| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-16页 |
| 符号说明 | 第16-18页 |
| 第一章 综述 | 第18-46页 |
| 第一部分:蛋白质组学研究 | 第18-33页 |
| 一、蛋白质组学及其技术体系 | 第18-27页 |
| 1.蛋白质组与基因组-从基因组到蛋白质组的转变 | 第18页 |
| 2.蛋白质组学的研究内容 | 第18-19页 |
| 3.蛋白质组学研究技术 | 第19-27页 |
| ·蛋白质组研究中的样品制备技术 | 第20页 |
| ·蛋白质分离技术 | 第20-22页 |
| ·蛋白质定量分析 | 第22页 |
| ·蛋白质的鉴定 | 第22-24页 |
| ·蛋白质间的相互作用技术 | 第24-26页 |
| ·生物信息学分析 | 第26-27页 |
| 二、差异蛋白质组学 | 第27-30页 |
| 1.差异蛋白质组学的产生背景 | 第27-28页 |
| 2.差异蛋白质组学研究技术的进展 | 第28-30页 |
| ·蛋白质样品制备研究进展 | 第28页 |
| ·蛋白质的双向电泳研究进展 | 第28-29页 |
| ·蛋白质鉴定技术研究进展 | 第29-30页 |
| 三、昆虫差异蛋白质组学研究进展 | 第30-33页 |
| 1.免疫诱导蛋白质组 | 第30-32页 |
| 2.抗性相关蛋白质组 | 第32-33页 |
| 第二部分:先天免疫研究进展 | 第33-46页 |
| 一、无脊椎动物的先天免疫 | 第33-41页 |
| 1.先天免疫的非自身识别 | 第34页 |
| 2.先天免疫的信号转导 | 第34-36页 |
| 3.效应物系统 | 第36-41页 |
| 二、蝇类的先天免疫 | 第41-46页 |
| 1.细胞免疫 | 第42页 |
| 2.体液免疫 | 第42-45页 |
| ·蝇类抗菌肽 | 第42-43页 |
| ·凝集素 | 第43页 |
| ·丝氨酸蛋白酶 | 第43页 |
| ·酚氧化酶 | 第43-44页 |
| ·溶菌酶 | 第44页 |
| ·蝇蛆分泌物 | 第44-45页 |
| 3.研究目的及意义 | 第45-46页 |
| 第二章 家蝇幼虫血淋巴差异蛋白质组研究 | 第46-70页 |
| 一、前言 | 第46-48页 |
| 二、材料和方法 | 第48-55页 |
| 1.材料 | 第48-49页 |
| ·实验材料 | 第48页 |
| ·试剂和仪器 | 第48-49页 |
| 2.方法 | 第49-55页 |
| ·刺激家蝇幼虫 | 第49-50页 |
| ·蛋白样品制备 | 第50页 |
| ·Bradford法测定蛋白浓度 | 第50页 |
| ·SDS-PAGE | 第50页 |
| ·2-DE图谱的获得 | 第50-53页 |
| ·差异蛋白点的质谱鉴定 | 第53-54页 |
| ·RT-PCR | 第54-55页 |
| 三、结果 | 第55-65页 |
| 四、讨论 | 第65-70页 |
| 第三章 家蝇消减文库构建及差异表达基因鉴定 | 第70-84页 |
| 一、前言 | 第70页 |
| 二、材料和方法 | 第70-77页 |
| 1.材料和试剂 | 第70-71页 |
| ·材料 | 第70页 |
| ·试剂 | 第70-71页 |
| 2.方法 | 第71-77页 |
| ·诱导与非诱导家蝇幼虫总RNA提取与检测 | 第71页 |
| ·逆转录mRNA | 第71-72页 |
| ·cDNA消减文库构建 | 第72-76页 |
| ·扩增产物克隆 | 第76-77页 |
| ·测序及序列分析 | 第77页 |
| 三、结果 | 第77-81页 |
| 1.双链cDNA琼脂糖凝胶电泳 | 第77页 |
| 2.抑制性消减杂交结果 | 第77-79页 |
| 3.SSH文库筛选与差异表达基因鉴定 | 第79-81页 |
| 四、讨论 | 第81-84页 |
| 1.SSH技术的优缺点 | 第81页 |
| 2.测序结果讨论 | 第81-84页 |
| 第四章 铜/锌超氧化物歧化酶基因的克隆、重组表达及性质研究 | 第84-107页 |
| 一、前言 | 第84-85页 |
| 二、材料和方法 | 第85-97页 |
| 1.材料 | 第85-86页 |
| ·实验材料 | 第85页 |
| ·菌株和载体 | 第85-86页 |
| ·试剂和仪器 | 第86页 |
| 2.方法 | 第86-97页 |
| ·RNA提取 | 第86-87页 |
| ·cDNA合成 | 第87页 |
| ·SOD基因扩增与克隆 | 第87-90页 |
| ·序列分析 | 第90-91页 |
| ·RT-PCR | 第91页 |
| ·重组表达、蛋白纯化及抗体制备 | 第91-97页 |
| ·蛋白活性检测 | 第97页 |
| 三、结果 | 第97-105页 |
| 1.基因克隆 | 第97页 |
| 2.序列分析 | 第97-98页 |
| 3.序列比对 | 第98页 |
| 4.RT-PCR分析 | 第98-102页 |
| 5.重组表达及蛋白纯化 | 第102-103页 |
| 6.Western blot分析 | 第103-104页 |
| 7.蛋白活性检测 | 第104-105页 |
| 四、讨论 | 第105-107页 |
| 第五章 泛素的表达模式及重组表达研究 | 第107-117页 |
| 一、前言 | 第107-108页 |
| 二、材料和方法 | 第108-113页 |
| 1.材料 | 第108-109页 |
| ·实验材料 | 第108页 |
| ·菌株和载体 | 第108-109页 |
| 2.方法 | 第109-113页 |
| ·RNA提取 | 第109页 |
| ·cDNA合成 | 第109页 |
| ·RT-PCR | 第109页 |
| ·Mub_(S27)的重组表达和蛋白纯化 | 第109-113页 |
| 三、结果 | 第113-115页 |
| 1.RT-PCR | 第113页 |
| 2.重组蛋白pET-30a(+)-Mub_(S27)的诱导表达和蛋白纯化 | 第113-115页 |
| 四、讨论 | 第115-117页 |
| 论文总结 | 第117-118页 |
| 参考文献 | 第118-128页 |
| 致谢 | 第128-129页 |
| 已发表和写作中的论文 | 第129-130页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第130-131页 |
| 附发表文章 | 第131-159页 |