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飞蝗谷胱甘肽硫转移酶基因克隆及特性研究

中文摘要第1-12页
ABSTRACT第12-14页
第一章 前言第14-20页
   ·飞蝗概述第14-15页
     ·飞蝗分布、特征及生活习性第14页
     ·飞蝗的为害与防治第14-15页
   ·谷胱甘肽硫转移酶概述第15-18页
     ·谷胱甘肽硫转移酶的分类及命名第15-16页
     ·谷胱甘肽硫转移酶组织分布及发育期变化规律第16页
     ·谷胱甘肽硫转移酶的结构和功能第16-17页
     ·谷胱甘肽硫转移酶与昆虫抗药性的关系第17-18页
   ·研究内容及目的意义第18-20页
第二章 飞蝗谷胱甘肽硫转移酶基因克隆第20-30页
   ·研究材料第20页
     ·供试昆虫第20页
     ·供试试剂第20页
     ·主要仪器第20页
   ·研究方法第20-25页
     ·序列来源及引物设计第20-21页
     ·总RNA的抽提、纯化和mRNA的分离第21-22页
       ·RNA的抽提第21-22页
       ·RNA的纯化第22页
       ·mRNA的分离第22页
     ·LmGST基因5'末端cDNA和3'末端cDNA序列的扩增第22-23页
     ·RACE PCR扩增产物的回收纯化第23页
     ·LmGST cDNA基因的克隆和测序第23-24页
     ·全长序列的验证第24-25页
     ·序列分析和聚类分析第25页
   ·结果与分析第25-28页
     ·飞蝗谷胱甘肽硫转移酶cDNA全长序列的获得第25-26页
     ·飞蝗谷胱甘肽硫转移酶的聚类分析第26页
     ·飞蝗谷胱甘肽硫转移酶氨基酸序列的比对及分析第26-28页
   ·讨论第28-30页
第三章 飞蝗谷胱甘肽硫转移酶分子特性研究第30-38页
   ·研究材料第30页
     ·供试昆虫第30页
     ·供试试剂第30页
     ·主要仪器第30页
   ·研究方法第30-33页
     ·飞蝗谷胱甘肽硫转移酶基因在不同发育阶段的表达第30-32页
       ·实验材料的准备第30页
       ·总RNA的抽提、纯化和合成cDNA第一链第30-31页
       ·LmGST在不同发育阶段的表达第31-32页
     ·飞蝗谷胱甘肽硫转移酶基因在不同组织部位的表达第32页
       ·实验材料的准备第32页
       ·总RNA的抽提、纯化和合成cDNA第一链第32页
       ·LmGST在不同组织部位的表达第32页
     ·溴氰菊酯对飞蝗谷胱甘肽硫转移酶基因表达的影响第32-33页
       ·实验材料的准镉第32页
       ·总RNA的抽提、纯化和合成cDNA第一链第32页
       ·溴氰菊酯对LmGST表达的影响第32-33页
       ·统计学分析第33页
   ·结果与分析第33-35页
     ·谷胱甘肽硫转移酶基因在飞蝗不同发育阶段的表达分析第33页
     ·谷胱甘肽硫转移酶基因在飞蝗不同组织部位的表达分析第33-34页
     ·溴氰菊酯对飞蝗谷胱甘肽硫转移酶基因表达的影响第34-35页
   ·讨论第35-38页
第四章 飞蝗谷胱甘肽硫转移酶基因原核表达及特性分析第38-48页
   ·研究材料第38-39页
     ·供试材料第38页
     ·供试试剂第38页
     ·主要仪器第38-39页
   ·研究方法第39-41页
     ·重组质粒的构建第39-40页
     ·重组蛋白的诱导表达第40页
     ·重组蛋白的纯化第40页
     ·LmGST活性及蛋白含量的测定第40页
     ·重组蛋白LmGST特性研究第40-41页
       ·温度及pH对重组蛋白LmGST的影响第40-41页
       ·重组蛋白LmGST动力学参数V_(max)和K_m的测定第41页
     ·抑制剂和杀虫剂对重组蛋白LmGST的影响第41页
   ·结果与分析第41-46页
     ·LmGST的表达及纯化第41-43页
     ·LmGST的特性分析第43-45页
     ·抑制剂和杀虫剂对LmGST的影响第45-46页
   ·讨论第46-48页
全文总结第48-50页
参考文献第50-58页
攻读学位期间取得的研究成果第58-59页
致谢第59-60页
个人简况及联系方式第60-62页

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