔗遗传转化第50-54页
   2.2.6.1 通过胚状体建立甘蔗再生体系第50-51页
   2.2.6.2 PPT浓度梯度筛选预试验第51页
   2.2.6.3 农杆菌介导甘蔗转化体系的建立第51-53页
   2.2.6.4 转化植株的分子检测第53-54页
3 结果与分析第54-70页
 3.1 植物表达载体构建第54-55页
 3.2 拟南芥干旱诱导启动子Prd29A的克隆第55-57页
 3.3 大肠杆菌海藻糖磷酸合酶基因的克隆第57-58页
 3.4 植物表达载体导入农杆菌第58-59页
 3.5 海藻糖合酶基因农杆菌介导转化烟草第59-61页
 3.6 农杆菌介导甘蔗遗传转化第61-70页
  3.6.1 甘蔗胚性愈伤组织的诱导及分化成苗第61-62页
  3.6.2 甘蔗对PPT的敏感性第62-63页
  3.6.3 不同龄期愈伤组织作为转化起始材料的试验第63-64页
  3.6.4 农杆菌菌液浓度和侵染时间第64-65页
  3.6.5 AS的使用第65页
  3.6.6 共培养时间第65页
  3.6.7 不同基因型甘蔗愈伤组织的转化第65-66页
  3.6.8 程序化的转化及筛选第66-67页
  3.6.9 抗性植株的获得第67-68页
  3.6.10 转化植株的分子检测第68-69页
  3.6.11 抗性植株的形态观察第69-70页
4 讨论第70-77页
 4.1 关于海藻糖合酶基因第70-71页
 4.2 关于启动子第71-72页
 4.3 关于选择标记第72页
 4.4 关于甘蔗农杆菌介导的遗传转化第72-73页
 4.5 关于农杆菌菌株EHA105第73-74页
 4.6 关于受体系统第74页
 4.7 Vir基因表达的诱导第74-75页
 4.8 分子检测第75-76页
 4.9 转化抗性植株的形态改变第76页
 4.10 关于工作的延续性和展望第76-77页
5 结论第77-78页
参考文献第78-95页
缩写词第95-96页
致谢第96页

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