| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-17页 |
| 1 国内外研究动态 | 第11-15页 |
| 2 展望 | 第15页 |
| 3 本研究的目的与意义 | 第15-16页 |
| 4 技术路线 | 第16-17页 |
| 第二章 水稻β-胡萝卜素羟化酶基因OsCH2和热激蛋白基因OsHSP82的生物信息学分析 | 第17-23页 |
| 1 材料与方法 | 第17页 |
| 2 结果与分析 | 第17-18页 |
| ·检索Tigr Rice Genome Annotation结果 | 第17页 |
| ·不同作物中的BLAST结果分析 | 第17-18页 |
| ·水稻β-胡萝卜素羟化酶基因OsCH2和热激蛋白基因OsHSP82的蛋白跨膜结构分析 | 第18页 |
| ·水稻β-胡萝卜素羟化酶基因OsCH2和热激蛋白基因OsHSP82的蛋白序列保守区的功能分析 | 第18页 |
| 3 讨论 | 第18-23页 |
| 第三章 水稻β-胡萝卜素羟化酶基因OsCH2和热激蛋白基因OsHSP82超强表达的载体构建 | 第23-39页 |
| 1 材料与方法 | 第24-34页 |
| ·材料 | 第24-25页 |
| ·质粒与菌种 | 第24页 |
| ·引物 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24-25页 |
| ·酶类 | 第24页 |
| ·一般常用试剂 | 第24页 |
| ·试剂盒 | 第24-25页 |
| ·方法 | 第25-34页 |
| ·质粒的大肠杆菌转化 | 第25-26页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第25页 |
| ·大肠杆菌的转化 | 第25-26页 |
| ·菌种永久保存 | 第26页 |
| ·质粒的提取与鉴定 | 第26-28页 |
| ·质粒的提取 | 第26-27页 |
| ·质粒的浓度测定和纯度检测 | 第27页 |
| ·质粒的琼脂糖凝胶电泳检测 | 第27-28页 |
| ·质粒DNA的限制性内切酶酶切鉴定 | 第28页 |
| ·PCR扩增水稻β-胡萝卜素羟化酶基因OsCH2和热激蛋白基因OsHSP82的全长cDNA | 第28-29页 |
| ·PCR产物的切胶纯化回收 | 第29-30页 |
| ·PCR产物的双酶切及纯化回收 | 第30-31页 |
| ·表达载体P1300M的双酶切及纯化回收 | 第31页 |
| ·连接反应 | 第31-32页 |
| ·大肠杆菌转化 | 第32页 |
| ·菌落PCR筛选含重组质粒菌落 | 第32-33页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第33-34页 |
| ·PCR方法扩增全长cDNA鉴定重组子 | 第33页 |
| ·双酶切全长cDNA片断鉴定重组子 | 第33页 |
| ·菌种的永久保存 | 第33-34页 |
| 2 结果与分析 | 第34-38页 |
| ·质粒的浓度和纯度检测 | 第34页 |
| ·质粒的酶切检测 | 第34页 |
| ·PCR扩增水稻β-胡萝卜素羟化酶基因OsCH2和热激蛋白基因OsHSP82全长cDNA | 第34页 |
| ·重组子的检测 | 第34-38页 |
| ·菌落PCR | 第35-36页 |
| ·重组子的PCR和酶切鉴定 | 第36-38页 |
| 3 讨论 | 第38-39页 |
| 第四章 农杆菌介导的水稻遗传转化研究 | 第39-47页 |
| 1 材料与方法 | 第39-45页 |
| ·材料 | 第39-41页 |
| ·主要试剂 | 第39页 |
| ·培养基 | 第39-41页 |
| ·方法 | 第41-45页 |
| ·农杆菌的冻融法转化 | 第41-43页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第41页 |
| ·农杆菌的转化 | 第41页 |
| ·菌落PCR筛选阳性转化菌落 | 第41-42页 |
| ·农杆菌的质粒提取 | 第42-43页 |
| ·PCR鉴定提取的质粒 | 第43页 |
| ·农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第43-45页 |
| ·水稻愈伤组织的诱导 | 第43页 |
| ·根癌农杆菌与水稻愈伤组织的共培养 | 第43-44页 |
| ·抗性愈伤组织筛选和植株再生 | 第44-45页 |
| 2 结果与分析 | 第45-46页 |
| ·超强表达载体pOEOsHSP82和pOEOsCH2转化农杆菌 | 第45页 |
| ·水稻愈伤组织的诱导 | 第45页 |
| ·抗性愈伤组织筛选 | 第45页 |
| ·抗性愈伤组织分化培养 | 第45页 |
| ·抗性转化苗的生根培养 | 第45-46页 |
| 3 讨论 | 第46-47页 |
| 第五章 结论 | 第47-49页 |
| 1 主要的研究结果 | 第47页 |
| 2 主要创新之处 | 第47-48页 |
| 3 今后的研究方向与目标 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-53页 |
| 缩写词 | 第53-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 作者简介 | 第56页 |
