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瓜蒌(Trichosanthes kirilowii)等中草药纤溶酶的筛选、分离纯化与cDNA克隆

摘要第1-6页
Abstract第6-12页
引言第12-15页
第1章 文献综述第15-29页
   ·溶栓药物的研究进展第15-21页
     ·血栓性疾病第15页
     ·临床应用的主要溶栓药物第15-16页
     ·溶栓药物的研究进展第16-19页
     ·植物源溶栓药物的研究进展第19-21页
   ·纤溶酶的性质及作用机制第21-26页
     ·丝氨酸蛋白酶的分类及其作用机制第21-23页
     ·植物丝氨酸蛋白酶的研究进展第23-26页
   ·溶栓活性体外检测方法第26-29页
     ·纤维蛋白平板法第26页
     ·发色底物法第26页
     ·酶联纤维蛋白溶解法第26-27页
     ·凝块溶解时间法第27页
     ·BAEE底物法第27页
     ·纤维蛋白自显影法和纤维蛋白-聚丙烯酰胺电泳法(Fibrin-PAGE)第27-29页
第2章 活血化淤中草药纤溶酶的筛选与鉴定第29-36页
   ·材料与方法第29-31页
     ·材料第29-30页
     ·试剂第30页
     ·仪器第30页
     ·方法第30-31页
   ·结果与分析第31-35页
     ·活血化淤中草药纤溶酶的筛选第31-32页
     ·具有纤溶酶活性的中草药蛋白质含量第32-34页
     ·蛋白质提取物比活力的计算第34-35页
   ·讨论第35-36页
第3章 牛膝与稀莶草纤溶酶的离子交换分离第36-47页
   ·材料与方法第36-38页
     ·材料第36页
     ·溶液第36-37页
     ·仪器第37页
     ·方法第37-38页
   ·结果与分析第38-45页
     ·中草药样品的脱色素处理第38页
     ·离子交换缓冲液pH的确定第38-39页
     ·DEAE-Sepharose离子交换分离纯化蛋白第39-45页
   ·讨论第45-47页
第4章 益母草纤溶酶的亲和层析分离第47-54页
   ·材料与方法第47-49页
     ·材料第47页
     ·试剂第47-48页
     ·溶液第48页
     ·仪器第48页
     ·方法第48-49页
   ·结果与分析第49-53页
     ·蛋白酶抑制剂对益母草纤溶酶提取物的影响第49-51页
     ·苯甲脒偶联树脂最佳浓度的确定第51-52页
     ·益母草纤溶酶纯化分析第52-53页
   ·讨论第53-54页
第5章 瓜蒌纤溶酶的部分酶学性质的研究第54-66页
   ·材料与方法第54-56页
     ·材料第54页
     ·试剂第54页
     ·方法第54-56页
   ·结果与分析第56-64页
     ·蛋白酶抑制剂对瓜蒌纤溶酶提取物活性的抑制作用第56-57页
     ·瓜蒌纤溶酶提取物胰蛋白酶的活性测定第57页
     ·瓜蒌纤溶酶提取物对牛血红蛋白的水解第57-58页
     ·瓜蒌纤溶酶提取物对牛血清白蛋白的水解作用第58-59页
     ·瓜蒌纤溶酶提取物对人免疫球蛋白G的水解作用第59-60页
     ·瓜蒌纤溶酶提取物对纤维蛋白原的水解作用第60-62页
     ·瓜蒌纤溶酶提取物对纤维蛋白的水解作用第62页
     ·温度对瓜蒌纤溶酶提取物稳定性的影响第62-63页
     ·pH对瓜蒌纤溶酶提取物稳定性的影响第63-64页
     ·瓜蒌纤溶酶提取物激酶活性的检测第64页
   ·讨论第64-66页
第6章 瓜蒌纤溶酶的分离纯化第66-104页
   ·材料与方法第66-70页
     ·材料第66页
     ·试剂第66-67页
     ·大豆胰蛋白酶抑制剂的活性测定第67页
     ·瓜蒌粗提物的制备第67页
     ·鲜瓜蒌粗提物的制备第67-68页
     ·亲和层析分离瓜蒌纤溶酶的粗提物第68页
     ·反相层析分离瓜蒌纤溶蛋白第68页
     ·瓜蒌纤溶酶的离子交换分离第68-69页
     ·Sephacryl S-100分离瓜蒌酶第69页
     ·制备电泳分离瓜蒌纤溶酶第69页
     ·酸性电泳检测瓜蒌纤溶酶第69页
     ·纯化蛋白质的分析第69页
     ·等电聚焦电泳测定纯化的瓜蒌纤溶酶第69-70页
   ·结果与分析第70-102页
     ·纤溶酶活性测定第70页
     ·瓜蒌纤溶酶的亲和层析第70-73页
     ·反相层析分离瓜蒌纤溶酶第73-74页
     ·DEAE-Sepharose离子交换平衡缓冲液pH的确定第74-102页
     ·等电点的测定第102页
   ·讨论第102-104页
第7章 瓜蒌纤溶酶的基因克隆及序列分析第104-115页
   ·材料与方法第104-106页
     ·材料第104页
     ·试剂第104页
     ·仪器第104-105页
     ·方法第105-106页
   ·结果与分析第106-114页
     ·瓜蒌纤溶酶兼并引物的设计第106-111页
     ·瓜蒌果实总RNA的提取及检测第111页
     ·瓜蒌蛋白酶cDNA的克隆和测序第111-114页
   ·讨论第114-115页
结论第115-116页
参考文献第116-123页
在读期间发表的学术论文第123-124页
个人简历第124-125页
致谢第125-126页
附录第126-140页

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