中文摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
缩略词表 | 第10-11页 |
1 前言 | 第11-24页 |
·课题的提出 | 第11-12页 |
·抗坏血酸在植物体内的生理功能 | 第12-13页 |
·抗坏血酸在植物细胞分裂中的作用 | 第12页 |
·抗坏血酸在细胞壁代谢和细胞膨大中的作用 | 第12-13页 |
·抗坏血酸在光合作用和光保护中的作用 | 第13页 |
·抗坏血酸在植物抗氧化系统中的作用 | 第13页 |
·抗坏血酸的转运 | 第13-15页 |
·抗坏血酸的代谢 | 第15-16页 |
·抗坏血酸生物代谢相关酶及其基因调控研究进展 | 第16-19页 |
·抗坏血酸氧化酶的研究 | 第16-17页 |
·抗坏血酸过氧化物酶的研究 | 第17-19页 |
·抗坏血酸与逆境条件 | 第19-21页 |
·活性氧及活性氧清除系统 | 第19-20页 |
·在环境胁迫条件下抗坏血酸的作用 | 第20-21页 |
·RNAi研究进展 | 第21-23页 |
·本研究的目的和内容 | 第23-24页 |
2 材料与方法 | 第24-31页 |
·植物材料 | 第24页 |
·菌株、质粒及试剂 | 第24页 |
·引物设计 | 第24-25页 |
·基因克隆特异引物 | 第24-25页 |
·其他引物 | 第25页 |
·RT-PCR | 第25页 |
·基因数字表达分析(digital expression analysis) | 第25-26页 |
·植物RNAi抑制表达载体 | 第26页 |
·番茄的遗传转化 | 第26-27页 |
·转基因番茄植株的分子检测 | 第27页 |
·番茄转化再生植株的PCR检测 | 第27页 |
·转基因番茄植株的Southern杂交分析 | 第27页 |
·转基因番茄植株抗坏血酸含量及酶活性分析 | 第27-29页 |
·转基因植株抗坏血酸含量测定 | 第27-28页 |
·转基因植株酶活性测定 | 第28-29页 |
·转基因番茄植株抗氧化逆境初步分析 | 第29-31页 |
·转基因后代植株盐处理试验 | 第29页 |
·叶片百草枯处理试验 | 第29页 |
·植物抗逆性的测定(电导仪法) | 第29-30页 |
·过氧化氢活性的测定 | 第30页 |
·光合速率的测定 | 第30页 |
·数据分析 | 第30-31页 |
3 结果与分析 | 第31-49页 |
·番茄抗坏血酸生物代谢相关酶基因的氨基酸序列分析 | 第31-34页 |
·番茄cAPX、AOBP、AO基因的氨基酸序列分析 | 第31页 |
·番茄tAPX基因的分析 | 第31-34页 |
·转基因植株的获得 | 第34-35页 |
·转基因番茄植株的分子检测 | 第35-36页 |
·转基因植株的PCR检测 | 第35页 |
·转基因植株的Southern杂交分析 | 第35-36页 |
·小结 | 第36页 |
·转基因番茄植株靶基因酶活性及抗坏血酸含量分析 | 第36-42页 |
·cAPX转基因植株T2代靶基因酶活性与抗坏血酸含量分析 | 第36-38页 |
·AOBP转基因植株T_2代靶基因酶活性与抗坏血酸含量分析 | 第38-39页 |
·tAPX转基因植株T_1代靶基因酶活性与抗坏血酸含量分析 | 第39-40页 |
·AO转基因植株T_1代靶基因酶活性与抗坏血酸含量分析 | 第40-41页 |
·小结 | 第41-42页 |
·番茄抗坏血酸生物代谢相关酶基因的表达分析 | 第42-44页 |
·番茄4个基因不同转化单株叶片的表达分析 | 第42页 |
·番茄抗坏血酸生物合成与代谢相关酶基因的数字表达分析 | 第42-44页 |
·小结 | 第44页 |
·转基因番茄植株抗逆性的初步观察 | 第44-49页 |
·转基因植株后代的盐处理实验 | 第44-46页 |
·转基因植株叶片百草枯处理后的表现 | 第46-47页 |
·小结 | 第47页 |
·转基因植株耐旱性初步观察 | 第47-49页 |
4 讨论 | 第49-55页 |
·抗坏血酸代谢相关酶的多基因家族现象 | 第49-50页 |
·数字表达分析在基因表达分析中的可靠性 | 第50-51页 |
·转基因调控抗坏血酸代谢的效果 | 第51页 |
·转基因植株突变体的获得 | 第51-52页 |
·通过调控抗坏血酸代谢提高植物抗逆性的可行性 | 第52-55页 |
·转基因植株后代的盐处理 | 第52页 |
·转基因植株后代的除草剂百草枯处理 | 第52-53页 |
·转基因植株后代的干旱处理 | 第53-55页 |
参考文献 | 第55-62页 |
附录 | 第62-68页 |
附录一:植物DNA的小量法提取程序 | 第62页 |
附录二:TriZOL一步法提取植物总RNA方法 | 第62-63页 |
附录三:质粒的小量提取方法 | 第63-64页 |
附录四:Southern Blotting程序 | 第64-67页 |
附录五:载体质粒图 | 第67页 |
附录六:硕士在读期间已接受会议论文摘要 | 第67-68页 |
致谢 | 第68页 |