大肠杆菌中5-氨基酮戊酸合酶（ALAS）系列新型融合表达载体的构建、表达及纯化
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 文献综述 | 第9-14页 |
| 1 5-氨基酮戊酸的合成及生物学意义 | 第9页 |
| 2 5-氨基酮戊酸合酶研究进展 | 第9-12页 |
| 3 融合表达系统的研究进展 | 第12-14页 |
| 引言 | 第14-15页 |
| 1 实验研究意义 | 第14页 |
| 2 实验的研究内容 | 第14页 |
| 3 实验的技术路线 | 第14-15页 |
| 材料与方法 | 第15-29页 |
| 1 试验材料 | 第15页 |
| 2 仪器设备与试剂 | 第15页 |
| ·主要仪器设备 | 第15页 |
| ·主要试剂 | 第15页 |
| 3 方法 | 第15-29页 |
| ·酿酒酵母基因组DNA的提取 | 第15-16页 |
| ·hem1基因的PCR扩增 | 第16-17页 |
| ·表达载体的构建 | 第17-26页 |
| ·表达载体pET-HMA的构建 | 第17-23页 |
| ·表达载体pET-HGA的构建 | 第23-24页 |
| ·DHFR基因的PCR扩增 | 第24-25页 |
| ·表达载体pET-HDA的构建 | 第25-26页 |
| ·表达载体pET-HGA外源基因的诱导表达与纯化 | 第26-28页 |
| ·表达载体pET-HMA外源基因的诱导表达 | 第26页 |
| ·外源基因诱导表达产物的纯化 | 第26-27页 |
| ·外源基因所编码的融合蛋白的SDS-PAGE析 | 第27-28页 |
| ·表达载体pET-HGA外源基因的诱导表达与纯化 | 第28页 |
| ·表达载体pET-HDA外源基因的诱导表达与纯化 | 第28-29页 |
| 结果与分析 | 第29-35页 |
| 1 ALAS和DHFR基因的克隆 | 第29-30页 |
| 2 融合表达质粒的构建 | 第30-32页 |
| ·重组质粒pET-HMA的构建 | 第30-31页 |
| ·重组质粒pET-HGA的构建 | 第31页 |
| ·重组质粒pET-HDA的构建 | 第31-32页 |
| 3 融合表达蛋白的纯化与分析 | 第32-35页 |
| ·MBP/ALAS融合蛋白的表达和纯化分析 | 第32-33页 |
| ·GST/ALAS融合蛋白的表达和纯化分析 | 第33-34页 |
| ·DHFR/ALAS融合蛋白的表达和纯化分析 | 第34-35页 |
| 讨论 | 第35-38页 |
| 1.原核表达载体及可溶标签的选择 | 第35-36页 |
| ·-氨基酮戊酸合酶的原核表达和调控 | 第36-37页 |
| 3.不同可溶标签对表达5-氨基酮戊酸合酶的影响 | 第37-38页 |
| 结论 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 作者简介 | 第46-47页 |
| 附图 | 第47-50页 |
