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H5亚型禽流感病毒抗原捕捉ELISA诊断方法的建立

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-10页
1 引言第10-18页
   ·禽流感病毒(AIV)简介第10-12页
     ·AIV 形态结构第10-11页
     ·AIV 生物学特性第11页
     ·高致病性禽流感病毒(HPAIV)的生物学特性第11-12页
   ·HPAI 的危害及公共卫生学意义第12-15页
   ·高致病性禽流感的诊断方法及研究进展第15-16页
   ·本研究的目的和意义第16-18页
2 材料与方法第18-25页
   ·材料第18-19页
     ·病毒第18页
     ·单抗第18页
     ·实验动物第18页
     ·实验用阴阳性对照抗原第18页
     ·主要仪器设备及耗材第18页
     ·主要试剂和溶液第18-19页
   ·实验方法第19-25页
     ·多克隆抗体的制备第19-20页
     ·抗原捕捉ELISA 方法的建立第20-22页
     ·检测病毒尿囊液阴阳性判定标准的确定第22页
     ·特异性交叉试验第22页
     ·已知阳性尿囊液夹心ELISA 效价的测定第22页
     ·H5 亚型高致病性禽流感病毒人工感染样本的检测第22页
     ·人工感染样本阴阳性判定标准的确定及检测靶器官的选择第22页
     ·敏感性试验第22-23页
     ·重复性试验第23页
     ·试剂盒的组装及保存期试验第23-25页
3 结果与分析第25-51页
   ·单抗和酶标抗体最佳结合稀释度的确定第25-26页
   ·抗原和单抗最佳结合稀释度的确定第26页
   ·多抗和抗原最佳结合稀释度的确定第26-27页
   ·捕获抗体和单抗最佳稀释度的确定第27-28页
   ·包被液种类的选择第28-29页
   ·包被时间的选择第29页
   ·不同封闭液的选择第29-30页
   ·封闭时间的确定第30-31页
   ·单抗作用时间的确定第31-32页
   ·酶标抗体作用时间的确定第32-33页
   ·检测病毒尿囊液阴阳性判定标准的确定第33-34页
   ·特异性交叉试验第34页
   ·已知阳性尿囊液夹心ELISA 效价的测定第34-35页
   ·H5 亚型高致病性禽流感病毒人工感染样本的检测第35-38页
   ·人工感染样本阴阳性判定标准的确定及检测靶器官的选择第38-41页
   ·敏感性实验第41-42页
   ·重复性实验第42-44页
   ·试剂盒保存期试验第44-49页
     ·酶标板的保存期试验第44-46页
     ·阳性对照抗原的灭活及保存第46-47页
     ·单抗和酶标二抗的保存及稳定性试验第47-48页
     ·试剂盒整体保存期试验第48-49页
   ·小结第49-51页
     ·应用抗原捕捉ELISA 方法检测临床组织样本的操作步骤第49-50页
     ·阴阳性判定标准第50-51页
4 讨论第51-54页
   ·关于抗原捕捉ELISA 检测方法的建立第51-52页
     ·技术基础第51页
     ·可行性第51页
     ·应用前景第51-52页
   ·ELISA 反应条件的优化第52-54页
     ·ELISA 反应形式的选择第52页
     ·包被液的选择第52页
     ·温育温度的选择第52-53页
     ·封闭液的选择第53页
     ·试剂盒的稳定保存第53-54页
5 结论第54-55页
致谢第55-56页
参考文献第56-61页
攻读硕士期间发表的学术论文第61页

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