| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-9页 |
| 一、前言 | 第9-16页 |
| ·HCMV背景简介 | 第9-12页 |
| ·HCMV的病毒学特征 | 第9-10页 |
| ·病毒的复制 | 第10-11页 |
| ·病毒感染的致病机理及治疗 | 第11-12页 |
| ·HCMV UL49基因研究现状 | 第12-15页 |
| ·课题意义 | 第15-16页 |
| 二、实验技术路线 | 第16-17页 |
| 三、实验仪器与材料 | 第17-25页 |
| ·主要实验仪器 | 第17-18页 |
| ·实验材料 | 第18-25页 |
| ·实验菌种、细胞和质粒 | 第18页 |
| ·实验主要试剂 | 第18-19页 |
| ·其他主要试剂的配制方法 | 第19-25页 |
| 四、实验方法 | 第25-42页 |
| ·HCMV UL49基因编码蛋白生物信息学分析 | 第25-26页 |
| ·HCMV UL49基因编码蛋白抗原性分析 | 第25页 |
| ·HCMV UL49基因编码蛋白跨膜区域分析 | 第25-26页 |
| ·原核表达载体pGEX-4T-3-UL49j质粒的构建 | 第26-32页 |
| ·UL49j基因片段cDNA序列的PCR扩增 | 第26-27页 |
| ·pGEX-4T-3质粒的扩增和抽提 | 第27-28页 |
| ·UL49j基因片段和pGEX-4T-3质粒的双酶切及连接 | 第28-29页 |
| ·大肠杆菌DH5α菌株超级感受态的制备 | 第29-30页 |
| ·UL49j基因片段和pGEX-4T-3质粒连接后的转化 | 第30-31页 |
| ·pGEX-4T-3-UL49j重组子的筛选与鉴定 | 第31-32页 |
| ·GST-pUL49j蛋白在BL_(21)(DE_3)中的诱导表达 | 第32-37页 |
| ·表达菌BL_(21)(DE_3)生长曲线的绘制 | 第32-33页 |
| ·表达菌BL_(21)(DE_3)的重组子转化 | 第32-33页 |
| ·绘制重组菌BL_(21)(DE_3)的生长曲线 | 第33页 |
| ·GST-pUL49j在重组菌中的诱导表达和分析 | 第33-36页 |
| ·IPTG诱导时间的筛选 | 第36页 |
| ·IPTG诱导浓度的选取 | 第36-37页 |
| ·GST-pUL49j蛋白的电洗脱纯化 | 第37-39页 |
| ·重组菌中GST-pUL49j蛋白可溶性分析 | 第37页 |
| ·GST-pUL49j包涵体的洗涤 | 第37-38页 |
| ·GST-pUL49j蛋白的SDS-PAGE切胶分离 | 第38页 |
| ·GST-pUL49j蛋白的电洗脱及超滤脱盐 | 第38-39页 |
| ·多克隆抗血清的制备和检测 | 第39-42页 |
| ·兔背部皮内多点免疫注射制备多克隆抗血清 | 第39-40页 |
| ·多克隆抗血清的检测 | 第40-42页 |
| ·ELISA检测抗血清效价 | 第40-41页 |
| ·Western Blot检测抗血清的特异性 | 第41-42页 |
| 五、结果与分析 | 第42-56页 |
| ·HCMV UL49基因序列的生物信息学分析 | 第42-43页 |
| ·HCMV UL49基因编码蛋白抗原性分析 | 第42页 |
| ·HCMV UL49基因编码蛋白跨膜区域分析 | 第42-43页 |
| ·原核表达载体pGEX-4T-3-UL49j质粒的构建 | 第43-46页 |
| ·GST-pUL49j蛋白在BL_(21)(DE_3)中的诱导表达 | 第46-50页 |
| ·大肠杆菌pGEX-4T-3-UL49jinBL_(21)(DE3)的生长曲线 | 第46-47页 |
| ·GST-pUL49j在重组菌中的诱导表达和分析 | 第47-48页 |
| ·IPTG诱导时间的筛选 | 第48-49页 |
| ·IPTG诱导浓度的选取 | 第49-50页 |
| ·GST-pUL49j蛋白的电洗脱纯化 | 第50-51页 |
| ·重组菌中GST-pUL49j蛋白可溶性分析 | 第50页 |
| ·GST-pUL49j蛋白的电洗脱纯化 | 第50-51页 |
| ·多克隆抗血清的制备和鉴定 | 第51-56页 |
| ·制备抗血清免疫蛋白GST-pUL49j的定量 | 第51-52页 |
| ·GST-pUL49j蛋白抗血清的制备及ELISA法测定抗血清的效价 | 第52-53页 |
| ·多克隆抗血清的特异性检测 | 第53-56页 |
| 六、讨论 | 第56-58页 |
| 七、小结 | 第58-59页 |
| 八、参考文献 | 第59-63页 |
| 九、附录 | 第63-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
