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番茄Aux/IAA基因的克隆与功能分析

中文摘要第1-10页
Abstract第10-13页
缩略词表第13-15页
1 前言第15-25页
   ·课题的提出第15页
   ·前人研究工作第15-22页
     ·生长素生物活性的分析及其复杂性第15-17页
     ·生长素信号转导第17-22页
       ·生长素调节基因的表达第17-18页
       ·ARF介导的生长素诱导基因表达的改变第18-20页
       ·Aux/IAA蛋白阻遏ARF的功能第20页
       ·SCF~(TIR1)泛素连接酶介导Aux/IAA蛋白的降解第20-22页
       ·TIR1是一个生长素受体蛋白第22页
   ·基因定位分析第22-23页
   ·本研究的目的和内容第23-25页
2 材料与方法第25-34页
   ·植物材料第25页
   ·菌株、质粒及试剂第25页
   ·番茄Aux/IAA基因家族分析第25页
   ·基因组织/器官特异性表达分析第25-27页
   ·番茄8个Aux/IAA基因的RACE扩增第27-28页
     ·RACE(Rapid Amplification of cDNA Ends)引物第27-28页
     ·RACE扩增第28页
   ·基因定位分析第28-29页
   ·植物表达载体构建第29-31页
     ·RT-PCR/PCR扩增全长cDNA/gDNA第29页
     ·全长cDNA/gDNA序列分析第29-30页
     ·Sense和Antisense植物表达载体构建第30页
     ·RNAi植物表达载体的构建第30-31页
   ·番茄的遗传转化第31-32页
   ·转基因番茄植株的分子分析第32页
     ·番茄转化再生植株的PCR分析第32页
     ·转基因番茄植株的Southern杂交分析第32页
   ·番茄entire突变体SlIAA4基因的分析第32页
   ·番茄幼苗黄化和IAA诱导处理第32-33页
   ·种子发芽实验第33页
   ·幼苗水培研究第33-34页
3 结果与分析第34-75页
   ·番茄Aux/IAA基因生物信息学分析第34-39页
   ·番茄Aux/IAA基因在不同组织的表达分析第39-42页
   ·番茄Aux/IAA基因的克隆第42-51页
     ·SlIAA3(TC156698)基因的克隆与序列分析第42-45页
     ·SlIAA4(TC162280)基因的克隆与序列分析第45-48页
     ·SlIAA14(TC163401)基因的克隆与序列分析第48-51页
   ·番茄Aux/IAA基因多态性与拷贝数分析第51-54页
     ·SlIAA3基因组拷贝数与多态性分析第51-52页
     ·SlIAA4基因组拷贝数与多态性分析第52-53页
     ·SlIAA14基因组拷贝数与多态性分析第53-54页
   ·SlIAA3和SlIAA4基因的定位分析第54-56页
     ·SlIAA3基因的定位分析第54-55页
     ·SlIAA4基因的定位分析第55-56页
   ·植物遗传转化载体的构建第56-60页
     ·超量表达和反义抑制植物遗传转化载体的构建第57-59页
       ·SlIAA3基因超量表达和反义抑制植物遗传转化载体的构建第57-58页
       ·SlIAA4基因超量表达和反义抑制植物遗传转化载体的构建第58页
       ·SlIAA14基因超量表达和反义抑制植物遗传转化载体的构建第58-59页
     ·RNAi植物遗传转化载体的构建第59-60页
   ·转基因植株的获得第60-61页
   ·转基因番茄植株的分子分析第61-65页
     ·SlIAA3转基因植株的PCR分析第61-62页
     ·SlIAA4转基因植株的PCR分析第62-63页
     ·SlIAA14转基因植株的PCR分析第63-64页
     ·转基因植株的Southern杂交分析第64-65页
   ·转基因番茄植株生长发育变化的初步观察第65-73页
     ·SlIAA3基因影响番茄主根的形态建成第65-68页
     ·SlIAA4基因引起番茄多效性的表型第68-71页
       ·SlIAA4基因影响番茄叶片的形态建成第68-70页
       ·SlIAA4基因影响番茄开花第70-71页
     ·SlIAA14基因影响番茄主侧根的形态建成第71-73页
   ·番茄entire突变体SlIAA4基因的分析第73-75页
4 讨论第75-80页
   ·生物信息学与番茄基因克隆第75-76页
   ·激素类相关基因遗传转化问题的探讨第76页
   ·番茄叶片的形态建成与SlIAA4基因的功能第76-77页
   ·番茄根的形态建成与SlIAA3、SlIAA14基因的功能第77-80页
参考文献第80-92页
致谢第92-93页
附录第93-100页
 附录一:植物DNA的小量法提取程序第93-94页
 附录二:Trizol一步法提取植物总RNA方法第94-95页
 附录三:质粒的小量提取方法第95-96页
 附录四:Southern Blot程序第96-100页
 附录五:研究生期间已发表或接受的论文及会议论文摘要第100页

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