| 中文摘要 | 第1-12页 |
| ABSTRACT | 第12-14页 |
| 第一章 前言 | 第14-22页 |
| ·飞蝗简介及其防治现状 | 第14-15页 |
| ·昆虫体壁结构与蜕皮 | 第15-16页 |
| ·几丁质与几丁质酶 | 第16-19页 |
| ·RNA干扰及其在昆虫中的应用 | 第19-21页 |
| ·研究内容与意义 | 第21-22页 |
| 第二章 飞蝗几丁质酶家族基因的鉴定及表达特性分析 | 第22-30页 |
| ·材料与试剂 | 第22-23页 |
| ·实验昆虫 | 第22页 |
| ·试剂与主要仪器 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-24页 |
| ·飞蝗几丁质酶基因片段的获得与表达引物设计 | 第23页 |
| ·飞蝗7个几丁质酶基因的时空表达研究 | 第23-24页 |
| ·不同组织部位cDNA模板制备 | 第23页 |
| ·不同发育阶段cDNA模板制备 | 第23页 |
| ·飞蝗几丁质酶基因的时空表达分析 | 第23-24页 |
| ·结果与分析 | 第24-27页 |
| ·飞蝗EST数据库搜索结果及序列分析 | 第24-25页 |
| ·飞蝗7个几丁质酶基因的时空表达 | 第25-27页 |
| ·讨论 | 第27-30页 |
| 第三章 飞蝗几丁质酶基因LmCht10的特性研究 | 第30-42页 |
| ·材料与试剂 | 第30页 |
| ·实验材料 | 第30页 |
| ·试剂与仪器 | 第30页 |
| ·实验方法 | 第30-33页 |
| ·飞蝗几丁质酶基因LmCht10 cDNA序列的获得 | 第31-32页 |
| ·表皮总RNA的提取及纯化 | 第31页 |
| ·RACE cDNA模板的合成 | 第31页 |
| ·扩增几丁质酶基因LmCht10 cDNA的引物设计 | 第31页 |
| ·几丁质酶基因LmCht10 cDNA的扩增 | 第31-32页 |
| ·目标片段测序 | 第32页 |
| ·序列分析 | 第32页 |
| ·序列拼接与验证 | 第32页 |
| ·LmCht10结构域分析及聚类树的构建 | 第32-33页 |
| ·几丁质酶基因LmCht10在5龄飞蝗的时空表达特性 | 第33页 |
| ·5龄不同天数飞蝗cDNA模板制备及差异表达分析 | 第33页 |
| ·飞蝗5龄第6天不同组织部位cDNA模板制备及差异表达检测 | 第33页 |
| ·结果与分析 | 第33-39页 |
| ·几丁质酶基因LmCht10 cDNA片段的扩增及拼接 | 第33-34页 |
| ·几丁质酶基因LmCht10的氨基酸序列分析 | 第34-36页 |
| ·几丁质酶LmCht10的聚类分析 | 第36-38页 |
| ·几丁质酶基因LmCht10在5龄飞蝗的时空表达特性分析 | 第38-39页 |
| ·讨论 | 第39-42页 |
| 第四章 飞蝗几丁质酶基因LmCht10的生物学功能研究 | 第42-50页 |
| ·材料与试剂 | 第42页 |
| ·实验材料 | 第42页 |
| ·试剂与仪器 | 第42页 |
| ·实验方法 | 第42-44页 |
| ·LmCht10 dsRNA的体外合成 | 第42-43页 |
| ·LmCht10 dsRNA引物设计 | 第42-43页 |
| ·cDNA模板的合成 | 第43页 |
| ·dsRNA的体外合成 | 第43页 |
| ·dsRNA的注射与观察 | 第43页 |
| ·同一基因不同位置合成dsRNA的沉默效率检测 | 第43页 |
| ·飞蝗不同龄期dsLmCht10-2的干扰研究 | 第43页 |
| ·LmCht10的沉默效率检测 | 第43-44页 |
| ·结果与分析 | 第44-48页 |
| ·dsRNA引物序列 | 第44页 |
| ·飞蝗几丁质酶基因LmCht10的RNAi | 第44-48页 |
| ·同一基因不同位置合成dsRNA的沉默效率检测 | 第44-46页 |
| ·飞蝗不同龄期的RNA干扰结果 | 第46-48页 |
| ·讨论 | 第48-50页 |
| 第五章 RNAi介导的转基因抗虫作物研究 | 第50-56页 |
| ·材料与试剂 | 第50页 |
| ·供试玉米 | 第50页 |
| ·试剂与仪器 | 第50页 |
| ·实验方法 | 第50-52页 |
| ·重组质粒的构建 | 第50-51页 |
| ·引物设计 | 第50-51页 |
| ·pBI121-dsLmCht10-2构建 | 第51页 |
| ·转基因玉米培育 | 第51-52页 |
| ·转基因玉米检测 | 第52页 |
| ·转基因玉米总DNA提取 | 第52页 |
| ·目的片段检测 | 第52页 |
| ·结果与分析 | 第52-55页 |
| ·引物序列 | 第52-53页 |
| ·构建重组质粒 | 第53页 |
| ·第一代转基因玉米的获得 | 第53页 |
| ·转基因玉米检测 | 第53-55页 |
| ·转基因玉米总DNA提取 | 第53-54页 |
| ·目的片段检测 | 第54-55页 |
| ·讨论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-64页 |
| 硕士期间研究成果 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 个人简况及联系方式 | 第66-68页 |
