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HIV-1病毒样颗粒疫苗临床前期的实验研究

提要第1-9页
第一部分 前言第9-28页
 第一章 艾滋病的研究现状第9-21页
  一、HIV病毒概述第9-12页
   1. HIV流行情况第9页
   2. HIV病毒的分型第9-10页
   3. HIV-1 的分子生物学第10-12页
  二、HIV-1 疫苗可行性研究及构建策略与形式第12-18页
   1. HIV-1 疫苗的可行性第12-13页
   2. HIV-1 疫苗的构建策略第13-16页
   3. HIV-1 疫苗的几种不同形式第16-18页
  三、艾滋病疫苗研发的思路和免疫策略第18-21页
 第二章 HIV-1 病毒样颗粒疫苗的研究进展第21-28页
  一、HIV-1VLP的形成机制及其两种主要形式第21-24页
  二、HIV-1 VLP疫苗及其研究进展情况第24-28页
第二部分 材料与方法第28-53页
 第一章 实验材料第28-30页
 第二章 实验仪器第30-31页
 第三章 常用试剂配制第31-35页
 第四章 实验方法第35-53页
  一、共转染及稳定细胞系的筛选第35页
  二、聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第35-36页
  三、Western Blot第36-37页
  四、VLP的分离提纯第37页
  五、VLP分泌高峰的确定第37页
  六、细胞冻存与复苏第37-38页
  七、电镜照片的制作第38页
  八、免疫小鼠第38-39页
  九、血清中抗体水平检测第39页
  十、细胞免疫水平检测第39-42页
  十一、中和抗体检测试验第42-44页
  十二、病毒样颗粒的定量第44页
  十三、病毒样颗粒的鉴定第44-45页
  十四、宿主DNA残余量检测第45-46页
  十五、内毒素检测方法第46-47页
  十六、无菌试验第47页
  十七、异常毒性试验第47-48页
  十八、注射用VLP全身主动过敏试验第48-49页
  十九、注射用VLP被动皮肤过敏试验第49-50页
  二十、注射用VLP溶血性试验第50-52页
  二十一、皮下注射刺激性试验第52-53页
第三部分 结果与讨论第53-88页
 第一章 HIV-1 病毒样颗粒疫苗的构建第53-65页
  一、共转染及稳定细胞系的筛选第53-55页
  二、上清中分泌VLP的确定第55页
  三、上清中VLP的分泌高峰的确定第55-56页
  四、上清中VLP的分离提纯第56-61页
  五、ELISA法检测Gag和Env的包装比率第61-62页
  六、HIV-1VLP的形态学观察第62-63页
  七、细胞传代稳定性第63-64页
  小结第64-65页
 第二章 病毒样颗粒疫苗免疫原性研究第65-76页
  一、体液免疫结果第65-66页
  二、细胞免疫结果第66-69页
   1. CTL结果第66-68页
   2. ELISPOT实验第68-69页
  三、中和抗体检测结果第69-75页
   1、假病毒的制备第71-72页
   2、假病毒的感染性检测分析第72-73页
   3、HIV-1 VLP免疫鼠抗血清对假病毒的中和效果评价第73-75页
  小结第75-76页
 第三章 HIV-1 病毒性颗粒疫苗质量检测第76-81页
  一、病毒样颗粒的定量第76页
  二、病毒样颗粒的鉴定第76-77页
  三、宿主DNA残余量检测第77页
  四、内毒素检测方法第77页
  五、无菌检查法第77-78页
  六、异常毒性试验第78-80页
  小结第80-81页
 第四章 HIV-1 病毒性颗粒疫苗初步安全性评价第81-88页
  一、注射用VLP全身主动过敏试验第81-82页
  二、注射用VLP被动皮肤过敏试验第82-83页
  三、注射用VLP溶血性试验第83-85页
  四、注射刺激性试验第85-87页
  小结第87-88页
结论第88-89页
参考文献第89-98页
致谢第98-99页
中文摘要第99-103页
英文摘要第103-107页
作者简历第107页

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