| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 引言 | 第9-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-25页 |
| ·低温保存技术的概述 | 第10-11页 |
| ·低温冷冻保存的方法 | 第11-15页 |
| ·慢速冻存法 | 第12页 |
| ·玻璃化保存法 | 第12-15页 |
| ·低温冷冻保护剂 | 第15-18页 |
| ·低温损伤机理及假说 | 第18-19页 |
| ·神经干细胞的低温保存 | 第19-22页 |
| ·神经干细胞概述 | 第19-20页 |
| ·低温保存神经干细胞及其需要解决的问题 | 第20-21页 |
| ·胶原蛋白的概述及其在低温保存中的应用 | 第21-22页 |
| ·神经干细胞的收集、培养 | 第22-23页 |
| ·神经干细胞的观察及其冻存后的鉴定 | 第23-24页 |
| ·低温保存前的细胞观察 | 第23-24页 |
| ·细胞复苏后的鉴定 | 第24页 |
| ·小结 | 第24-25页 |
| 2 神经干细胞的原代、传代培养 | 第25-38页 |
| ·概述 | 第25页 |
| ·实验材料 | 第25-30页 |
| ·实验药品及试剂 | 第25-27页 |
| ·实验动物 | 第27页 |
| ·实验装置 | 第27页 |
| ·实验试剂及其配制方法 | 第27-30页 |
| ·实验方法 | 第30-34页 |
| ·神经干细胞的原代，传代培养 | 第30-31页 |
| ·神经干细胞生长曲线的测定 | 第31-32页 |
| ·神经干细胞免疫组织化学鉴定 | 第32-34页 |
| ·结果与讨论 | 第34-38页 |
| ·神经干细胞的原代、传代培养 | 第34-35页 |
| ·神经干细胞的生长曲线 | 第35-36页 |
| ·神经干细胞的免疫组织化学鉴定 | 第36-38页 |
| 3 胶原包埋神经干细胞的冷冻保护剂渗透过程研究 | 第38-49页 |
| ·概述 | 第38页 |
| ·实验材料 | 第38-39页 |
| ·实验药品 | 第38-39页 |
| ·实验仪器 | 第39页 |
| ·实验方法 | 第39-43页 |
| ·胶原蛋白包埋神经干细胞方法 | 第39页 |
| ·渗透过程影响因素的级差分析 | 第39-40页 |
| ·实验条件初步筛选 | 第40-43页 |
| ·结果与讨论 | 第43-48页 |
| ·神经干细胞在胶原中的生长状态 | 第43页 |
| ·渗透过程的影响因素 | 第43-44页 |
| ·实验条件初步确定 | 第44-48页 |
| ·小结 | 第48-49页 |
| 4. 胶原包埋神经干细胞的慢速冻存 | 第49-66页 |
| ·概述 | 第49页 |
| ·实验材料 | 第49-50页 |
| ·实验仪器 | 第49页 |
| ·实验药品 | 第49-50页 |
| ·实验方法 | 第50-55页 |
| ·胶原酶的筛选 | 第50-51页 |
| ·细胞计数法 | 第51-52页 |
| ·神经干细胞的慢速冻存 | 第52-53页 |
| ·神经干细胞的复苏及活率计算 | 第53页 |
| ·复苏后细胞的生长状态 | 第53页 |
| ·复苏后细胞凋亡流式检测(AnnexinV/PI双标) | 第53-55页 |
| ·ATPase活力检测 | 第55页 |
| ·免疫组化检测 | 第55页 |
| ·结果与讨论 | 第55-65页 |
| ·细胞收获方法的优化 | 第55-58页 |
| ·神经干细胞的复苏 | 第58-60页 |
| ·复苏后细胞的生长状态 | 第60-61页 |
| ·复苏后神经干细胞凋亡流式检测 | 第61-62页 |
| ·复苏后细胞ATPase活力检测 | 第62-63页 |
| ·复苏后的神经干细胞免疫组化鉴定 | 第63-65页 |
| ·小结 | 第65-66页 |
| 结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-72页 |
| 附录A 英文缩略语 | 第72-73页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |