| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-28页 |
| ·基因工程概述 | 第11页 |
| ·大肠杆菌的表达策略 | 第11-12页 |
| ·包涵体蛋白的制备和溶解 | 第12页 |
| ·蛋白折叠液相色谱法(Protein folding liquid chromatography,PFLC) | 第12-18页 |
| ·PFLC法概述 | 第12-14页 |
| ·SEC法 | 第14-15页 |
| ·HIC法 | 第15页 |
| ·IEC法 | 第15-16页 |
| ·AFC法 | 第16-17页 |
| ·色谱饼在蛋白质复性并同时纯化上的应用 | 第17页 |
| ·新型色谱技术 | 第17-18页 |
| ·肾素受体(RnR)概述 | 第18-20页 |
| ·RnR简介 | 第18-19页 |
| ·RnR的生理学和病理学功能 | 第19-20页 |
| ·RnR的表达及纯化情况 | 第20页 |
| ·本实验的研究工作 | 第20-21页 |
| 参考文献 | 第21-28页 |
| 第二章 rhRnR在E.coli中的高效表达及包涵体的溶解 | 第28-39页 |
| ·前言 | 第28页 |
| ·实验仪器和材料 | 第28-30页 |
| ·仪器 | 第28-29页 |
| ·实验试剂 | 第29-30页 |
| ·试剂的配制 | 第30-32页 |
| ·发酵试剂的配制 | 第30-31页 |
| ·rhRnR菌体洗涤液组成 | 第31页 |
| ·rhRnR包涵体洗涤液组成 | 第31页 |
| ·7.0mol/L GuHCI溶液组成 | 第31页 |
| ·8.0mol/L urea溶液组成 | 第31页 |
| ·样品缓冲液组成 | 第31-32页 |
| ·实验过程 | 第32-34页 |
| ·菌种的培养 | 第32-33页 |
| ·rhRnR菌体的回收 | 第33页 |
| ·rhRnR包涵体制备 | 第33页 |
| ·rhRnR包涵体的溶解 | 第33页 |
| ·15%SDS-PAGE电泳的操作 | 第33页 |
| ·rhRnR的疏水色谱饼复性并同时纯化 | 第33-34页 |
| ·蛋白质纯度的测定 | 第34页 |
| ·蛋白质含量的测定 | 第34页 |
| ·实验结果与讨论 | 第34-37页 |
| ·rhRnR在大肠杆菌中的表达 | 第34-36页 |
| ·不同变性剂对rhRnR溶解及复性的影响 | 第36-37页 |
| ·本章小结 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-39页 |
| 第三章 HPIEC法复性并同时纯化rhRnR | 第39-55页 |
| ·前言 | 第39-40页 |
| ·实验仪器和试剂 | 第40-42页 |
| ·仪器 | 第40-41页 |
| ·试剂 | 第41-42页 |
| ·实验方法 | 第42-43页 |
| ·色谱条件 | 第42页 |
| ·色谱过程 | 第42-43页 |
| ·15%SDS-PAGE电泳的操作 | 第43页 |
| ·蛋白质纯度的测定 | 第43页 |
| ·蛋白质含量的测定 | 第43页 |
| ·实验结果与讨论 | 第43-50页 |
| ·HPIEC流动相中的脲浓度对rhRnR复性及同时纯化效果的影响 | 第43-44页 |
| ·HPIEC流动相的pH值对rhRnR复性及同时纯化的影响 | 第44-46页 |
| ·进样量对rhRnR复性并同时纯化效果的影响 | 第46-47页 |
| ·HPSEC法对rhRnR的脱盐处理 | 第47-48页 |
| ·HPSEC的流动相流速对rhRnR除盐效果的影响 | 第48页 |
| ·变性液中添加去垢剂对rhRnR复性并同时纯化效果的影响 | 第48-50页 |
| ·最优化条件下采用HPIEC-HPSEC法对rhRnR的复性及同时纯化 | 第50-52页 |
| ·本章小结 | 第52页 |
| 参考文献 | 第52-55页 |
| 第四章 HPHIC法复性并同时纯化rhRnR包涵体 | 第55-68页 |
| ·前言 | 第55-56页 |
| ·实验仪器和试剂 | 第56-57页 |
| ·仪器 | 第56-57页 |
| ·实验试剂 | 第57页 |
| ·实验过程 | 第57-58页 |
| ·色谱条件 | 第57页 |
| ·色谱过程 | 第57-58页 |
| ·15%SDS-PAGE电泳的操作 | 第58页 |
| ·蛋白质纯度的测定 | 第58页 |
| ·蛋白质含量的测定 | 第58页 |
| ·实验结果与讨论 | 第58-64页 |
| ·疏水型色谱饼和色谱柱对rhRnR的分离能力 | 第58-59页 |
| ·HPHIC流动相中脲浓度对rhRnR复性并同时纯化结果的影响 | 第59-60页 |
| ·HPHIC流动相的pH值对rhRnR复性并同时纯化结果的影响 | 第60-62页 |
| ·进样量对rhRnR复性效果的影响 | 第62-64页 |
| ·rhRnR的进一步纯化及变性液中添加去垢剂对rhRnR复性效果的影响 | 第64页 |
| ·HPHIC最优化条件下rhRnR的色谱分离图和SDS-PAGE电泳图 | 第64-65页 |
| ·HPHIC、HPIEC法复性rhRnR结果的比较 | 第65-66页 |
| ·本章小结 | 第66页 |
| 参考文献 | 第66-68页 |
| 论文总结 | 第68-69页 |
| 硕士期间发表论文情况 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
