提要 | 第1-9页 |
第一部分 前言 | 第9-28页 |
第一章 艾滋病的研究现状 | 第9-21页 |
一、HIV病毒概述 | 第9-12页 |
1. HIV流行情况 | 第9页 |
2. HIV病毒的分型 | 第9-10页 |
3. HIV-1 的分子生物学 | 第10-12页 |
二、HIV-1 疫苗可行性研究及构建策略与形式 | 第12-18页 |
1. HIV-1 疫苗的可行性 | 第12-13页 |
2. HIV-1 疫苗的构建策略 | 第13-16页 |
3. HIV-1 疫苗的几种不同形式 | 第16-18页 |
三、艾滋病疫苗研发的思路和免疫策略 | 第18-21页 |
第二章 HIV-1 病毒样颗粒疫苗的研究进展 | 第21-28页 |
一、HIV-1VLP的形成机制及其两种主要形式 | 第21-24页 |
二、HIV-1 VLP疫苗及其研究进展情况 | 第24-28页 |
第二部分 材料与方法 | 第28-53页 |
第一章 实验材料 | 第28-30页 |
第二章 实验仪器 | 第30-31页 |
第三章 常用试剂配制 | 第31-35页 |
第四章 实验方法 | 第35-53页 |
一、共转染及稳定细胞系的筛选 | 第35页 |
二、聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第35-36页 |
三、Western Blot | 第36-37页 |
四、VLP的分离提纯 | 第37页 |
五、VLP分泌高峰的确定 | 第37页 |
六、细胞冻存与复苏 | 第37-38页 |
七、电镜照片的制作 | 第38页 |
八、免疫小鼠 | 第38-39页 |
九、血清中抗体水平检测 | 第39页 |
十、细胞免疫水平检测 | 第39-42页 |
十一、中和抗体检测试验 | 第42-44页 |
十二、病毒样颗粒的定量 | 第44页 |
十三、病毒样颗粒的鉴定 | 第44-45页 |
十四、宿主DNA残余量检测 | 第45-46页 |
十五、内毒素检测方法 | 第46-47页 |
十六、无菌试验 | 第47页 |
十七、异常毒性试验 | 第47-48页 |
十八、注射用VLP全身主动过敏试验 | 第48-49页 |
十九、注射用VLP被动皮肤过敏试验 | 第49-50页 |
二十、注射用VLP溶血性试验 | 第50-52页 |
二十一、皮下注射刺激性试验 | 第52-53页 |
第三部分 结果与讨论 | 第53-88页 |
第一章 HIV-1 病毒样颗粒疫苗的构建 | 第53-65页 |
一、共转染及稳定细胞系的筛选 | 第53-55页 |
二、上清中分泌VLP的确定 | 第55页 |
三、上清中VLP的分泌高峰的确定 | 第55-56页 |
四、上清中VLP的分离提纯 | 第56-61页 |
五、ELISA法检测Gag和Env的包装比率 | 第61-62页 |
六、HIV-1VLP的形态学观察 | 第62-63页 |
七、细胞传代稳定性 | 第63-64页 |
小结 | 第64-65页 |
第二章 病毒样颗粒疫苗免疫原性研究 | 第65-76页 |
一、体液免疫结果 | 第65-66页 |
二、细胞免疫结果 | 第66-69页 |
1. CTL结果 | 第66-68页 |
2. ELISPOT实验 | 第68-69页 |
三、中和抗体检测结果 | 第69-75页 |
1、假病毒的制备 | 第71-72页 |
2、假病毒的感染性检测分析 | 第72-73页 |
3、HIV-1 VLP免疫鼠抗血清对假病毒的中和效果评价 | 第73-75页 |
小结 | 第75-76页 |
第三章 HIV-1 病毒性颗粒疫苗质量检测 | 第76-81页 |
一、病毒样颗粒的定量 | 第76页 |
二、病毒样颗粒的鉴定 | 第76-77页 |
三、宿主DNA残余量检测 | 第77页 |
四、内毒素检测方法 | 第77页 |
五、无菌检查法 | 第77-78页 |
六、异常毒性试验 | 第78-80页 |
小结 | 第80-81页 |
第四章 HIV-1 病毒性颗粒疫苗初步安全性评价 | 第81-88页 |
一、注射用VLP全身主动过敏试验 | 第81-82页 |
二、注射用VLP被动皮肤过敏试验 | 第82-83页 |
三、注射用VLP溶血性试验 | 第83-85页 |
四、注射刺激性试验 | 第85-87页 |
小结 | 第87-88页 |
结论 | 第88-89页 |
参考文献 | 第89-98页 |
致谢 | 第98-99页 |
中文摘要 | 第99-103页 |
英文摘要 | 第103-107页 |
作者简历 | 第107页 |