中文摘要 | 第1-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
第一部分 文献综述 | 第11-26页 |
1. 植物对Na~+的吸收、转运与细胞离子均衡 | 第11-14页 |
·Na~+进入植物细胞的途径 | 第11-12页 |
·Na~+排出植物细胞的途径 | 第12-13页 |
·Na~+在植物细胞内的区隔化 | 第13页 |
·Na~+在植物细胞与组织器官内的转移 | 第13-14页 |
2. 植物的盐害 | 第14-15页 |
·渗透胁迫 | 第14-15页 |
·离子胁迫 | 第15页 |
3. 离子稳态的重建及其调控机制 | 第15-19页 |
4. 盐芥作为耐盐的模式植物 | 第19-22页 |
5. 基因沉默 | 第22-26页 |
·因沉默现象的发现 | 第23页 |
·基因沉默的分子机制 | 第23页 |
·dsRNA、siRNA 和MicroRNA | 第23-24页 |
·转录后基因沉默技术的应用及展望 | 第24-26页 |
第二部分 实验论文 | 第26-44页 |
一、实验材料及实验方法 | 第26-34页 |
1. 实验材料 | 第26-27页 |
·植物材料 | 第26页 |
·菌种 | 第26页 |
·酶、化学试剂及试剂盒 | 第26页 |
·培养基 | 第26页 |
·质粒提取液 | 第26-27页 |
·主要仪器设备 | 第27页 |
·软件 | 第27页 |
2 实验方法 | 第27-34页 |
·大肠杆菌感受态的制备及转化 | 第27-28页 |
·质粒的提取 | 第28页 |
·盐芥植物材料的种植及处理 | 第28-29页 |
·植物基因组DNA 的提取 | 第29页 |
·Basta 抗性苗的PCR 检测 | 第29-30页 |
·RNeasy Plant Mini Kit 提取植物总RNA 及DNA 酶消化 | 第30-31页 |
·RNA 的定量 | 第31页 |
·RNA 的反转录及cDNA 模板的稀释 | 第31页 |
·实时定量PCR 引物的设计 | 第31-32页 |
·实时定量PCR (Real Time PCR) | 第32-33页 |
·Real Time PCR 数据分析的方法 | 第33页 |
·野生型植株和转基因植株NaCl 耐性分析 | 第33页 |
·盐胁迫处理 | 第33页 |
·Na~+、K~+离子含量的测定 | 第33-34页 |
·丙二醛(MDA)含量的测定 | 第34页 |
二、实验结果 | 第34-41页 |
1 表达载体的构建、验证及盐芥的转化 | 第34页 |
2 SOS1在盐芥中基因沉默的结果 | 第34-41页 |
·除草剂FINALE?筛选盐芥抗性苗 | 第34页 |
·盐芥SOS1基因沉默转基因苗的分子鉴定 | 第34-35页 |
·SOS1基因沉默的盐芥在盐胁迫条件下的生长情况 | 第35-36页 |
·T_2代转基因苗在MS_0培养基上的筛选 | 第35页 |
·转基因植株在盐胁迫条件下的生长情况 | 第35-36页 |
·不同的转基因株系盐敏感性的差异以及RNA 水平分析 | 第36-38页 |
·材料处理 | 第36页 |
·总RNA 的提取 | 第36-37页 |
·不同株系SOS1的转录水平及盐敏感性 | 第37-38页 |
·200m M NaCl 处理24 小时后野生型和转基因株系1-10 表达谱的比较 | 第38页 |
·转基因植株在不同盐胁迫条件下的生长情况 | 第38-39页 |
·盐处理对转基因植株与野生型植株 Na~+、K~+含量及 K~+/Na~+比的影响 | 第39-40页 |
·盐处理对转基因植株与野生型植株丙二醛(MDA)含量的影响 | 第40-41页 |
三、讨论 | 第41-44页 |
参考文献 | 第44-50页 |
致谢 | 第50页 |