中文摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
缩略词表 | 第9-11页 |
前言 | 第11-22页 |
1. 鼠疫疫苗的研究现状 | 第11-13页 |
·鼠疫流行概况 | 第11页 |
·传统鼠疫疫苗 | 第11-12页 |
·重组亚单位疫苗 | 第12页 |
·重组DNA疫苗 | 第12-13页 |
·结语 | 第13页 |
2. 黏膜疫苗的研究进展 | 第13-14页 |
3. 黏膜疫苗佐剂的研究进展 | 第14-19页 |
·蛋白体佐剂的研究进展 | 第15-18页 |
·PorB蛋白佐剂的研究进展 | 第18-19页 |
4. 鼻黏膜免疫研究进展 | 第19-22页 |
·鼻黏膜免疫机理 | 第19-20页 |
·鼻腔免疫与其它黏膜免疫途径比较 | 第20-22页 |
第一部分 蛋白体佐剂的制备 | 第22-29页 |
一、实验材料 | 第22-23页 |
·试剂 | 第22页 |
·菌种和实验动物 | 第22页 |
·仪器 | 第22-23页 |
·培养基和溶液 | 第23页 |
二、实验方法 | 第23-24页 |
·蛋白体的制备和纯化 | 第23页 |
·蛋白体组分鉴定 | 第23页 |
·蛋白体中LPS的检测 | 第23页 |
·核酸含量测定 | 第23-24页 |
·荚膜多糖的测定 | 第24页 |
·异常毒性试验 | 第24页 |
三、实验结果 | 第24-27页 |
·蛋白体的提纯结果 | 第24-25页 |
·蛋白体组分鉴定结果 | 第25-27页 |
·蛋白体中LPS的检测结果 | 第27页 |
·核酸含量测定结果 | 第27页 |
·荚膜多糖的测定结果 | 第27页 |
·异常毒性试验结果 | 第27页 |
四、讨论 | 第27-29页 |
第二部分 PorB重组蛋白佐剂的制备 | 第29-39页 |
一、实验材料 | 第29-30页 |
·菌株和质粒 | 第29页 |
·试剂 | 第29页 |
·主要仪器 | 第29-30页 |
二、实验方法 | 第30-35页 |
·PorB蛋白编码序列的获取 | 第30页 |
·porB-pGEM-T克隆载体的构建 | 第30-31页 |
·porB-pGEM-T克隆载体的转化 | 第31-32页 |
·porB-pGEM-T阳性克隆的鉴定 | 第32页 |
·porB-pET28a(+)重组质粒的构建 | 第32-33页 |
·PorB重组蛋白的表达 | 第33-34页 |
·PorB重组蛋白的纯化 | 第34页 |
·PorB重组蛋白的免疫印迹检测 | 第34-35页 |
三、实验结果 | 第35-37页 |
·脑膜炎双球菌porB基因扩增及鉴定 | 第35-36页 |
·PorB重组蛋白在大肠杆菌中的表达及纯化 | 第36页 |
·PorB重组蛋白的Western印迹鉴定 | 第36-37页 |
四、讨论 | 第37-39页 |
第三部分 不同成分黏膜佐剂的鼠疫F1-V融合蛋白疫苗滴鼻免疫Balb/c小鼠免疫应答效果的研究 | 第39-46页 |
一、实验材料 | 第39页 |
·试剂 | 第39页 |
·材料 | 第39页 |
·试验动物 | 第39页 |
·仪器 | 第39页 |
二、实验方法 | 第39-41页 |
·动物分组与免疫 | 第39页 |
·黏膜冲洗液的收集和淋巴细胞的制备 | 第39-40页 |
·ELISA检测小鼠血清抗体效价 | 第40页 |
·抗体亚型分类 | 第40页 |
·ELISA 检测呼吸道、消化道、生殖道特异性sIgA | 第40-41页 |
·T淋巴细胞亚群分类 | 第41页 |
三、实验结果 | 第41-43页 |
·不同佐剂的鼠疫F1-V融合重组蛋白抗原免疫Balb/c小鼠血清IgG的水平 | 第41页 |
·不同佐剂的鼠疫F1-V融合重组蛋白免疫Balb/c小鼠血清抗体亚型分析 | 第41-42页 |
·不同佐剂的鼠疫F1-V融合重组蛋白抗原免疫Balb/c小鼠呼吸道、消化道、 生殖道sIgA的水平 | 第42页 |
·不同佐剂的鼠疫F1-V融合重组蛋白免疫Balb/c小鼠淋巴细胞亚群的分析 | 第42-43页 |
四、讨论 | 第43-46页 |
结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-51页 |
附录 | 第51-53页 |
文献综述 | 第53-58页 |
个人简历 | 第58-59页 |
致谢 | 第59页 |