中文摘要 | 第1-9页 |
英文摘要 | 第9-10页 |
1 引言 | 第10-18页 |
·禽流感病毒(AIV)简介 | 第10-12页 |
·AIV 形态结构 | 第10-11页 |
·AIV 生物学特性 | 第11页 |
·高致病性禽流感病毒(HPAIV)的生物学特性 | 第11-12页 |
·HPAI 的危害及公共卫生学意义 | 第12-15页 |
·高致病性禽流感的诊断方法及研究进展 | 第15-16页 |
·本研究的目的和意义 | 第16-18页 |
2 材料与方法 | 第18-25页 |
·材料 | 第18-19页 |
·病毒 | 第18页 |
·单抗 | 第18页 |
·实验动物 | 第18页 |
·实验用阴阳性对照抗原 | 第18页 |
·主要仪器设备及耗材 | 第18页 |
·主要试剂和溶液 | 第18-19页 |
·实验方法 | 第19-25页 |
·多克隆抗体的制备 | 第19-20页 |
·抗原捕捉ELISA 方法的建立 | 第20-22页 |
·检测病毒尿囊液阴阳性判定标准的确定 | 第22页 |
·特异性交叉试验 | 第22页 |
·已知阳性尿囊液夹心ELISA 效价的测定 | 第22页 |
·H5 亚型高致病性禽流感病毒人工感染样本的检测 | 第22页 |
·人工感染样本阴阳性判定标准的确定及检测靶器官的选择 | 第22页 |
·敏感性试验 | 第22-23页 |
·重复性试验 | 第23页 |
·试剂盒的组装及保存期试验 | 第23-25页 |
3 结果与分析 | 第25-51页 |
·单抗和酶标抗体最佳结合稀释度的确定 | 第25-26页 |
·抗原和单抗最佳结合稀释度的确定 | 第26页 |
·多抗和抗原最佳结合稀释度的确定 | 第26-27页 |
·捕获抗体和单抗最佳稀释度的确定 | 第27-28页 |
·包被液种类的选择 | 第28-29页 |
·包被时间的选择 | 第29页 |
·不同封闭液的选择 | 第29-30页 |
·封闭时间的确定 | 第30-31页 |
·单抗作用时间的确定 | 第31-32页 |
·酶标抗体作用时间的确定 | 第32-33页 |
·检测病毒尿囊液阴阳性判定标准的确定 | 第33-34页 |
·特异性交叉试验 | 第34页 |
·已知阳性尿囊液夹心ELISA 效价的测定 | 第34-35页 |
·H5 亚型高致病性禽流感病毒人工感染样本的检测 | 第35-38页 |
·人工感染样本阴阳性判定标准的确定及检测靶器官的选择 | 第38-41页 |
·敏感性实验 | 第41-42页 |
·重复性实验 | 第42-44页 |
·试剂盒保存期试验 | 第44-49页 |
·酶标板的保存期试验 | 第44-46页 |
·阳性对照抗原的灭活及保存 | 第46-47页 |
·单抗和酶标二抗的保存及稳定性试验 | 第47-48页 |
·试剂盒整体保存期试验 | 第48-49页 |
·小结 | 第49-51页 |
·应用抗原捕捉ELISA 方法检测临床组织样本的操作步骤 | 第49-50页 |
·阴阳性判定标准 | 第50-51页 |
4 讨论 | 第51-54页 |
·关于抗原捕捉ELISA 检测方法的建立 | 第51-52页 |
·技术基础 | 第51页 |
·可行性 | 第51页 |
·应用前景 | 第51-52页 |
·ELISA 反应条件的优化 | 第52-54页 |
·ELISA 反应形式的选择 | 第52页 |
·包被液的选择 | 第52页 |
·温育温度的选择 | 第52-53页 |
·封闭液的选择 | 第53页 |
·试剂盒的稳定保存 | 第53-54页 |
5 结论 | 第54-55页 |
致谢 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-61页 |
攻读硕士期间发表的学术论文 | 第61页 |