甜菜谷氨酰胺合成酶基因的克隆
| 中文摘要 | 第1-3页 |
| Abstract | 第3-7页 |
| 第1章 绪论 | 第7-19页 |
| ·课题背景 | 第7-8页 |
| ·植物GS同工酶的分布 | 第8-9页 |
| ·植物GS的表达调控研究现状 | 第9-12页 |
| ·植物GS基因的研究进展 | 第12-14页 |
| ·已知基因的序列克隆技术 | 第14-16页 |
| ·本课题研究的目的和意义 | 第16-19页 |
| 第2章 实验材料和实验设计思路 | 第19-25页 |
| ·实验材料 | 第19-24页 |
| ·甜菜材料 | 第19页 |
| ·引物材料 | 第19-20页 |
| ·主要仪器 | 第20-21页 |
| ·溶液配制 | 第21-24页 |
| ·实验设计思路 | 第24-25页 |
| ·甜菜全长GS1基因克隆的实验设计方法 | 第24页 |
| ·甜菜GS1cDNA克隆的实验方案 | 第24-25页 |
| 第3章 甜菜GS1基因的克隆 | 第25-42页 |
| ·甜菜基因组DNA的提取及检测 | 第25-27页 |
| ·基因组DNA的提取流程 | 第25-26页 |
| ·基因组DNA的电泳检测 | 第26页 |
| ·基因组DNA的浓度测定及调整 | 第26-27页 |
| ·PCR引物的设计 | 第27-29页 |
| ·引物设计的原则和技巧 | 第27-28页 |
| ·本实验中引物设计方法 | 第28-29页 |
| ·各个目的DNA片段的获得 | 第29-34页 |
| ·5kb目的DNA片段的获得 | 第29-32页 |
| ·其它三个目的片段的获得 | 第32-34页 |
| ·PCR产物的回收 | 第34-36页 |
| ·平末端DNA片段的加A反应 | 第36页 |
| ·A末端DNA片段的连接、转化实验 | 第36-37页 |
| ·阳性重组子的筛选及鉴定 | 第37-41页 |
| ·阳性重组子的蓝白筛选 | 第37-38页 |
| ·阳性重组子的PCR验证 | 第38-39页 |
| ·测序 | 第39-41页 |
| ·GS1基因序列的验证 | 第41-42页 |
| 第4章 甜菜GS1cDNA的克隆 | 第42-47页 |
| ·甜菜总RNA的提取 | 第42-43页 |
| ·RNA提取前的准备工作 | 第42页 |
| ·RNA的提取流程 | 第42-43页 |
| ·甜菜总RNA的电泳检测 | 第43页 |
| ·RT-PCR反应 | 第43-45页 |
| ·反转录反应 | 第43-44页 |
| ·PCR反应 | 第44-45页 |
| ·RT-PCR反应结果 | 第45页 |
| ·阳性克隆子的验证结果 | 第45-47页 |
| 第5章 测序结果与分析 | 第47-53页 |
| ·GSI基因的测序结果 | 第47-48页 |
| ·GS1cDNA的测序结果 | 第48-49页 |
| ·测序结果分析 | 第49-53页 |
| ·GS1基因拼接结果及分析 | 第49-50页 |
| ·GS1cDNA测序结果与分析 | 第50-53页 |
| 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-62页 |
| 附录1 | 第62-69页 |
| 附录2 | 第69-71页 |
| 附录3 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
